分散固相萃取凈化與液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中8類禁用藥物殘留

摘 要 建立了牛奶中8類禁用藥物的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LCMS/MS）檢測(cè)方法。分析物包括5種硝基咪唑、7種β受體激動(dòng)劑、9種雄性激素、7種糖皮質(zhì)激素、3種雌性激素、2種鎮(zhèn)靜劑、1種氯霉素以及6種二羥基苯甲酸內(nèi)酯共40種禁用藥物。樣品以β葡萄糖苷醛酶/芳基硫酸酯酶在乙酸銨緩沖液中酶解，用氨化和酸化乙腈各提取一次。提取液經(jīng)改良的分散固相萃?。≦uEChERS）凈化，濃縮后采用C18色譜柱分離（150 mm×2.1 mm i.d.，3.0

SymbolmA@ m）。以甲醇和水（含0.1%甲酸）、乙腈和水分別作為正、負(fù)電噴霧離子化模式的色譜分離流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行定性和定量分析。7種藥物以內(nèi)標(biāo)法定量；33種藥物以基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量， 氯霉素在0.02～0.4

SymbolmA@ g/kg；39種藥物在0.20～10.0

SymbolmA@ g/kg范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.99；定量限（S/N＝10）在0.07～0.93

SymbolmA@ g/kg之間。分別以各個(gè)藥物0.5， 1和2倍MRPL（Minimum required performance limits）濃度水平加標(biāo)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，回收率范圍60.3%～119.3%范圍；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于18.9%。

[KH*3/4D][HTH]關(guān)鍵詞 [HTSS]硝基咪唑； β受體激動(dòng)劑； 雄性激素； 糖皮質(zhì)激素； 雌性激素；鎮(zhèn)靜劑； 氯霉素； 二羥基苯甲酸內(nèi)酯； 牛奶； 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜； 分散固相萃取

[HT][HK]

[FQ（3２，X，DY－Ｗ][CD15] 20110926收稿；20111115接受

本文系國(guó)家自然科學(xué)基金（No.21107074）、中國(guó)博士后基金（No.20100480361）和深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局博士后基金（No.2010101）資助項(xiàng)目

 Email: yuezhenfeng@163.com[HT]

1 引 言

β受體激動(dòng)劑、合成激素和二羥基苯甲酸內(nèi)酯類藥物具有增加飼料轉(zhuǎn)化率、增加蛋白沉淀的作用，曾廣泛用于動(dòng)物的促生長(zhǎng)和育肥\\[1，2\\]。氯霉素\\[3\\]、硝基咪唑\\[4\\]屬于抗菌和抗原蟲類藥物，常用于禽畜類疾病和感染的預(yù)防和治療。鎮(zhèn)靜劑能抑制腦干及大腦皮質(zhì)活動(dòng)，可使動(dòng)物嗜睡以減少運(yùn)輸或屠宰中的損耗\\[5\\]。已有研究表明， 上述幾類藥物在動(dòng)物肌肉、內(nèi)臟及相關(guān)產(chǎn)品中的殘留可能對(duì)消費(fèi)者造成中毒、抗藥性、致癌、致畸和致突變性等損害\\[6～8\\]。我國(guó)農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告明確規(guī)定，在動(dòng)物性食品中不得檢出氯丙嗪、地美硝唑、甲硝唑、丙酸睪酮等治療藥物，禁止將氯霉素、克倫特羅、洛硝達(dá)唑、己烯雌酚、玉米赤霉醇等藥物用于食源性動(dòng)物 \\[9\\]。許多國(guó)家和地區(qū)已將這些藥物列為禁用藥物\\[10～12\\]。然而受到利益驅(qū)使，近年來濫用違禁藥物造成動(dòng)物源食品中藥物殘留超標(biāo)的食品安全事件頻見報(bào)道。

建立動(dòng)物源食品中多類禁用藥物的篩查和測(cè)定方法有利于提高效率、減少處理步驟和降低成本 \\[13\\]。然而，禁用藥物的殘留濃度低、不同類型藥物的理化性質(zhì)差異大、基質(zhì)復(fù)雜干擾大，故樣品前處理是多殘留分析的難點(diǎn)之一。本課題組參考以分散固相萃取用于飼料中多種激素分析的研究\\[14\\]，采用改良的QuEChERS方法結(jié)合LCMS/MS分析，建立了牛奶中8類禁用藥物多殘留的篩查和定量方法。相比現(xiàn)有方法具有更高的效率、更簡(jiǎn)便的前處理過程，且各項(xiàng)性能滿足殘留分析要求。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

API5000 型四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀配電噴霧離子源（美國(guó)AB公司）；1200型高效液相色譜儀和Eclipse Plus C18色譜柱（150 mm×2.1 mm，3.0

SymbolmA@ m，美國(guó)Agilent公司）；漩渦振蕩混合器（美國(guó)Thermo公司）；Sigma低溫離心機(jī)（美國(guó)Sigma公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮儀（德國(guó)Heidolph公司）；Gilson移液器（法國(guó)Gilson公司）。

40種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和7種同位素內(nèi)標(biāo)物質(zhì)（純度≥99%）購(gòu)自美國(guó)Sigma Aldrich公司、德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司和WITEGA公司。β葡糖苷醛甙酶芳基硫酸酯酶（德國(guó)Helix Pomatia公司）；甲醇、乙腈、乙酸乙酯和甲酸（HPLC純，德國(guó)Merck公司）；乙酸銨（HPLC純，美國(guó)Fisher公司）；N丙基乙二胺吸附劑（PSA）、十八烷基鍵合硅膠吸附劑（C18）、佛羅里硅土、石墨化碳黑（GCB）（天津博納艾杰爾公司）。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液和緩沖溶液的制備

稱取各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)10 mg（精確到0.1 mg），以甲醇（或乙腈）配制成濃度100.0 mg/L的單標(biāo)儲(chǔ)備溶液。按藥物分類稀釋為10.0 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。所有溶液于

Symbolm@@ 30 ℃避光儲(chǔ)存。使用前移取適量混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以初始流動(dòng)相或空白樣品提取液逐級(jí)稀釋成工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。另稱取7.7 g乙酸銨溶于480 mL水中，冰乙酸調(diào)節(jié)溶液pH值至5.2，以水定容到500 mL，得到乙酸銨緩沖溶液。

 分 析 化 學(xué)第40卷

第5期張 毅等： 分散固相萃取凈化與液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛奶中8類禁用藥物殘留 

2.3 色譜/質(zhì)譜條件

正離子模式下以0.1%甲酸水溶液為流動(dòng)相A，0.1%甲酸甲醇溶液為流動(dòng)相B。梯度洗脫程序：0.0 min （10%B） →4.0 min （35%B） →5.0 min （50%B） →8.0 min （95%B） →10.0 min （95%B） →13.0 min （10%B）→22.0 min （10%B）。負(fù)離子模式下以水為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B。梯度洗脫程序：0.0 min （20%B） →7.0 min （98%B） →10.0 min （20%B）→16.0 min （20%B）。柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：10

SymbolmA@ L；流速：250

SymbolmA@ L/min。

電噴霧電離正離子模式（ESI＋）：噴霧電壓4500 V，霧化氣壓力345 kPa，去溶劑氣壓力448.5 kPa，氣簾氣壓力138 kPa，碰撞氣壓力41.4 kPa，離子源溫度450 ℃。負(fù)離子模式（ESI－）：噴霧電壓4500 V，霧化氣壓力345 kPa，去溶劑氣壓力345 kPa，氣簾氣壓力172.5 kPa，碰撞氣壓力69 kPa，離子源溫度500 ℃。

2.4 樣品預(yù)處理

2.4.1 樣品提取 深圳當(dāng)?shù)厥惺廴Ｄ?，稱取2 g樣品（精確到0.01 g）于具塞離心管中，加入內(nèi)標(biāo)工作液和8 mL乙酸銨緩沖液，均質(zhì)后加入30

SymbolmA@ L酶解液，37 ℃溫育12 h。加入15 mL 1%氨水乙腈溶液和5.0 g 無(wú)水Na2SO4，渦旋混勻1 min后，在4 ℃、9500 r/min下離心5 min，收集上清液。剩余部分加入15 mL 1%乙酸乙腈溶液，提取15 min后經(jīng)離心，取上層清液與前次提取液合并，待凈化。

2.4.2 樣品凈化 將混合吸附劑一次性加入裝有提取液的離心管，渦旋分散。在4 ℃，以9500 r/min離心5 min后， 將有機(jī)相移至圓底燒瓶，42 ℃減壓蒸發(fā)至近干。10%甲醇水溶液溶解濃縮物并定容至2.0 mL，過0.22

SymbolmA@ m濾膜，供測(cè)定。

3 結(jié)果與討論

3.1 酶解影響 

動(dòng)物體內(nèi)的部分β受體激動(dòng)劑、激素藥物殘留是以結(jié)合態(tài)存在，提取前需經(jīng)水解或酶解使結(jié)合態(tài)藥物游離出來。實(shí)驗(yàn)考察了酶解與未酶解樣品中各種藥物的回收率，發(fā)現(xiàn)酶解樣品中沙丁胺醇、克倫特羅和非諾特羅的回收率提高23%～45%\\[1\\]，其它藥物回收率變化小于20%。盡管酶解未顯著影響大部分藥物的回收率，但酶解后的基質(zhì)更復(fù)雜，需要采用更有效的樣品提取和凈化方法。

3.2 質(zhì)譜分析條件優(yōu)化

采用微量擠壓泵連續(xù)進(jìn)樣的方式，以各個(gè)藥物的標(biāo)準(zhǔn)溶液（2.0 mg/L）進(jìn)行一級(jí)質(zhì)譜全掃描（Full scan），確定其準(zhǔn)分子離子。氯霉素、3種雌激素、6種二羥基苯甲酸內(nèi)酯類藥物及2種內(nèi)標(biāo)物在ESI－模式下獲得準(zhǔn)分子離子峰，其它30種化合物和5種內(nèi)標(biāo)物均在ESI＋模式下獲得準(zhǔn)分子離子峰。參考?xì)W盟2002/657/EC指令\\[11\\]，以準(zhǔn)分子離子為母離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描，選擇豐度較高的兩個(gè)碎片離子作為定量和定性離子，分別優(yōu)化各個(gè)離子對(duì)的去簇電壓（Declustering potential， DP）、碰撞能（Collision energy， CE）以及碰撞室出口電壓（Collision cell exit potential， CXP）。綜合所有離子對(duì)獲得最強(qiáng)響應(yīng)信號(hào)時(shí)質(zhì)譜條件，優(yōu)化了質(zhì)譜離子源溫度、氣簾氣壓力、霧化氣壓力和輔助氣壓力。

3.3 色譜分離條件優(yōu)化

以甲醇水、乙腈水及其分別添加2.0 mmol/L乙酸銨（含0.1%甲酸）為流動(dòng)相，C18為色譜柱，考察40種藥物在不同流速和流動(dòng)相條件下的分析結(jié)果。結(jié)果表明，采用200和300

SymbolmA@ L/min流速不及以250

SymbolmA@ L/min流速的靈敏度高。ESI＋模式以甲醇和水為流動(dòng)相的靈敏度高于乙腈和水，加入甲酸可顯著提高分析物的響應(yīng)信號(hào)。ESI－模式以乙腈水的靈敏度明顯高于甲醇水，其原因是乙腈更有利于分析物的去質(zhì)子化。由于多殘留分析需要同時(shí)檢測(cè)幾十對(duì)甚至上百對(duì)離子對(duì)，駐留時(shí)間過短將影響方法性能。本實(shí)驗(yàn)采用Analyst 1.5.1工作站鎖定各個(gè)化合物的保留時(shí)間，并在保留時(shí)間前后80 s采集該離子對(duì)信號(hào)，以確保待測(cè)物色譜峰的重現(xiàn)性和靈敏度。40種禁用藥物和7種內(nèi)標(biāo)物的定性/定量離子對(duì)、保留時(shí)間和質(zhì)譜參數(shù)見表1（詳表見: http://www.analchem.cn/table/111093.pdf）。

內(nèi)標(biāo)物質(zhì) Isotope internal standard（7種，7 Compounds）

D6萊克多巴胺D6ractopamine308.2/290.28.751318

[BHDFG3，WKZQ0W] *: 定量離子對(duì)（Quantitative transition）。[BG）W][HT][]

3.4 樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

3.4.1 提取溶劑的選擇 40種藥物包括含有氨基或亞氨基的β受體激動(dòng)劑、鎮(zhèn)靜劑、糖皮質(zhì)激素、雄性激素和雌性激素，中性至酸性的硝基咪唑類和二羥基苯甲酸內(nèi)酯類藥物。實(shí)驗(yàn)比較了乙睛、乙酸乙睛（1∶99， V/V）和氨水乙腈（1∶99， V/V）、甲苯乙腈（1∶3， V/V）、乙酸乙酯、丙酮乙酸乙酯（1∶2， V/V）、甲醇和甲醇乙腈（1∶1， V/V）提取40種藥物的回收率，如圖1所示。其中甲醇及其混合溶劑的共萃取物較多，且難以與水相分層；乙酸乙酯及其混合溶劑提取硝基咪唑類、糖皮質(zhì)激素類和雌性激素類藥物的回收率低20%。甲苯乙腈可較好地提取大部分目標(biāo)藥物。但甲苯具有毒性，不作為首選使用。乙腈能有效沉淀蛋白質(zhì)，但對(duì)克倫特羅、沙丁胺醇、醋酸可的松和丙酸倍氯米松等pKa＞9的藥物以及甲硝唑、羥甲基甲硝咪唑等弱酸性藥物的提取率較低。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)， 以氨化乙腈和酸化乙腈分兩次提取樣品，偏堿性或偏酸性藥物回收率均有改善，總體回收率為42%～135%。其原因可能是乙腈中添加酸或堿能有效抑制藥物的離子化，從而增加分析物在有機(jī)相中的分配比例。

[TS（][HT5”SS]圖1 提取溶劑對(duì)牛奶樣品中8種代表性藥物回收率的影響?yīng)?/p>

Fig．1 Influence of selected solvents on the recoveries of 8 representative compounds in bovine milk

1. 甲硝唑（Metronidazole）；2. 克倫特羅（Clentuterol）；3. 睪酮（Testosterone）；4. 倍他米松（Betanethasone）；5. 己二烯雌酚（Dienestrol）；6. 氯丙嗪（Chlorpromazine）； 7. 氯霉素（Chloramphenicol）；8. 玉米赤霉酮（Zearalanone）；A. 乙腈（Acetonetrile）；B. 乙酸乙腈 （Acetic acidacetonetrile， 1∶99， V/V）；C. 氨水乙腈（Ammoniaacetonetrile， 1∶99， V/V）；D. 甲苯乙腈（Tolueneacetonetrile， 1∶3， V/V）；E. 乙酸乙酯（Ethyl acetate）；F. 丙酮乙酸乙酯（Ethyl acetateacetone， 1∶2， V/V）；G. 甲醇（Methanol）；H. 甲醇乙腈（Methanolacetonetrile， 1∶1， V/V）。

3.4.2 QuEChERS吸附劑的選擇和優(yōu)化 現(xiàn)有商品化QuEChERS吸附劑不適用于理化性質(zhì)差異大的多種藥物殘留的樣品前處理。實(shí)驗(yàn)分別以一定量的弗羅里硅土、GCB、PSA、C18與200～500 mg無(wú)水MgSO4混合，凈化加標(biāo)水平為2.0

SymbolmA@ g/kg（氯霉素為0.2

SymbolmA@ g/kg）的牛奶樣品，考察各個(gè)藥物的回收率。結(jié)果表明，弗羅里硅土作為強(qiáng)極性吸附劑，無(wú)法去除提取液中的脂類、糖類雜質(zhì)，僅10余種藥物回收率在50%～120%范圍。GCB通常用于去除植物提取液中的色素成分，因其可吸附較強(qiáng)的帶苯環(huán)官能團(tuán)的藥物\\[16\\]，大部分β受體激動(dòng)劑、二羥基苯甲酸內(nèi)酯類藥物和雌激素的回收率小于50%。PSA能有效去除基質(zhì)中的脂肪酸和甾醇類基質(zhì)，但凈化后的提取液有油脂殘留，且包括硝基咪唑類、糖皮質(zhì)激素類等10種藥物的回收率小于50%?？紤]到PSA作為堿性吸附填料對(duì)酸性藥物有吸附作用，提取時(shí)需添加一定的酸以減少損失\\[17\\]。C18可有效去除脂類、糖類等親脂型雜質(zhì)。但過量的C18也吸附氟甲睪酮、氫化可的松、丙酸睪酮等親脂性較強(qiáng)藥物。多殘留檢測(cè)方法需要在檢測(cè)靈敏度、最佳凈化效果和合理回收率之間尋求平衡點(diǎn)。使用以上4種吸附劑與無(wú)水MgSO4的組合無(wú)法使全部藥物獲得滿意的回收率。因此，實(shí)驗(yàn)繼續(xù)考察其中PSA， C18和無(wú)水MgSO4混合的凈化效果。結(jié)果表明，每克樣品以50 mg PSA， 20 mg C18和300 mg無(wú)水MgSO4的混合吸附劑凈化，可獲得凈化效果和回收率之間較好的平衡。經(jīng)優(yōu)化的QuEchERS凈化的提取液呈無(wú)色、透明澄清，40種藥物的總體回收率為48%～122%。圖2為空白牛奶加標(biāo)的定量離子色譜圖（部分藥物）。

[TS（][HT5”SS] 圖2 空白牛奶基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的定量離子色譜圖（氯霉素為0.10

SymbolmA@ g/kg，其它藥物為1.0

SymbolmA@ g/kg）

Fig．2 Chromatograms of quantification transitions of blank bovine milk matrixmatched standard （0.10

SymbolmA@ g/kg for chloramphenicol， 1.0

SymbolmA@ g/kg for other drugs）[HT][TS）]

3.5 分析方法的評(píng)價(jià)

3.5.1 方法的線性范圍、 檢出限和定量限 對(duì)克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、洛硝達(dá)唑、氯霉素、己二烯雌酚、氯丙嗪以內(nèi)標(biāo)法定量，其余33種藥物以基質(zhì)曲線外標(biāo)法定量。用空白樣品提取液配制濃度為0.1～10.0

SymbolmA@ g/kg（氯霉素為0.01～1.0

SymbolmA@ g/kg）的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)（x，

SymbolmA@ g/kg）和定量離子對(duì)峰面積為縱坐標(biāo)（y）進(jìn)行線性回歸計(jì)算，所得相關(guān)系數(shù)均大于0.99。根據(jù)3倍和10倍信噪比確定化合物的檢出限（LOD）和定量限（LOQ）。樣品中40種藥物的LODs為0.02～0.28

SymbolmA@ g/kg； LOQs為0.07～0.93

SymbolmA@ g/kg。表2列出部分藥物的線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)、LODs和LOQs（詳表見: http://www.analchem.cn/table/11093.pdf）。

3.5.2 方法的回收率與精密度 參考各個(gè)藥物的MRPL值，無(wú)MRPL值的參考其同類藥物的MRPL值，以0.5， 1， 2倍MRPL濃度水平考察方法的添加回收率和精密度?？傮w回收率為60.3%～119.3%; RSD為3.0%～18.9%（表3）， 結(jié)果令人滿意。

[KH*4D][HT5”SS][*4]表3 牛奶基質(zhì)中40種藥物的回收率和精密度（0.5， 1和2倍MRPL加標(biāo)濃度水平，n ＝6）（簡(jiǎn)表）

Table 3 The recoveries and accuracies of 40 drugs in spiked bovine milk. （at half minimum required performance limits （MRPL）， the MRPL and double MRPL， n ＝6） （Brief table）

[HT6SS][BG（][BHDFG3，WK24，WK11\\.3W]化合物種類

Species加標(biāo)濃度Spiked （

SymbolmA@ g/kg）回收率Recovery （%）相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD （%）

硝基咪唑 Nitroimidazoles1.0， 2.0， 4.060.3～119.34.0～17.0

β受體激動(dòng)劑 βAgonists0.5， 1.0， 2.063.3～107.84.8～14.9雄性激素 Androgens0.5， 1.0， 2.0

62.5～108.93.4～13.2糖皮質(zhì)激素 Glucocorticoids1.0， 2.0， 4.060.5～108.23.6～18.9雌性激素 Esterogens1.0， 2.0， 4.063.4～106.55.9～16.1鎮(zhèn)靜劑 Sedatives0.5， 1.0， 2.070.5～109.65.6～15.1氯霉素 Chloramphenicol0.05， 0.01， 0.0272.2～97.64.4～10.7二羥基苯甲酸內(nèi)酯 Rasorcylic acid lactones （RALs）

1.0， 2.0， 4.060.4～108.93.0～12.8[BHDFG1*2，WKZQ0W][BG）W][HT][]

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張 毅， 藍(lán) 芳， 張 峰， 沈金燦， 儲(chǔ)曉剛. 色譜， 2011， 29（6）： 523～534

15 Blasco C， Poucke V C， Peteghem V C. J. Chromatogr. A， 2007， 1154（12）： 230～239

16 Anastassiades M， Lehotay S J， Stajnbaher D， Schenck F J. J. AOAC Int.， 2003: 86

17 Wiest L， Buleté A， Giroud B， Fratta C， Amic S， Lambert O， Pouliquen H， Arnaudguilhem C. J. Chromatogr. A， 2011， 1218（34）： 5743～5756



Determination of 8 Species of Banned Drugs in Bovine Milk by

Using QuEChERS Cleanup Approach and Liquid

ChromatographyTandem Mass Spectrometry



ZHANG Yi1， YUE ZhenFeng*１， LAN Fang1， ZHAO FengJuan1，

XIAO ChenGui1， OUYANG Shan1， WU WeiDong1， WU YongNing2， LI LiSU1

1（Food Inspection Center， Shenzhen EntryExit Inspection and Quarantine Bureau， Shenzhen 518045， China）

2（Institute for Nutrition and Food Safety， Chinese Center for Disease Control and Prevention， Beijing 102206， China）



Abstract A method was developed for determination of 8 species of unauthorized drugs in bovine milk by liquid chromatographytandem mass spectrometry （LCMS/MS）. All target drugs covered 5 nitroimidazoles， 7 βagonists， 9 androgens， 7 glucocorticoids， 3 estrogens， 2 sedatives， 1 chloramphenicol and 6 resorcylic acid lactones. After homogenization， the sample was mixed with βglucuronidase/arylsulfatase for enzymatic reaction in ammonia acetate buffer and followed by extraction with basic and then acidic acetonitrile solutions. Cleanup of the extracts was processed by a modified dispersive solid phase extration（QuEChERS）. The analystes were then separated by a C18column （150 mm×2.1 mm i.d.， 3.0

SymbolmA@ m） utilising gradient elution with methanol/water （containing 0.1% formic acid） and acetontrile/water， and finally detected by tandem mass spectrometry in positive/negative ESI mode. Identification and quantification were achieved by LCMS/MS with multireaction monitoring. Isotope internal standards for 7 compounds and matrixmatched calibrations were respectively used to quantify the residue contents. Good linearity in response was obtained in the concentration range of 0.02－0.40

SymbolmA@ g/kg for chloramphenicol and 0.20－10.0

SymbolmA@ g/kg for the other 39 analytes， with correlation coefficients larger than 0.99. The limits of quantification （S/N＝10） was around 0.07－0.93

SymbolmA@ g/kg. Method validation was carried out at half minimum required performance limits （MRPL）， MRPL and double MRPL level of each substance， and the recoveries were in the range of 60.3%－119.3% with relative standard deviations （RSD） smaller than 18.9%. 

Keywords Nitroimidazoles; βAgonists; Androgens; Glucocorticoids， Estrogens; Sedatives; Chloramphenicol; Resorcylic acid lactones; Bovine milk; Liquid chromatographytandem mass spectrometry; Dispersive solid phase extraction

（Received 26 September 2011; accepted 15 November 2011）

第40卷2012年5月 分析化學(xué) （FENXI HUAXUE） 研究報(bào)告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第5期730～734

[BW（B（S*3/4，0，）][CD44][BW）]

DOI： 10.3724/SP.J.1096.2012.10638