抗氧化劑復(fù)合物對(duì)急性紫外線(xiàn)照射所致皮膚日曬傷的保護(hù)作用

鄭欣 吳嚴(yán)等

[摘要]目的：觀察含維生素C／E及阿魏酸的抗氧化劑復(fù)合物對(duì)模擬目光照射所致皮膚急性日曬傷的保護(hù)作用。方法：招募12名健康志愿者，在背部分別選取4個(gè)試驗(yàn)區(qū)域。區(qū)域1和區(qū)域2分別涂抹抗氧化劑復(fù)合物和基質(zhì)共4天，第4天涂抹產(chǎn)品半小時(shí)后予1～5倍最小紅斑量的模擬目光照射；區(qū)域3僅予照光而不涂抹任何產(chǎn)品(陽(yáng)性對(duì)照)；區(qū)域4不予照光亦不涂抹任何產(chǎn)品(空白對(duì)照)。對(duì)各區(qū)域留取大體照片，測(cè)量皮膚紅斑指數(shù)。結(jié)果：隨光照劑量增加，各區(qū)域紅斑顏色逐漸加深、紅斑指數(shù)均值逐漸升高。區(qū)域1的紅斑程度及紅斑指數(shù)差值顯著低于區(qū)域2或區(qū)域3。結(jié)論：外用含維生素C／E及阿魏酸的抗氧化劑復(fù)合物可有效保護(hù)模擬日光照射引起的急性日曬傷。

[關(guān)鍵詞]抗氧化劑；紫外線(xiàn)照射；日曬傷

[中圖分類(lèi)號(hào)]R758.14

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1008-6455(2012)07-1170-03

紫外線(xiàn)(ultraviolet，UV)照射是引起皮膚氧化應(yīng)激的一個(gè)因素。過(guò)度的uV照射造成細(xì)胞內(nèi)活性氧基團(tuán)的生成增加，損傷細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)、蛋白和核酸，從而導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)曬傷、光老化、免疫抑制、基因突變甚至皮膚腫瘤。局部應(yīng)用抗氧化劑能調(diào)節(jié)這些事件的啟動(dòng)和進(jìn)展，消除uV照射引起的皮膚氧化損傷。研究表明，維生素C／E是重要的抗氧化劑，可協(xié)同清除自由基。也有研究表明，阿魏酸具有很強(qiáng)的抗氧化活性，對(duì)過(guò)氧化氫、超氧自由基、羥自由基、過(guò)氧化亞硝基都有強(qiáng)烈的清除作用。本研究旨在探討含維生素C／E及阿魏酸的抗氧化劑復(fù)合物對(duì)模擬日光照射引起皮膚日曬傷的保護(hù)作用。

1材料和方法

1.1志愿者：招募12名健康女性志愿者，年齡18～60歲，皮膚類(lèi)型為FitzpatrickⅢ～Ⅳ，每位志愿者均簽署知情同意書(shū)。入選標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)系統(tǒng)性疾病或皮膚??；未接受系統(tǒng)性治療及皮膚局部治療；無(wú)光敏史：非妊娠或哺乳婦女；自愿遵守研究方案與指導(dǎo)。該研究經(jīng)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。實(shí)驗(yàn)于1～3月(北方冬季)進(jìn)行，以盡量減少外界環(huán)境中uV的影響。

1.2試驗(yàn)產(chǎn)品：抗氧化劑復(fù)合物(抗壞血酸、生育酚、阿魏酸、氫氧化鈉、溶液／水、雙丙二醇、丙三醇、聚乙二醇單十二醚一23、苯氧乙醇、透明質(zhì)酸鈉)和基質(zhì)(溶液／水、雙丙二醇、丙三醇、聚乙二醇單十二醚23、苯氧乙醇、透明質(zhì)酸鈉)均由美國(guó)歐萊雅公司提供。

1.3試驗(yàn)儀器

1.3.1數(shù)碼相機(jī)(Coolpix 5700，Nikon，日本)。

1.3.2日光模擬器：采用Multiport目光模擬器GS-2006(Aohua Co，中國(guó)北京)。此日光模擬器有450W氙氣燈和一個(gè)雙色性的鏡子。照射光將被WG320與UGll(Schott，C1ichy，法國(guó))濾過(guò)傳輸出連續(xù)波長(zhǎng)為290～400nm的光。WG320為1mm厚的短的切斷濾光鏡，UGll為lmm厚的長(zhǎng)的切斷濾光鏡(Schott)。皮膚表面的光輻照度由校準(zhǔn)的SUN5數(shù)字分光輻射度計(jì)(中國(guó)北京國(guó)家測(cè)量部)進(jìn)行測(cè)量。此日光模擬器可發(fā)射出15倍太陽(yáng)強(qiáng)度的模擬日光。

1.3.3窄譜分光光度計(jì)(Mexameter MX18，COURAGE+KHAZAKA公司，德國(guó))。

1.4具體操作步驟

1.4.1在志愿者背部取4個(gè)非曝光區(qū)域。區(qū)域1和區(qū)域2分別涂抹抗氧化劑復(fù)合物和基質(zhì)各75ml，連續(xù)4天，第4天涂抹產(chǎn)品半小時(shí)后予1～5倍最小紅斑量(minimal erythemadose，MED)的模擬日光照射；區(qū)域3僅予上述模擬日光照射而不涂抹任何產(chǎn)品(陽(yáng)性對(duì)照)；區(qū)域4不予照光亦不涂抹任何產(chǎn)品(空白對(duì)照)。詳見(jiàn)圖1。

1.4.2于試驗(yàn)開(kāi)始前(D1)和照光24h后(D5)分別對(duì)受試區(qū)域的各部位留取大體照片。同時(shí)，測(cè)量皮膚紅斑指數(shù)(erythema index，EI)，每個(gè)部位測(cè)三次，取平均值。

1.5數(shù)據(jù)處理：EI差值=EI均值-EI均值

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)分布資料采用t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，非正態(tài)分布資料采用非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行分析。P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2結(jié)果

2.1肉眼所見(jiàn)紅斑：經(jīng)模擬日光照射后，除區(qū)域1的1MED部位未出現(xiàn)紅斑，其它所有照光部位均出現(xiàn)了不同程度的紅斑(圖2)。區(qū)域2和區(qū)域3的1MED部位僅見(jiàn)淡紅斑，與區(qū)域1的2MED部位紅斑程度相同。隨著照光強(qiáng)度的增加，3個(gè)區(qū)域的紅斑顏色較前逐漸加深，區(qū)域2和區(qū)域3的5MED部位紅斑顏色最深，呈深紅色甚至伴有輕度水腫，區(qū)域1的5MED部位紅斑程度僅與區(qū)域2和區(qū)域3的3MED部位相當(dāng)。

2.2各部位EI差值：試驗(yàn)開(kāi)始前各區(qū)域EI均值無(wú)顯著差異(P>0.05)。經(jīng)1～5倍IVIED的模擬日光照射，各照光部位EI均值逐漸升高。但區(qū)域1的各部位EI差值顯著低于區(qū)域2或區(qū)域3的相應(yīng)部位差值，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見(jiàn)圖3。

3討論

正常皮膚具有相對(duì)完善的抗氧化體系，可以消除氧化應(yīng)激，但長(zhǎng)期反復(fù)暴露于UV中會(huì)產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基，因不能完全清除而造成氧化損傷。有研究表明，遮光劑僅部分阻止UV進(jìn)入皮膚，而抗氧化劑的活性可在皮膚內(nèi)維持?jǐn)?shù)天，通過(guò)啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的保護(hù)機(jī)制，從皮膚內(nèi)部起到防光作用。在護(hù)膚品中加入抗氧化劑可能起到防止UV誘發(fā)的皮膚炎癥、光老化的作用，甚至抑制皮膚腫瘤的發(fā)生。

本研究中，經(jīng)急性模擬日光照射后，陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域及基質(zhì)對(duì)照區(qū)域的紅斑顏色隨UV劑量增大而逐漸加深，提示UV所致的急性日曬傷呈劑量依賴(lài)性。外用含維生素C／E及阿魏酸的抗氧化劑復(fù)合物后，這種劑量依賴(lài)性在3～5MED部位表現(xiàn)不再明顯。外用抗氧化劑很好地抑制了uV所致急性日曬傷，1MED的UV不能誘發(fā)紅斑，2MED僅誘發(fā)了隱約可見(jiàn)的紅斑，5MED誘發(fā)的紅斑僅與陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域的3MED誘發(fā)的紅斑程度相當(dāng)。應(yīng)用窄譜分光光度計(jì)測(cè)得的皮膚表面的EI值可間接檢測(cè)皮膚中血紅蛋白的含量，該指標(biāo)可客觀反映由于毛細(xì)血管擴(kuò)張所致紅斑引起的皮膚顏色的變化，EI值越大提示皮膚越紅。我們的研究測(cè)得的EI值與上述肉眼所見(jiàn)的紅斑結(jié)果有相似之處。陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域與抗氧化劑區(qū)域的EI差值基本相差一個(gè)MED梯度，例如陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域2MED的EI差值與抗氧化劑區(qū)域3MED的EI差值相當(dāng)，以此類(lèi)推。在同一個(gè)MED劑量下，陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域或基質(zhì)對(duì)照區(qū)域的EI差值顯著高于抗氧化劑區(qū)域的EI差值，進(jìn)一步提示抗氧化劑對(duì)于UV誘導(dǎo)的皮膚變紅起到了抑制作用。

維生素c和維生素E是兩種基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可有效清除自由基和阻止氧化壓力誘導(dǎo)的細(xì)胞損害。維生素E，主要是a-生育酚，是生物脂質(zhì)相主要的過(guò)氧化氫自由基清除者，它的抗氧化作用主要是通過(guò)抑制脂質(zhì)過(guò)氧化實(shí)現(xiàn)的。維生素C，又稱(chēng)抗壞血酸，通過(guò)與過(guò)氧化物陰離子或羥氫氧基反應(yīng)來(lái)干擾UV誘發(fā)的氧化壓力產(chǎn)生，從而清除細(xì)胞和循環(huán)系統(tǒng)水相中的自由基。復(fù)合物中的阿魏酸是植物界普遍存在的一種酚酸，具有潛在的抗氧化活性。它既能抑制與自由基生成相關(guān)酶的產(chǎn)生或活性，又能促進(jìn)與自由基清除相關(guān)酶的生成或活性，從而清除自由基。當(dāng)阿魏酸加入到維生素C和維生素E中后，兩種維生素的外用傳輸能力進(jìn)一步提高，化學(xué)穩(wěn)定性提升，對(duì)于日光照射的光保護(hù)作用成倍提高。

綜上，本研究表明含維生素C／E及阿魏酸的抗氧化劑復(fù)合物可對(duì)模擬日光照射誘發(fā)的急性日曬傷起到抑制作用。