試論轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

李娜

【摘要】隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品大量出現(xiàn)，并且大量涌入市場(chǎng)。轉(zhuǎn)基因食品到底對(duì)人們的健康有沒(méi)有影響，至今還沒(méi)有一個(gè)定論，因此，對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)受到了世界各國(guó)衛(wèi)生組織機(jī)構(gòu)的廣泛關(guān)注。

【關(guān)鍵詞】轉(zhuǎn)基因食品；檢測(cè)技術(shù)；進(jìn)展

隨著現(xiàn)代科技的快速發(fā)展，以基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)也取得了令人注目的成績(jī)，特別是與人們生活密切相關(guān)的轉(zhuǎn)基因食品，更是得到受到世界范圍的廣泛關(guān)注。自1996年至2005年，全球范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物的種植面積在10年內(nèi)，均以2位數(shù)速度，逐年遞增。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的快速發(fā)展，一方面推動(dòng)了生產(chǎn)力的快速發(fā)展；另一方面就轉(zhuǎn)基因食品的安全問(wèn)題，也一直存在著爭(zhēng)議。轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生不良反應(yīng)，以及它對(duì)生態(tài)環(huán)境是否會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響，科學(xué)界一直都爭(zhēng)論不休。

一、外源蛋白質(zhì)檢測(cè)法

（1）蛋白質(zhì)印跡法。這種檢測(cè)法主要是依據(jù)抗體抗原的差異性與特異性，并且與檢測(cè)多樣化復(fù)雜樣品中某種蛋白的方法相結(jié)合的一種檢測(cè)方法。蛋白質(zhì)印跡法是將靶蛋白特異性的非標(biāo)記性抗體與靶蛋白中的抗原決定簇結(jié)合，然后再將蛋白質(zhì)125I-蛋白A的免疫球蛋白抗體檢測(cè)已結(jié)合上去的抗體。但是蛋白質(zhì)印跡法并不適用于定量分析，因?yàn)榭紤]到成本問(wèn)題，以及操作難度問(wèn)題，也不適用于高通量篩選檢測(cè)。（2）ELISA。ELISA檢測(cè)是把抗體與抗原的反應(yīng)特異性與酶對(duì)底物的高效催化作用有機(jī)的結(jié)合在一起，依據(jù)酶作用于底物之后所產(chǎn)生的顯色反應(yīng)來(lái)對(duì)轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行鑒別。這種檢測(cè)方法具有方便、快捷、成本低的特點(diǎn)，存在的問(wèn)題有：一是所導(dǎo)入的蛋白質(zhì)并不是在植物的所有組織中均有表達(dá)；二是復(fù)雜基質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果構(gòu)成干擾；三是轉(zhuǎn)基因食品在加工的過(guò)程中，部分蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生降解反應(yīng)，所以ELISA檢測(cè)，僅適用于沒(méi)有加工過(guò)的原材料。（3）免疫試紙條法。與蛋白質(zhì)印跡法的主要區(qū)別是，免疫試紙條法是以硝化纖維來(lái)代替聚苯乙烯反應(yīng)板為固相載體來(lái)進(jìn)行的。檢測(cè)結(jié)果在較短的時(shí)間內(nèi)就能夠得出，通常只需要5～10分鐘，主要問(wèn)題是檢測(cè)的靈敏度不高，且一種免疫試紙條僅能為一種目的蛋白質(zhì)提高檢測(cè)，不能對(duì)食品具體的轉(zhuǎn)基因品系加以區(qū)分。

二、核酸水平檢驗(yàn)法

（1）核酸印記法。具體操作是將被檢測(cè)樣品的DNA固定在尼龍膜上，再用帶有標(biāo)記的核酸探針進(jìn)行雜交，最后通過(guò)對(duì)標(biāo)記探針的信號(hào)進(jìn)行檢驗(yàn)來(lái)確定樣品中是否含有轉(zhuǎn)基因DNA片段，這種檢驗(yàn)方法的靈敏度是比較低的。（2）PCR檢測(cè)法。這一檢測(cè)方法主要是對(duì)目標(biāo)序列進(jìn)行擴(kuò)增，再采取特殊方法對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)。常見(jiàn)的PCR檢測(cè)法有定性PCR、復(fù)合定性PCR、PCR-ELISA、競(jìng)爭(zhēng)定量PCR。一是定性PCR。這種檢測(cè)方法主要是對(duì)特異的DNA片段實(shí)施PCR擴(kuò)增，然后將得到的擴(kuò)增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，再運(yùn)用凝膠成像系統(tǒng)對(duì)分離狀況進(jìn)行觀測(cè)，定性PCR的靈敏度非常高。二是復(fù)合定性PCR。把兩對(duì)及其以上的引物放入PCR檢測(cè)系統(tǒng)之中進(jìn)行擴(kuò)增。三是PCR-ELISA。將帶有地高辛、生物素標(biāo)記的引物放入PCR反應(yīng)系統(tǒng)之中，對(duì)目標(biāo)DNA的序列加以擴(kuò)增，并且把PCR產(chǎn)生物與固相板上特異性探針相結(jié)合，同時(shí)放入抗地高辛，使底物產(chǎn)生變色反應(yīng)，利用酶標(biāo)儀測(cè)出相應(yīng)的吸光值，再加入標(biāo)樣，描繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，最后利用這一曲線進(jìn)行半定量分析。四是競(jìng)爭(zhēng)定量PCR。濃度未知的待測(cè)DNA與已知濃度的內(nèi)標(biāo)DNA在同一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并將產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分離，再對(duì)電泳所產(chǎn)生的分離產(chǎn)物中的待測(cè)DNA與內(nèi)標(biāo)DNA的產(chǎn)物條帶密度進(jìn)行相關(guān)的線性回歸分析，從而得出兩種DNA的濃度等值點(diǎn)，以此對(duì)待測(cè)的DNA濃度進(jìn)行定量分析。

三、其他檢測(cè)方法

隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)食品安全問(wèn)題的持續(xù)關(guān)注，轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)技術(shù)在持續(xù)不斷的更新與發(fā)展，檢測(cè)的水平也不斷提高。這里面的近紅外波譜技術(shù)原本是對(duì)谷物進(jìn)行溫度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白質(zhì)含量進(jìn)行分析的一種常規(guī)辦法，而近幾年來(lái)，這一技術(shù)主要應(yīng)用于對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的檢測(cè)領(lǐng)域，它的優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)過(guò)程中，不需要對(duì)被檢測(cè)物進(jìn)行處理，操作簡(jiǎn)便快捷，且能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化處理，主要問(wèn)題是不能夠?qū)κ称返幕旌衔镞M(jìn)行檢測(cè)。食品企業(yè)更是為了使產(chǎn)品走出國(guó)門，打入國(guó)際市場(chǎng)，站在全球戰(zhàn)略的層面上進(jìn)行考慮，必須加大檢測(cè)轉(zhuǎn)基因食品的投入與研究。除了要在檢測(cè)技術(shù)上不斷更新，不斷應(yīng)用之外，還必須逐步健全我國(guó)的轉(zhuǎn)基因食品安全監(jiān)督運(yùn)行機(jī)制，完善相關(guān)的法律制度，才能保證轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)向著高靈敏度、高品質(zhì)、低成本的方向發(fā)展，進(jìn)入一個(gè)良性環(huán)境的狀態(tài)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]王勇，陳定虎，張輝玲．分子生物學(xué)技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用[J]．廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)．2007（2）

[2]孟陸麗，程謙諱，張謙益．轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)方法及應(yīng)用[J]．糧食與油脂．2006（4）

[3]楊云霞，蔣士強(qiáng)，趙明，董志強(qiáng). 轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)[J]．現(xiàn)代科學(xué)儀器．2005（1）

[4]曹澤虹，高明俠. 轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)方法[J]．中國(guó)食品添加劑．2005（4）