VEGF與TK1的檢測(cè)對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值

肖 慶，韋慶文，藍(lán)宇萍

乳腺癌是最為常見的婦科惡性腫瘤之一，其預(yù)后的判斷是一個(gè)眾所關(guān)注的問題。腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟的復(fù)雜過程，在很大程度上依賴于腫瘤血管生成。目前的研究認(rèn)為:血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是腫瘤血管生成過程中作用最強(qiáng)、特異性最高的促血管生長(zhǎng)因子［1］，VEGF與乳腺癌血管生成密切相關(guān)，并能促進(jìn)其生長(zhǎng)、浸潤及轉(zhuǎn)移。另大量臨床研究表明，胸苷激酶1 (TK1)是與細(xì)胞DNA合成和細(xì)胞增殖密切相關(guān)的關(guān)鍵酶，在非增殖細(xì)胞和健康人血清中含量極微或檢測(cè)不到，但在乳腺癌患者中TK1伴隨著腫瘤細(xì)胞的急劇增殖而升高，并與疾病的輕重程度有關(guān)［2］。因此檢測(cè)VEGF和TK1可作為反映乳腺癌生物學(xué)行為的指標(biāo)之一。本研究應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清中VEGF與TK1的含量，對(duì)這兩種指標(biāo)與臨床指標(biāo)的關(guān)系進(jìn)行分析，旨在為乳腺癌患者的綜合治療和判斷術(shù)后預(yù)后提供相關(guān)的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料 選取我院普外科2007～2010年乳腺癌根治術(shù)或改良根治術(shù)切除標(biāo)本36例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者14例。同時(shí)選取乳腺良性病變者26例。患者均為女性，年齡37～65歲，平均年齡(54±7)歲。2組患者術(shù)前均未經(jīng)任何治療。正常對(duì)照組為36例來自體檢的正常健康女性，年齡33～65歲，平均年齡(55±8)歲。

1.2 方法 主要試劑:血清VEGF、TK1濃度檢測(cè)均采用化學(xué)發(fā)光法，試劑盒購自羅氏公司。標(biāo)本檢測(cè):所有受試者均于晨起7時(shí)抽取空腹靜脈血約3 m l，分離血清，-20℃冷凍保存，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理數(shù)據(jù)。組間用t檢驗(yàn)對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果用±s表示，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清VEGF與TK1的比較 乳腺癌患者的VEGF與TK1值明顯高于乳腺良性病變組和正常對(duì)照組，差異均有顯著性(P＜0.05)，而乳腺良性病變組和正常對(duì)照組之間VEGF與TK1值則差異無顯著性(P＞0.05)，見表1。

表1 各組血清VEGF與TK1測(cè)定結(jié)果(±s)

表1 各組血清VEGF與TK1測(cè)定結(jié)果(±s)

組別 例數(shù)年齡(歲) VEGF(ng/ml) TK1(pg/ml) 36 50±5 171.02±15.17 6.60±17.00乳腺良性病變組 26 59±8 75.25±8.20 4.08±1.73正常對(duì)照組 26 51±6 52.91±7.23 2.86±1.33 t值乳腺癌組＜0.05 ＜0.05 38.341 40.511 P值

2.2 有否腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移血清VEGF及TK1測(cè)定 本組乳腺癌病例經(jīng)病理檢查，有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為22例，無轉(zhuǎn)移者為14例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者血清VEGF、TK1水平顯著高于陰性者(P＜0.05)，VEGF水平隨TK1增高而增加(P＜0.05)，見表2。

2.3 乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平的相關(guān)分析 從表1和表2可以看出，從正常對(duì)照組，乳腺良性病變組到乳腺癌組VEGF及TK1濃度不斷升高，且隨著乳腺癌血清中TK1表達(dá)量升高，VEGF水平也升高，兩者之間存在呈正相關(guān)關(guān)系。TK1是乳腺癌的致癌因子，主要起到促進(jìn)乳腺癌形成和加速其發(fā)展的作用;VEGF對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有間接促進(jìn)作用，有助于判斷有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后。

表2 有否腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者血清VEGF及TK1測(cè)定結(jié)果(±s)

表2 有否腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者血清VEGF及TK1測(cè)定結(jié)果(±s)

注:陽性與陰性比較，△P＜0.05。

淋巴轉(zhuǎn)移情況 例數(shù) 年齡(歲) VEGF(ng/l) TK1(pg/ml) 22 54±2 136.40±11.89 7.06±2.13有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 14 57±5 310.11±28.50△ 3.48±1.16無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移△

3 討論

乳腺癌是最為常見的婦科惡性腫瘤之一，其預(yù)后的判斷是一個(gè)眾所關(guān)注的問題。關(guān)于乳腺癌發(fā)生的分子機(jī)制尚不清楚，其發(fā)生是由一系列基因損傷所致基因突變的累積誘導(dǎo)效應(yīng)下原癌基因的激活以及抑癌基因失活，繼而引發(fā)細(xì)胞的過度增殖或異常的程序性死亡。VEGF是.從牛垂體濾泡星狀細(xì)胞的體外培養(yǎng)液中純化出一種特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC)并促進(jìn)有絲分裂的物質(zhì)，VEGF作為特異性的新生淋巴管刺激因子，可調(diào)節(jié)腫瘤周淋巴血管生成，腫瘤VEGF過表達(dá)引起外周淋巴管直徑增加?？梢哉J(rèn)為VEGF是淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞和新生淋巴管的特異性標(biāo)志物［3］。因此VEGF是腫瘤血管生長(zhǎng)及腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。Mokbel［4］報(bào)道，富于VEGF的乳腺癌病例，其預(yù)后明顯比VEGF表達(dá)弱者差，認(rèn)為乳腺癌VEGF的表達(dá)與血管生成及早期復(fù)發(fā)有關(guān)。

TK1為一種嘧啶補(bǔ)救合成DNA的關(guān)鍵酶，是一個(gè)S期特殊酶。TK1水平的升降與DNA在細(xì)胞周期S期的合成速度密切相關(guān)，腫瘤增殖細(xì)胞TK1的水平在細(xì)胞周期的G1和S期交界處開始升高，隨著細(xì)胞進(jìn)入G1晚期，TK1的水平逐漸上升，直至S和G2期交界處。這種高TK1水平從S晚期持續(xù)到M早期。TK1在非增殖細(xì)胞和健康人血清中含量極微或檢測(cè)不到，但隨著腫瘤細(xì)胞的急劇增殖而升高。大量研究表明，TK1檢測(cè)適用于臨床腫瘤的治療效果監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估，以及對(duì)健康人群發(fā)生惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)的早期預(yù)測(cè)和篩查［5-6］。從上述試驗(yàn)結(jié)果表明，乳腺癌患者組和健康體檢組比較差異有顯著性(P＜0.05)，由此可見TK1作為輔助診斷機(jī)體是否患有乳腺癌作用非常明顯，雖然TK1的特異性不高，但TK1有較高的敏感性，因此對(duì)早期乳腺癌的發(fā)現(xiàn)有很大的輔助作用。本文研究顯示，乳腺癌患者血清TK1水平明顯高于正常對(duì)照組，進(jìn)一步證明了高水平TK1對(duì)乳腺癌的發(fā)生具有重要的促進(jìn)作用，是女性乳腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

本文研究結(jié)果顯示，乳腺癌患者血清VEGF及TK1均顯著高于正常人，二者濃度過高均可能是發(fā)生乳腺癌的危險(xiǎn)因素，在其發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。VEGF及TK1水平存在正相關(guān)，這表明VEGF及TK1參與了乳腺血管的病變過程，當(dāng)TK1濃度過高時(shí)，引起DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄異常，從而促進(jìn)腫瘤發(fā)生［7］。乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而增加，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，這些對(duì)乳腺癌患者的疾病的嚴(yán)重程度也有一定的臨床參考價(jià)值。目前多數(shù)研究認(rèn)為腫瘤中VEGF含量可以作為預(yù)后因子，其高表達(dá)預(yù)示著患者無瘤生存率(RFS)和總體生存率(OS)的降低［8］，Salven［9］研究發(fā)現(xiàn)乳腺良性腫瘤患者的可溶性 VEGF(SVEGF)不高于328 pg/ml，局限性乳腺癌患者的S-VEGF范圍是11～539 pg/ml，有轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的S-VEGF范圍是7～1347 pg/ml，表明乳腺癌的播散伴隨循環(huán)中VEGF水平的提高。由此可見，VEGF是對(duì)乳腺癌預(yù)后價(jià)值預(yù)測(cè)的理想標(biāo)志物。

VEGF可促進(jìn)乳腺癌血管形成，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌的生長(zhǎng)、浸潤和轉(zhuǎn)移。TK1具有致癌性的主要原因是它能刺激乳腺細(xì)胞的過度增殖。TK1濃度大于風(fēng)險(xiǎn)值的，較大一部份都伴隨著一些亞健康疾病。隨著年齡的增長(zhǎng)，生理進(jìn)程差異，腫瘤病變的頻率逐漸增加，可能出現(xiàn)TK1有意義的升高變化。TK1檢測(cè)增高的體檢者應(yīng)定期檢測(cè)，若TK1連續(xù)幾次檢測(cè)都為陽性且有持續(xù)上升趨勢(shì)，則高度注意急躁早期診斷和預(yù)防乳腺癌的發(fā)生。

綜上所述，VEGF及TK1可作為反映乳腺癌生物學(xué)行為的指標(biāo)之一。根據(jù)本文結(jié)果，我們認(rèn)為，乳腺癌的VEGF和TK1表達(dá)明顯高于乳腺良性病變;VEGF陰性的乳腺癌預(yù)后較好;VEGF可以作為乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)VEGF及TK1水平可以更好地為臨床判斷預(yù)后及治療提供參考依據(jù)。可為乳腺癌的預(yù)防及臨床干預(yù)起到重要的指導(dǎo)作用，對(duì)乳腺癌的預(yù)防可起到積極作用，降低乳腺癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

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