H PLC測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖分散片的含量

鄭望升

（浙江安貝特藥業(yè)有限公司，浙江 金華 321000）

H PLC測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖分散片的含量

鄭望升

（浙江安貝特藥業(yè)有限公司，浙江 金華 321000）

目的：建立鹽酸氨基葡萄糖分散片的含量測(cè)定方法。方法：采用高效液相色譜法，C8色譜柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%磷酸溶液（KOH調(diào)pH 3.0）-乙腈（60∶40）；流速0.6 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)195 nm；柱溫30℃。結(jié)果：在0.06～1.5 mg/mL的濃度范圍內(nèi)，鹽酸氨基葡萄糖濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999 7）；平均回收率為100.7%（n=9，RSD=0.41%）。結(jié)論：本方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，適用于鹽酸氨基葡萄糖分散片的含量測(cè)定。

高效液相色譜法；鹽酸氨基葡萄糖；含量測(cè)定

鹽酸氨基葡萄糖是一種天然的氨基單糖，可以刺激軟骨細(xì)胞產(chǎn)生有正常多聚體結(jié)構(gòu)的蛋白多糖，提高軟骨細(xì)胞的修復(fù)能力，改善關(guān)節(jié)活動(dòng)，緩解疼痛[1]。非甾體類藥物是治療骨關(guān)節(jié)炎的常用藥物，但其胃腸道反應(yīng)等副作用大[2-3]，相關(guān)臨床研究表明[4-5]鹽酸氨基葡萄糖無(wú)明顯副作用，療效顯著，目前已廣泛應(yīng)用于骨關(guān)節(jié)炎的治療和預(yù)防。而作者研制的鹽酸氨基葡萄糖分散片，具有崩解快、崩解顆粒細(xì)、易吸收的特點(diǎn)。目前國(guó)內(nèi)部分產(chǎn)品采樣比色法測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖，該法繁瑣，專屬性不強(qiáng)，作者參考《美國(guó)藥典》（USP）27版[6]，采用高效液相色譜法（HPLC）[7]測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖分散片的含量。該法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥

島津LC-10ATVP高效液相色譜儀，BP 211D電子天平，鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品（原中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào):140649-200702），鹽酸氨基葡萄糖分散片（浙江安貝特藥業(yè)有限公司，批號(hào): 090301、090302、090303），乙腈為色譜純，水為雙蒸餾水，其余試劑為分析純。

1.2 方法與結(jié)果

1.2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性色譜條件:C8柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相:0.05%磷酸溶液（KOH調(diào)pH至3.0）-乙腈（60∶40）；流速0.6 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)195 nm；柱溫30℃，進(jìn)樣量10 μL。理論塔板數(shù)按鹽酸氨基葡萄糖峰計(jì)算，應(yīng)不低于3 000。

1.2.2 色譜方法的專屬性研究取本品片粉適量，加水配制成約含鹽酸氨基葡萄糖1 mg/mL的溶液，作為供試品溶液，取對(duì)照品依供試品配置法配制成對(duì)照品溶液，在上述色譜條件下檢測(cè)，結(jié)果見圖1、2。空白輔料的干擾實(shí)驗(yàn)即在上述色譜條件下，取適量的輔料，照供試品配置方法配置，檢測(cè)。結(jié)果顯示色譜圖中的輔料對(duì)主峰無(wú)干擾 （見圖3），專屬性良好。

圖1 對(duì)照品溶液色譜

圖2 供試品溶液色譜

圖3 空白輔料色譜

1.2.3 線性關(guān)系考察分別精密量取不同濃度的對(duì)照品溶液注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，測(cè)得的峰面積對(duì)濃度進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為

結(jié)果表明，本品在0.06～1.5 mg/mL的濃度范圍內(nèi)與吸收度呈良好的線性關(guān)系。

1.2.4 精密度試驗(yàn)精密量取同一供試品溶液，在上述色譜條件下，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，計(jì)算得RSD為0.51%。結(jié)果顯示，本供試品溶液精密度良好。

1.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)精密稱取樣品適量，照供試品溶液項(xiàng)下配制成1 mg/mL溶液，室溫放置，分別于0、2、4、6 h測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD為0.55%。結(jié)果表明供試品溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定。

1.2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批樣品，精密稱定6份，照供試品溶液配制項(xiàng)下配制，測(cè)定其峰面積。結(jié)果表明:RSD=0.62%。由此可見，本供試品溶液重復(fù)性良好。

1.2.7 回收率試驗(yàn)稱取鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品適量（按片劑標(biāo)示量的80%、100%、120%各3份）加入處方量的空白輔料，測(cè)定其含量（表1）。

表1 鹽酸氨基葡萄糖分散片回收率試驗(yàn)

RSD=0.41%（n=9），結(jié)果表明回收率良好，符合測(cè)定要求。

1.2.8 鹽酸氨基葡萄糖分散片含量測(cè)定按上述色譜條件，依法測(cè)定3批樣品中鹽酸氨基葡萄糖含量，分別為102.4%、101.8%、100.9%。

2 討論

作者曾參考相關(guān)文獻(xiàn)，先后采用了比色法[8-9]，柱前衍生化法[10-12]檢測(cè)本品的含量，與本研究所用檢測(cè)方法相比，都顯得繁瑣、費(fèi)時(shí)，并對(duì)操作者的要求較高。且本方法準(zhǔn)確可靠，故可用于控制鹽酸氨基葡萄糖分散片的質(zhì)量。

[1] 冷艷霞，孫璐，邸欣，等.鹽酸氨基葡萄糖片的相對(duì)生物利用度及其生物等效性評(píng)價(jià)[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，23（1）:6-9.

[2] 王功立.非甾體抗炎藥不良反應(yīng)及對(duì)策[J].中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師，2005，2（7）:16-18.

[3] 朱漢章，曾貴剛.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物治療[J].中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師，2006，3（4）:17-19.

[4] 徐江平.鹽酸氨基葡萄糖治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用[J].湘南學(xué)院學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2009，11（2）:42-44

[5] 吳建榮.鹽酸氨基葡萄糖對(duì)膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎臨床療效的平行對(duì)照研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（16）:68-69.

[6] The United States Pharmacopeial Convention.USP 27[S]. The United States Pharmacopeial Convention Inc，2004.

[7] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2005年版（二部）[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄VD，附錄28.

[8] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)·新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn) （第64冊(cè)）[S].北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:148.

[9] 冉蘭，張榕，文霞，等.比色法測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖片的含量[J].華西藥學(xué)雜志，2001，16（3）:217-218.

[10] 王英瑛，李俊，曾蘇.反相高效液相色譜衍生化法測(cè)定氨基葡萄糖原料及其制劑的含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2008，27（7）:851-852.

[11] 萬(wàn)慧芳，萬(wàn)歡，汪華杰.鹽酸氨基葡萄糖反相高效液相色譜法含量測(cè)定方法研究[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)藥版），2010，50（5）: 96-99.

[12] 初立梅，徐健峰，石濤，等.反相高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方硫酸氨基葡萄糖分散片的含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2010，19（5）:20-21.

Content Determination of Glucosamine Hydrochloride in Glucosamine Hydrochloride Dispersible Tablets by HPLC

Zheng Wangsheng（Zhejiang Anbeite Pharmaceutical Co.Ltd.，Zhejiang Jinhua 321000，China）

Objective：To establish a method to determine the content of glucosamine hydrochloride in glucosamine hydrochloride dispersible tablets.Methods：The HPLC was performed on a C8column（200 mm×4.6 mm，5μm）with the column temperature at 30℃.The mobile phase was a mixture of 0.05%phosphoric acid（adjusted to pH 3.0 with potassium hydroxide）and acetonitrile（60∶40）.The flow rate was 0.6 mL/min and the detective wave length was at 195 nm.Results：Within the range of 0.06～1.5 mg/mL，there was a good linear relationship between the concentration and peak area of glucosamine hydrochloride（r=0.999 7）. The average recovery was 100.7% （n=9，RSD=0.41%）.Conclusion：This method is accurate，simple and can be used to determine the content of glucosamin hydrochloride in dispersible tablets.

HPLC；Glucosamine Hydrochloride；Content Determination

10.3969/j.issn.1672-5433.2012.04.004

2011-09-23）

鄭望升，男，工程師。研究方向：新藥研究開發(fā)。E-mail：48624961@qq.com