化瘀固本方對CPID模型大鼠組織形態(tài)學(xué)影響的實驗研究

劉彤鷗 王加謀

（湖北中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院·430061）

化瘀固本方對CPID模型大鼠組織形態(tài)學(xué)影響的實驗研究

劉彤鷗 王加謀*

（湖北中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院·430061）

目的：觀察化瘀固本方和康婦炎膠囊對CPID模型大鼠組織形態(tài)學(xué)的影響。方法：建立CPID大鼠模型，造模21天后分組給藥， 14天后肉眼觀察大鼠盆腔內(nèi)生殖器官及在光鏡下左側(cè)輸卵管病理形態(tài)并評分。結(jié)論：化瘀固本方治療CPID模型大鼠的盆腔病變效果顯著。

化瘀固本方 慢性盆腔炎

慢性盆腔炎(CPID)是病原微生物侵及女性內(nèi)生殖器官及其周圍結(jié)締組織發(fā)生的炎癥。其發(fā)病的機(jī)理主要是由于病原體感染盆腔組織后所引起的炎癥反應(yīng)，炎癥浸潤波及盆腔器官、粘膜、結(jié)締組織，致使局部血流障礙、組織代謝與抗氧化力下降，發(fā)生粘連、水腫，瘢痕纖維化、充血。CPID的臨床癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性下腹鈍痛或隱痛、經(jīng)期延長、盆腔炎性包塊、白帶量多伴有異味、肛門和腰部墜脹、子宮活動受限，甚至出現(xiàn)“冰凍骨盆”，最終影響受孕甚至不孕。本實驗研究活血化瘀、利濕固本中藥對CPID模型大鼠組織形態(tài)學(xué)的影響，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組、實驗藥物

取40只成年未孕SD雌性大鼠，體重200±20g，50日齡。將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、化瘀固本組、康婦炎組，每組10只。混合菌液：致病性大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、B型溶血性鏈球菌以2∶1∶1混合（由湖北省中醫(yī)院細(xì)菌室提供）。

1.2 造模方法

空白組10只除外，其余3組大鼠均以10%水合氯醛，按350 mg /kg標(biāo)準(zhǔn)抽取麻醉劑，穿刺注入大鼠腹腔，麻醉成功后，下腹部備皮，活力碘消毒。取大鼠下腹部正中，恥骨聯(lián)合上做縱切口，長約2cm，逐層開腹后暴露子宮，用lml注射器針頭機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜，注入子宮腔0.lml混合菌液，并向左側(cè)輸卵管腔注入0.lml混合菌液，注畢，一號絲線分層關(guān)腹，消毒術(shù)區(qū)。分組正常清潔飼養(yǎng)。

1.3 試驗藥物

化瘀固本方由丹參、赤芍、敗醬草、王不留行、牡丹皮、川牛膝、郁金、山茱萸、菟絲子、炒黃芪、甘草組成。由湖北省中醫(yī)院藥劑室提供煎劑?？祴D炎膠囊由貴州遠(yuǎn)程制藥有限公司出產(chǎn)，生產(chǎn)批號：國藥準(zhǔn)字Z20025698 。

以上兩組藥物均按成人用藥量合成100ml，依據(jù)以下公式：100 ml（藥液）／60kg（人體重）＊6.7（換算系數(shù)）＊0.2kg（大鼠重）=2.2ml。

1.4 給藥方法

造模后第21天即分組灌胃給藥?？瞻捉M：正常喂養(yǎng)，予蒸餾水2ml灌胃，每日1次。模型組：正常喂養(yǎng)，予蒸餾水2ml灌胃，每日1次?；龉瘫窘M：以化瘀固本方灌胃2ml ，每日1次?？祴D炎組：康婦炎膠囊配制液灌胃2ml，每日1次。各組均灌胃共14天。

1.5 標(biāo)本取材及觀察內(nèi)容

灌胃14天后，將4組大鼠用10%水合氯醛麻醉猝死后，縱行切開下腹，肉眼觀察盆腔內(nèi)生殖器官變化并評分，再摘取近子宮腔處左側(cè)部分輸卵管，10%甲醛溶液分組固定，石蠟包埋，在光鏡下觀察左側(cè)輸卵管病理形態(tài)學(xué)變化并評分。

2 統(tǒng)計分析

全部數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計軟件SPSS11.0建立的數(shù)據(jù)庫，計量資料比較，并采用單因素方差分析。計數(shù)資料組間比較用X2檢驗，等級資料則采用秩和檢驗，當(dāng)P＜0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 肉眼觀察

根據(jù)盆腔的充血水腫、組織粘連、輸卵管狹窄程度自擬標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。依據(jù)肉眼下的觀察，以上每項陽性表現(xiàn)又分為輕、中、重三個級別，盆腔充血，炎性腫脹，分輕、中、重度，計1、2、3分；盆腔內(nèi)有纖維組織粘連，分輕、中、重度，計1、2、3分；輸卵管狹窄、變硬、扭曲，分輕、中、重度，計1、2、3分。匯總為陽性積分，未見以上評分內(nèi)容記0分。據(jù)雙盲法要求，由兩位病理醫(yī)生分別閱片計分，分值越高，提示慢性炎癥表現(xiàn)越重。

實驗結(jié)果顯示，模型組大鼠的盆腔評分與空白組比較有極顯著性差異 (P＜0.01)，化瘀固本組評分與模型組比較差異有極顯著性(p＜0.01)，與康婦炎組比較差異有顯著性(P＜0.05)，與空白組比較差異無顯著性(P＞O.05)。見表1。

表1 各組大鼠盆腔肉眼觀察結(jié)果比較

3.2 HE染色

根據(jù)輸卵管粘膜的破壞程度自擬標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分，依據(jù)在光鏡下陽性表現(xiàn)，分為輕、中、重、極重四個級別，分別記為1分、2分、3分、4分。內(nèi)膜中出現(xiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤，為輕度，計1分;內(nèi)膜中出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤，腺上皮輕度增生、極性排列規(guī)則，為中度，計2分;間質(zhì)大量炎細(xì)胞浸潤，腺上皮增生、極性紊亂，為重度，計3分；間質(zhì)有大量炎細(xì)胞浸潤，見明顯結(jié)締組織增生，管腔有不同程度粘連阻塞，為極重，計4分。匯總為陽性積分，未見以上評分內(nèi)容記0分。據(jù)雙盲法要求，由匯總為陽性積分。未見以上評分內(nèi)容的記0分。據(jù)雙盲法要求，由兩位病理醫(yī)生分別閱片計分，分值越高提示慢性炎癥表現(xiàn)越重。

實驗結(jié)果顯示，模型組大鼠輸卵管HE染色評分與空白組比較有極顯著性差異 (P＜0.01)，化瘀固本方組的評分與模型組比較差異有極顯著性(p＜0.01)，與康婦炎組比較差異有顯著性(P＜0.05)，與空白組比較差異無顯著性(P＞O.05)。見表2。

表2 各組大鼠輸卵管HE染色結(jié)果比較

4 討論

CPID會導(dǎo)致盆腔環(huán)境改變，而盆腔環(huán)境的改變尤其以盆腔粘連為主要臨床特征。調(diào)查顯示有過盆腔手術(shù)史的婦女在尸檢中盆腔粘連發(fā)生率高達(dá)1/3[1]。Carta等[2]報道盆腔手術(shù)后約有60%-90%的婦女形成腹膜粘連。也有研究已經(jīng)證實輸卵管粘膜的病理改變對生育結(jié)局有著重要的影響[3]。謝花香等[4]研究藥物流產(chǎn)后常會發(fā)生慢性輸卵管炎，并成為繼發(fā)不孕的主要原因。

手術(shù)是盆腔粘連的西醫(yī)主要治療方法。輕中度盆腔粘連手術(shù)容易分離，但也容易復(fù)發(fā)，重度盆腔粘連手術(shù)難度較大，創(chuàng)面大、分離困難、出血多、容易感染、吸收熱時間長[12]。此外，還有相關(guān)研究顯示，輸卵管粘膜層的破壞而形成的瘢痕也使手術(shù)治療后一定時間內(nèi)輸卵管再次出現(xiàn)粘連，甚至加重[5]。Yaron等[6]報道,在腹腔鏡粘連松解術(shù)后,仍有96%的患者再次形成粘連。所以是否減輕了盆腔環(huán)境的破壞是評價治療CPID效果的一個重要指標(biāo)。經(jīng)以上實驗證明，化瘀固本組對減輕CPID大鼠盆腔炎癥表現(xiàn)優(yōu)于康婦炎組。

本方用藥丹參，《婦科明理論》有“一味丹參散，功同四物湯”之說。《本草經(jīng)集注》云：“芍藥赤者小利，俗方以止痛，乃不減當(dāng)歸?！倍帪榫?。本方敗醬草取其涼血消癰之效，意在攻濕熱之邪，防本病的急性發(fā)作。王不留行“王不留行，性走而不守”，用此藥助活血通絡(luò)之性，又可防本病常兼有的淋證。牡丹皮其涼血散瘀消癰之功，助“熱”“瘀”消散。川牛膝走而能補，性善下行，可引諸藥作用于下焦又助活血化瘀之效。故本方以敗醬草、王不留行、牡丹皮、川牛膝共為臣藥。

郁金祛煩解郁、調(diào)整患者的情緒效果頗佳，可使患者拂郁之肝氣得舒，氣機(jī)通暢；并且有防止肝郁化火之義，有“防病于未然”之妙。山茱萸可收斂固脫，凡氣血津液脫散皆可用之。菟絲子“其味微辛，則陰中有陽，守而能走，與其他滋陰諸藥之偏于膩滯者絕異”。菟絲子與山茱萸酸甘相合，平補肝腎，不膩不燥，以除患者神疲乏力、腰骶酸痛、帶下量多等腎虛之癥。黃芪乃補氣之圣藥，蓋氣無形，血則有形，有形不能速生，必得無形之氣以生之。血藥生血其功緩，氣藥生血其功速，況氣分血分之藥，合而相同，則血得氣而速生。而炒黃芪補脾益氣而不壅滯，使用炒黃芪以增強健脾和胃功效。以上四味共為佐藥。甘草為使藥。本方諸藥合用，共奏活血化瘀、利濕固本之效，使沖任胞宮氣血通暢，腎氣充盛，癥瘕、疼痛消散。方中虛實同治，攻補兼施，以活血祛瘀為主，寒熱平調(diào)，棄苦寒溫燥之品不用，兼顧脾腎，無耗氣傷陰之弊。

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[4] 謝花香.藥物流產(chǎn)后繼發(fā)不孕38例臨床分析[J].臨床醫(yī)學(xué), 2005,25∶ 58-59.

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（2012-09-06 收稿）