正畸復(fù)發(fā)過程中大鼠磨牙齦溝液IL-6水平的改變

高睿 邵玶 閆偉軍 安晶濤 張苗苗

[摘要]目的:研究正畸復(fù)發(fā)過程中大鼠磨牙齦溝液中IL-6水平的變化。方法：將20只Wistar雄性大鼠上頜右側(cè)第一磨牙建立正畸牙齒移動模型，裝置安裝10天后去除，分別收集安裝裝置前及裝置去除后第4天、第8天、第12天的右上頜第一磨牙齦溝液，ELISA法檢測各時間段齦溝液中IL-6的含量，并將所測結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果：去除裝置后第4天大鼠磨牙齦溝液中IL-6水平高于其余3組，P都小于0.05；去除裝置后第8天與第12天IL-6水平相差不多，且P>0.05；而這兩組IL-6水平分別高于未安裝裝置前的水平，P都小于0.05。 結(jié)論：正畸復(fù)發(fā)對大鼠磨牙齦溝液中IL-6水平有影響。

[關(guān)鍵詞]正畸復(fù)發(fā)；白介素-6；齦溝液；正畸牙齒移動模型

[中圖分類號]R332R783.5[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455（2012）06-0945-02

正畸治療后復(fù)發(fā)是臨床上較為棘手的問題，正畸復(fù)發(fā)不僅給患者心理帶來影響，而且對牙周組織也存在一定危害。齦溝液中炎癥介質(zhì)的成分及水平的改變是牙周組織損害的早期變化之一，白細胞介素6（IL-6）在牙周炎癥的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。本實驗將通過檢測正畸牙齒移動大鼠模型齦溝液中IL-6水平的變化，為進一步研究正畸復(fù)發(fā)對牙周組織的影響奠定基礎(chǔ)。

1材料和方法

1.1 實驗動物：20只Wistar健康雄性大鼠（體重220+10g,哈醫(yī)大一院實驗動物中心提供），在12h光/暗節(jié)律的實驗環(huán)境中習慣性喂養(yǎng)，自由飲水，攝食，一周后開始進行實驗。

1.2動物模型的建立：根據(jù)King等[1]提出的方法建立正畸牙齒移動模型，經(jīng)2%水合氯醛腹腔注射麻醉，麻藥用量3mg/kg。加力裝置包括NiTi螺旋拉簧（直徑0.12mm）,結(jié)扎絲（直徑0.025mm）,樹脂（3M公司），將大鼠右上第一磨牙近牙頸部和上頜切牙頰舌側(cè)牙冠近牙頸部分別磨一深約0.5mm的溝，結(jié)扎絲繞過磨牙牙頸部后在其近中形成一個小圈，將兩個上頜中切牙，用結(jié)扎絲將其“8”字扎在一起，并在右側(cè)切牙的遠中頸部也形成一結(jié)扎絲小圈，再用樹脂粘結(jié)劑在備好的槽溝內(nèi)加固結(jié)扎絲，并將粘結(jié)劑表面打磨拋光，以減少對軟組織的刺激，將NiTi螺旋拉簧用結(jié)扎絲結(jié)扎于預(yù)留的小圈上，加力時使彈簧拉伸，力值為50g，在力的作用下，右側(cè)上頜第一磨牙向近中移動，左側(cè)未經(jīng)處理，大鼠正常飲食水，10天后去除正畸加力裝置。

1.3 齦溝液的采集：裝置去除后第4天、第8天、第12天分別收集大鼠右側(cè)上頜第一磨牙的齦溝液。根據(jù)Lamster[2]方法：大鼠在全麻下用棉球?qū)⒂疑系谝荒パ辣砻娓魸癫⒋蹈?，采?5號根管吸潮紙尖，置于近中頰側(cè)齦溝中30s，重復(fù)測量3次，每次用5根吸潮紙尖，若紙尖有血污染則棄之重取，將收集后的紙尖立即放入裝有樣品稀釋液的微離心管等中并置于-70℃冰箱保存待用，檢測時室溫放置1h再離心10min（3000r/min）后，吸取液體。

1.4 IL-6含量的測定：采用雙抗體夾心ELISA法對GCF中的IL-6進行檢測，ELISA試劑盒由欣博盛生物科技有限公司生產(chǎn)，實驗嚴格按照試劑盒所附說明書進行操作。

1.5 統(tǒng)計學分析：統(tǒng)計分析應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，對不同時間大鼠GCF中IL-6含量采用單因素方差分析和t檢驗進行統(tǒng)計學分析。

2結(jié)果

安裝正畸牙齒移動裝置前大鼠右上頜第一磨牙齦溝液IL-6水平為（15.461±1.732）ng/L，裝置去除后第4天、第8天和第12天大鼠右上頜第一磨牙齦溝液IL-6水平分別（28.523±1.597）ng/L、(20.798±0.615)ng/L和(19.312±1.026)ng/L。

其中去除裝置后第4天大鼠磨牙齦溝液中IL-6水平高于其余各組，且有顯著差異（P<0.05）。去除裝置后第8天和第12天比較，IL-6的水平相差不多，且P>0.05，然而這兩組分別與未安裝裝置前比較，P都<0.05。

3討論

3.1 正畸治療后復(fù)發(fā)是一個復(fù)雜的問題，存在著許多可能的因素，有研究表明正畸治療后的穩(wěn)定與復(fù)發(fā)是不可預(yù)見的，至少治療后10年還存在33%～90%的復(fù)發(fā)率[3-4]正畸治療后復(fù)發(fā)，不僅是浪費時間和財力，而且對患者生理上和心理上造成不小的影響，尤其是對牙周組織的損害是不可忽視的[5]。目前許多研究報道了正畸牙齒移動過程中對牙周組織的影響，但從正畸復(fù)發(fā)對齦溝液中炎癥介質(zhì)水平影響的研究，幾乎沒有報道。

3.2 齦溝液(Gingival Crevicular Fluid, GCF)是通過牙齦溝內(nèi)上皮和結(jié)合上皮，從牙齦結(jié)締組織及滲入到齦溝內(nèi)的液體Davidovitch[6]提出，正畸牙齒移動早期是個急性炎癥過程，其特征是牙周血管擴張和白細胞從毛細血管中游移出來，機械力作用于牙周靶細胞產(chǎn)生一系列細胞因子，組織降解性酶，酸性產(chǎn)物等，促進牙槽骨的吸收與沉積。上述發(fā)生于深部牙周組織的改變會導(dǎo)致齦溝液的流量和成分的改變，因此檢測齦溝液可以幫助確定牙移動過程中牙周組織的改建狀態(tài)，為正畸提供有用的參考。由于齦溝液具有易獲得，無損傷，能重復(fù)取樣，患者易接受及靈敏反應(yīng)等優(yōu)點，在臨床早期診斷中具有重要的研究價值和臨床前景[7]。

3.3 研究表明，牙周炎的發(fā)生和發(fā)展與細胞因子網(wǎng)絡(luò)有密切關(guān)系[8]。IL-6由成纖維細胞，上皮細胞，單核巨噬細胞，成骨細胞等細胞合成分泌，具有多種生物學活性，其在機體防御，免疫反應(yīng)和造血反應(yīng)等過程中均起到重要作用。近年來，它在炎癥反應(yīng)中的地位倍受關(guān)注：它能夠調(diào)節(jié)急性期蛋白質(zhì)產(chǎn)生；促進炎癥細胞的聚集，活化和炎癥介質(zhì)的釋放；加重炎癥癥狀[9-10]。大量研究表明IL-6在牙周炎的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用Johnson等[11-12]運用免疫學方法測知，牙周炎患者炎癥部位IL-6分泌量明顯增多。

3.4 本研究建立了正畸牙齒移動模型，用ELISA法分別檢測大鼠磨牙移動前，齦溝液中的IL-6水平及去除牙齒移動裝置后第4天，第8天，第12天齦溝液中IL-6的水平，并將四組之間數(shù)值進行了比較，發(fā)現(xiàn)去除裝置后第4天大鼠齦溝液中的IL-6的水平要明顯高于其他三組（P<0.05）。由此可推測正畸裝置去除后，伴隨著磨牙逐漸回復(fù)的原來的位置的過程中，磨牙牙周組織炎癥程度增加，將導(dǎo)致牙周組織破壞的加重。裝置去除后第8天和第12天的齦溝液中的IL-6水平相差無幾（P>0.05），可能由于此時磨牙已基本回復(fù)到未移動前的位置，牙周組織狀態(tài)已趨于穩(wěn)定，以致其炎癥介質(zhì)的釋放水平趨于穩(wěn)定，而且由于牙周組織不再受水平向的牽拉力[13-14]，使得炎癥程度減輕以致炎癥介質(zhì)IL-6的水平降低。然而去除裝置后的第8天和第12天IL-6的水平都高于未放置正畸裝置前，可能是正畸裝置本身就作為一種刺激物的存在，導(dǎo)致大鼠口腔的自潔作用降低，食物殘渣刺激牙周組織，致使炎癥介質(zhì)IL-6的分泌水平增高，而且可能要經(jīng)歷更長的一段時間IL-6分泌水平才能接近未安放正畸裝置前。由此可以說明，正畸治療后復(fù)發(fā)對大鼠齦溝液中炎癥介質(zhì)IL-6的水平產(chǎn)生影響，可能加速大鼠牙周炎的發(fā)病過程，使牙周組織損害更加嚴重。本文僅從大鼠活體的體液水平探討了正畸治療后復(fù)發(fā)對牙周組織的影響，但其具體機制及正畸復(fù)發(fā)對IL-6基因水平的影響還有待于進一步研究。

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[收稿日期]2012-02-22[修回日期]2012-04-17

編輯/張惠娟