DB—1MS氣相色譜柱法測定面包和糕點中的甜蜜素

董瑋瑋　楊玉平等

摘要：建立一種運用ＤＢ－１ＭＳ毛細管色譜柱測定面包和糕點中甜蜜素的分析方法。甜蜜素和ＮａＮＯ２在Ｈ２ＳＯ４酸性條件下生成環(huán)己基亞硝酸酯，運用ＤＢ－１ＭＳ毛細管色譜柱進行測定。在１．０～５０μｇ／ｍＬ線性范圍內，衍生化后標準曲線的重現(xiàn)性較好，相關系數(shù)為０．９９９９。當添加濃度為０．０６ｇ／ｋｇ時，方法回收率為８８．５％～１０８．３％；分流比為５∶１時，方法檢出限為１０．８ｍｇ／ｋｇ。本法靈敏度高，方便快速，具有良好的回收率和方法檢出限，適用于面包、糕點中甜蜜素的檢測分析。

關鍵詞：ＤＢ－１ＭＳ毛細管色譜柱；甜蜜素；重現(xiàn)性

中圖分類號：Ｏ６５７．７ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）24－5771-03

甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）是一種人工合成的非營養(yǎng)型食品甜味劑，廣泛應用于蜜餞、釀造等各種食品。我國對食品中甜蜜素有嚴格的限量標準，面包和糕點中的限量均為０．６５ｇ／ｋｇ（以環(huán)己基氨基磺酸計）［１］，美國、加拿大、歐盟和日本等國家則禁止使用甜蜜素作為食品添加劑［２］。

ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３推薦糕點中甜蜜素測定采用薄層層析法進行分析。事實上，由于薄層色譜法的繁瑣、費時以及試劑有毒等因素，正逐漸被氣相色譜法所取代。目前已有不少文獻相繼報道了對上述國標方法的探討和改進［３－６］。除改進前處理方法外，氣相色譜條件的優(yōu)化也是研究熱門之一。在ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３中，氣相色譜法推薦使用的２ｍＵ型不銹鋼柱，也正逐漸被高靈敏度和低流失的毛細管色譜柱代替［７，８］。但是目前較多使用的毛細管色譜柱為弱極性，如ＨＰ－５［８，９］、ＤＢ－１７０１［４］，中等極性，如ＤＢ－３５［１０］和極性ＤＢ－ＦＦＡＰ［１１］等色譜柱，另有報道使用ＤＢ－１色譜柱對葡萄酒中的甜蜜素進行測定［１２］。本試驗采用ＤＢ－１ＭＳ非極性毛細管色譜柱對面包和糕點中甜蜜素的含量進行了分析，以期為準確定量分析甜味劑提供有效的檢測方法。

１ 材料與方法

１．１ 儀器與試劑

氣相色譜儀Ａｇｉｌｅｎｔ７８９０Ａ，ＦＩＤ檢測器，離心機。

環(huán)己基氨基磺酸鈉（甜蜜素）標準品購自美國Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司（純度為９９．０％）。

分析用試劑為正己烷（Ｔｅｄｉａ，色譜純）。硫酸（分析純），亞硝酸鈉（分析純），氯化鈉（優(yōu)級純）；去離子水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。

１．２ 方法

２ 結果與分析

２．１ 色譜條件的優(yōu)化

色譜柱柱溫、進樣口溫度、載氣流速等參數(shù)均可對色譜圖產生影響。本試驗針對色譜柱柱溫進行了選擇，比較了色譜柱恒溫５０、６０、７０和８０℃的分離情況。結果表明，柱溫６０℃時得到的環(huán)己醇亞硝酸酯峰形較窄，具有較好的對稱性，無拖尾現(xiàn)象，和環(huán)己醇能夠實現(xiàn)有效分離（分離度＞２），該條件下色譜圖見圖１。另外，環(huán)己醇亞硝酸酯在６０℃柱溫條件下比５０℃時出峰時間相對縮短，有效節(jié)約了檢測時間。因此，最終選擇６０℃為最佳色譜柱溫度。同時，ＤＢ－１ＭＳ的柱效較高，環(huán)己醇亞硝酸酯標準品在色譜柱中的理論塔板數(shù)可高達１０萬以上，可滿足檢測分析的需要。由于環(huán)己醇和亞硝酸鈉生成環(huán)己基亞硝酸酯是一個動態(tài)反應，高溫環(huán)境放置太久，會導致環(huán)己醇亞硝酸酯峰和環(huán)己醇的峰面積均產生一定的變化，因此樣品在衍生化反應完全后應及時進行氣相色譜分析，以免影響定量結果。

２．２ 標準曲線的重現(xiàn)性

２．３ 方法回收率

２．４ 方法檢出限

在分流比為５∶１的條件下，以３倍信噪比計，此３種基質的方法檢出限分別為１２．５、１１．５、１０．８ｍｇ／ｋｇ，方法靈敏度較高，即當使用不分流模式時，該方法檢出限可低至２ｍｇ／ｋｇ。

２．５ 檢測結果

在分析的１２０份面包和糕點樣品中，甜蜜素的檢出率為６％，合格率為１００％，均未超出ＧＢ２７６０－２０１１規(guī)定的限量標準０．６５ｇ／ｋｇ（以環(huán)己基氨基磺酸計）［１］。

３ 小結

本試驗應用ＤＢ－１ＭＳ毛細管色譜柱對甜蜜素進行檢測，具有較高的靈敏度和較低的方法檢出限。同時，該方法的重現(xiàn)性較好，可適用于日常食品檢測分析。需要注意的是，在高溫環(huán)境中環(huán)己醇亞硝酸酯和環(huán)己醇的動態(tài)反應非常劇烈，衍生化過程必須在冰浴中進行，同時衍生化后樣品盡快進行氣相色譜的分析，以保證得到準確和客觀的試驗數(shù)據(jù)。

參考文獻：

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［２］王 宇．食品中甜蜜素檢測的研究進展［Ｊ］．職業(yè)與健康，２００８，２４（１４）：１４４３－１４４４．

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［４］李秀勇，劉惠濤，胡之德．氣相色譜法測定水果罐頭中甜蜜素［Ｊ］．理化檢驗（化學分冊），２００５，４１（９）：６５１－６５３．

［５］余 濤，葉 堅．氣相色譜測定甜蜜素改良方法的研究［Ｊ］．中國衛(wèi)生檢驗雜志，２００６，１６（１２）：１４５３－１４５７．

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［８］鄭三燕，林少美，梁曉蓉，等．毛細管柱氣相色譜法對測定固體食品中甜蜜素方法的改進［Ｊ］．中國熱帶醫(yī)學，２００８，８（１１）：２０３４－２０３５．

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［１０］陳 玲，雷 蓓．毛細管氣相色譜法測定糕點中甜蜜素（環(huán)已基氨基磺酸鈉）［Ｊ］．河北農業(yè)科技，２００８（１９）：４７．

［１１］郝 文，孫 維，唐 巖．食品中甜蜜素的毛細管氣相色譜測定法［Ｊ］．中國衛(wèi)生檢驗雜志，２００５，１５（１１）：１３４１．

［１２］李鋒格，竇 輝，姚偉琴，等．毛細管氣相色譜法測定葡萄酒中甜蜜素［Ｊ］．中國衛(wèi)生檢驗雜志，２００５，１５（６）：７０７－７０８．