重度痤瘡患者血清中IL-18、IL-18BP及IFN-γ的表達(dá)分析

劉彥婷 曾維惠 徐磊 易清玲

[摘要]目的：探討重度（IV級(jí)）痤瘡患者血清中白介素18（IL-18）、白介素18結(jié)合蛋白（IL-18BP）和γ干擾素（IFN-γ）的表達(dá)水平及其與發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。方法：選擇重度痤瘡患者30例，健康對(duì)照者12例，用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)其血清IL-18、IL-18BP及IFN-γ表達(dá)水平，分析兩組間表達(dá)水平有無差異及其相關(guān)性。結(jié)果：重度痤瘡組血清中IL-18、IL-18BP及IFN-γ表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照組（P＜0.01）。直線相關(guān)分析顯示：重度痤瘡組和健康對(duì)照組的IL-18、IL-18BP及IFN-γ表達(dá)水平兩兩之間均無直線相關(guān)性。（P＞0.05）。結(jié)論：IL-18、IL-18BP及IFN-γ三者均參與了重度痤瘡的發(fā)病機(jī)制，可能由于三者所形成的負(fù)反饋循環(huán)失衡所致。

[關(guān)鍵詞]重度痤瘡；白介素18；白介素18結(jié)合蛋白；γ干擾素；機(jī)制

[中圖分類號(hào)]R758.73[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1008-6455（2012）06-0950-02

痤瘡是一種由多因素引起的發(fā)生于毛囊皮脂腺的慢性炎癥性疾病，臨床上主要表現(xiàn)為粉刺、丘疹、膿皰、囊腫、結(jié)節(jié)和瘢痕等，多見于面部、胸部及背部等皮脂腺分泌旺盛的部位，嚴(yán)重影響人們的容貌和情緒，對(duì)正常人的就業(yè)、社交和婚育等產(chǎn)生重要影響[1]。臨床上按照病情嚴(yán)重程度，采用四級(jí)國(guó)際改良分級(jí)方法分為：I級(jí)：粉刺為主要的皮損，可有少量丘疹和膿皰，總病灶數(shù)<30個(gè)；II級(jí)：有粉刺，伴有中等數(shù)量的丘疹和膿皰，總病灶數(shù)31～50個(gè)；III級(jí)：有粉刺，伴有大量丘疹和膿皰，偶見大的炎性損害，分布廣泛，總病灶數(shù)51～100個(gè)，有少數(shù)結(jié)節(jié)；IV級(jí)：除上述皮疹外，又伴有結(jié)節(jié)與囊腫，多數(shù)有疼痛，并形成囊腫。結(jié)節(jié)、囊腫往3個(gè)以上[2]。目前研究認(rèn)為痤瘡的發(fā)病機(jī)制與雄激素水平、皮脂分泌增加、毛囊導(dǎo)管角化過度、痤瘡丙酸桿菌感染有關(guān)。關(guān)于痤瘡炎癥損害的形成機(jī)制，以微生物學(xué)和免疫學(xué)兩大學(xué)說為主，其中有多種細(xì)胞因子的參與。本文采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)重度痤瘡患者及健康對(duì)照者血清中IL-18(白介素18)及IL-18BP（白介素18結(jié)合蛋白）水平和γ干擾素（IFN-γ）的表達(dá)，探討?zhàn)畀徎颊呙庖郀顩r與重度痤瘡發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。

1對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象：選擇2010年9月～2010年12月在本科門診就診、符合重度痤瘡的患者共30例，男18例，女12例，平均年齡22歲，病程：2月～7年；痤瘡嚴(yán)重程度參照Pillsbury分級(jí)法，選擇重度痤瘡30例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①職業(yè)性、藥物性、化妝品、經(jīng)期前痤瘡以及遲發(fā)性痤瘡；②自身免疫性或免疫缺陷疾??；③有變態(tài)反應(yīng)性疾?。虎懿l(fā)其他急、慢性感染性疾病及病毒攜帶者。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。對(duì)照組：為同期在本院健康體檢中心體檢者，選取其中未患疾病的健康者共12名。各組問的性別、年齡等一般情況要求匹配，經(jīng)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集及處理：所有研究對(duì)象均于清晨空腹時(shí)采肘靜脈血8～10ml，女性避開月經(jīng)期，分離血清置于-20℃凍存待統(tǒng)一條件下檢測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法：檢測(cè)血清IL-18及IL-18BP采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)。試劑盒由北京博奧森生物工程有限公司提供，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS13.0軟件，計(jì)量資料結(jié)果以x±s表示，所有資料均進(jìn)行正態(tài)性和方差齊性檢，符合則采用t檢驗(yàn)，用直線相關(guān)分析法處理相關(guān)指標(biāo)間的關(guān)系。以上檢驗(yàn)均以雙側(cè)P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 病例組和對(duì)照組間血清IL-18及IL-18BP水平檢測(cè)結(jié)果：檢測(cè)結(jié)果見表1和圖1。兩組間IL-18、IL-18BP和IFN-γ表達(dá)水平經(jīng)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表1可見：P＜0.01，表示與正常對(duì)照組相比，重度痤瘡組的IL-18、IL-18BP、IFN-γ表達(dá)水平均有顯著升高。由圖1可見：與正常對(duì)照組相比，重度痤瘡組的IL-18、IL-18BP、IFN-γ表達(dá)水平均有顯著升高（P＜0.01）。

2.2 病例組和對(duì)照組血清中IL-18和IL-18BP水平之間的相關(guān)性分析，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

3討論

3.1 痤瘡的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，其中炎癥反應(yīng)的損害起到重要作用，尤其在重度痤瘡患者，炎癥反應(yīng)更為顯著，機(jī)體在痤瘡丙酸桿菌的刺激下，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，啟動(dòng)免疫系統(tǒng)。

3.2 IL-18是近年來發(fā)現(xiàn)的一種糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族成員，分子結(jié)構(gòu)初步明確，并發(fā)現(xiàn)了其多種生物學(xué)功能，如誘導(dǎo)Thl細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，增強(qiáng)FasL介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)，與IL-12相互作用可更強(qiáng)大誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生，預(yù)示著IL-18這一細(xì)胞因子在抗微生物，抗自身免疫性疾病，以及臨床腫瘤治療等方面有著廣闊的應(yīng)用前景[4]。IL-18可促進(jìn)多種細(xì)胞因子的分 泌，如IL-6、IL-8、TNF等，進(jìn)而誘導(dǎo)Th1細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ，與IL-12共同作用誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ有協(xié)同作用[3-4]。

3.3 IL-18BP是一種有效地IL-18內(nèi)源性天然拮抗劑，它能夠以高親和力與IL-18結(jié)合，而IL-18是IFN-γ產(chǎn)生的重要誘導(dǎo)因子，而IFN-γ可刺激角質(zhì)細(xì)胞等大量表達(dá)IL-18BP，IL-18BP通過與IL-18結(jié)合，抑制IL-18誘導(dǎo)Th1等細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ，降低IL-18對(duì)NF-KB的激活作用，還可以使LPS誘導(dǎo)的IFN-r的合成減少90%。因此，IL-18BP被認(rèn)為是IL-18的天然拮抗劑，IL-18BP對(duì)IL-18生物學(xué)活性的調(diào)節(jié)可能是通過IFN-γ介導(dǎo)的負(fù)反饋機(jī)制實(shí)現(xiàn)的[4]。

3.5 重度痤瘡患者組與健康對(duì)照組比較，IL-18和IL-18BP濃度有顯著性升高，IL-18BP的升高是對(duì)IL-18生成最重要的適應(yīng)性反應(yīng)，然而IL-18的升高和IL-18BP的升高沒有直線相關(guān)性，可能有兩方面原因，一方面，IL-18除了與IL-18BP結(jié)合，還有其他相關(guān)受體與之結(jié)合；另一方面，IL-18不僅能誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生，還有其他多種生物學(xué)活性。此外，IL-18BP的升高，并不能夠完全控制炎癥的進(jìn)展，分析其機(jī)制，可能存在以下兩種原因：其一，分泌的IL-18BP數(shù)量不足以完全抑制IL-18的生物學(xué)活性；其二，其他的炎性因子，如IL-6、IL-8、TNF-α等[5]，同時(shí)參與了重度痤瘡的發(fā)病。

綜上所述，IL-18、IL-18BP、IFN-γ都參與了重度痤瘡的炎癥損害機(jī)制，IL-18BP通過與IL-18結(jié)合，在一定程度上減輕的炎癥反應(yīng)、或延緩了炎癥進(jìn)展，由此可見，重度痤瘡患者的發(fā)病機(jī)制與IL-18、IL-18BP、IFN-γ組成的負(fù)反饋平衡破壞相關(guān)，也提示臨床上抗生素對(duì)重度痤瘡治療的重要性，但其具體的機(jī)制及信號(hào)通路，還有待于進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

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[收稿日期]2012-02-21 [修回日期]2012-04-09

編輯/張惠娟