氣相色譜－串聯(lián)質譜方法測定小麥中唑草酮的殘留及消解動態(tài)

張夏力， 劉新剛， 路彩紅， 廖輝偉， 鄭永權＊

（1．西南科技大學，綿陽 621010； 2．農業(yè)部農藥化學與應用重點開放實驗室，中國農業(yè)科學院植物保護研究所，北京 100193）

唑草酮是三唑啉酮類內吸性除草劑，屬原卟啉原氧化酶抑制劑，主要用于防除闊葉雜草和莎草，對磺酰脲類除草劑產生抗性的雜草具有很好的活性［1－2］。唑草酮為選擇性苗后莖葉處理劑，廣泛適用于小麥、大麥等禾本科作物田防除闊葉雜草和莎草。目前關于唑草酮的殘留分析方法，國外僅有少量在水果、蔬菜和水稻上的研究報道［3－4］。而唑草酮在小麥上的殘留和消解研究，國內外尚屬空白。

基質固相分散是Bar ker首次提出并給予理論解釋的一種樣品處理技術［5］，類似于固相萃取，并能夠直接處理固態(tài)、半固態(tài)和黏稠樣品，減少樣品處理步驟和溶劑的使用量，縮短分析時間。該技術目前已被廣泛應用于分離動物組織［6］、水果和蔬菜中的除草劑、殺蟲劑及其他污染物［7－10］。本文采用基質固相分散萃?。≦u ECh ERS）提取，氣相色譜－串聯(lián)質譜儀（GC－MS／MS）檢測的方法測定小麥植株和小麥粒中唑草酮殘留量，評價了唑草酮在小麥植株中的消解動態(tài)及小麥粒中的殘留。本法檢出限低，雜質干擾小，靈敏度、準確度和精密度均滿足農藥殘留分析要求，適用于小麥植株和小麥粒中唑草酮殘留的定性和定量分析，并可用于大量樣品的快速處理。

1 試驗方法

37%炔草酸－芐嘧磺?。虿萃蓾裥苑蹌ㄓ商K州富美實植物保護劑公司提供）；試驗作物：小麥（當?shù)爻Ｒ?guī)品種）。參照中華人民共和國農業(yè)部行業(yè)標準《農藥殘留試驗準則》（NY／T788－2004），分別在山東省和河南省進行了37%炔草酸－芐嘧磺?。虿萃蓾裥苑蹌┰谛←溕蠚埩粝鈩討B(tài)試驗。試驗設空白對照區(qū)、高劑量區(qū)、低劑量區(qū)和消解動態(tài)試驗區(qū)。

1．1 殘留消解動態(tài)試驗

在有代表性的小麥地設置4個試驗小區(qū)，每個小區(qū)面積30 m2。隨機排列。其中3個小區(qū)為施藥處理區(qū)，另一個小區(qū)為不施藥對照區(qū)，小區(qū)之間設保護行。當春后小麥3葉至拔節(jié)期，雜草3～5葉期兌水莖葉噴霧施藥1次，施藥劑量為制劑45 g／667 m2（有效成分249．75 g／h m2，推薦最高劑量的1．5倍量）。施藥方式為兌水莖葉噴霧。分別于噴藥前、噴藥后0（2 h）、1、2、4、7、14、21、28 d取小麥植株樣品。每次隨機取3個樣品，每個樣品不少于1 kg，縮分后留樣200 g，－20℃低溫冷凍保存待測。

1．2 最終殘留試驗

在有代表性的小麥地設置6個試驗小區(qū)，每小區(qū)30 m2。春后小麥3葉至拔節(jié)期，雜草3～5葉期兌水莖葉噴霧施藥1次，施藥劑量分別為制劑30 g／667 m2（有效成分含量166．5 g／h m2，推薦最高劑量）和制劑45 g／667 m2（有效成分含量249．75 g／h m2，推薦最高劑量的1．5倍量）。施藥方式為兌水噴霧。每個處理3次重復，設置空白對照區(qū)。于小麥收獲期采集小麥粒樣品不少于200 g，在－20℃低溫冷凍保存待測。

1．3 分析方法

小麥植株樣品的前處理：準確稱取勻質化后的樣品5 g于50 mL具塞離心管中，加5 mL去離子水，再加7 mL乙腈與3 mL乙酸乙酯溶液，渦旋振蕩3 min，加入2 g無水硫酸鎂和3 g氯化鈉，劇烈振蕩1 min，以5 000 r／min離心5 min后，取上清液4 mL于50 mL旋蒸瓶中，在35℃以110 r／min旋蒸近干，用丙酮定容2 mL，吸取1．5 mL加入裝有0．5 g PSA 粉末、0．5 g炭黑粉末和0．125 g無水MgSO4的微型離心管中，渦旋1 min后，以3 000 r／min離心5 min，取上清液過0．22μm的有機濾膜后裝入自動進樣瓶中，待測。

麥粒樣品的前處理：準確稱取勻質化后的麥粒5 g于50 mL具塞離心管中，加5 mL去離子水后再加7 mL乙腈與3 mL乙酸乙酯溶液，渦旋3 min后加2 g無水硫酸鎂和3 g氯化鈉，劇烈振蕩1 min，以5 000 r／min離心5 min。取上清液4 mL于50 mL旋蒸瓶中，在35℃以110 r／min旋蒸近干，用丙酮定容2 mL，吸取1．5 mL加入裝有0．5 g PSA粉末、0．5 g炭黑粉末和0．125無水Mg SO4的微型離心管中，渦旋1 min后，以3 000 r／min離心5 min，取上清液，過0．22μm有機濾膜后裝入自動進樣瓶中，待測。

采 用 氣 相 色 譜——串 聯(lián) 質 譜 （GC－MS／MS，Varian 450－GC，300－MS）。柱箱條件：120℃的初溫保持5 min，以10℃／min升溫至200℃后保持2 min，再以40℃／min升溫至280℃，保持2 min。進樣量：1μL。進樣方式：不分流進樣。柱流量：1 mL／min（恒流模式）。進樣口溫度：250℃。載氣：高純氦。EI離子源溫度：250℃；接口溫度：260℃。以保留時間和母離子m／z 376，子離子m／z 310和m／z 330進行定性分析，以母離子m／z 376和響應值最高的子離子m／z 330進行定量分析。在此條件下，唑草酮在氣質聯(lián)用的保留時間為18．96 min。

采用外標峰面積定量計算，樣品回收率用單點校正法定量，消解動態(tài)和殘留樣品試驗用標準曲線法定量。

2 結果與分析

2．1 方法的靈敏度、準確度、精密度

由最低添加濃度0．01 mg／kg的添加回收率的色譜圖進行衡量，該方法的靈敏度以噪音信號的10倍確定，得出唑草酮在小麥植株中的最低檢出濃度均低于0．01 mg／kg。使用丙酮配制唑草酮標準儲備液（100 mg／L），取適量儲備液，分別用丙酮稀釋成0．01、0．05、0．1、0．5、1．0 mg／L 的系列標準溶液。在上述儀器的條件下進行測定，以Y峰面積（μVS）對x進樣量（μg／mL）作圖，得到唑草酮標準曲線方程：y＝6 683．4x－159 096，r＝0．998 2。其中，0．01 mg／L標準品的色譜圖見圖1a。唑草酮標準品的質譜圖見圖1b。

采用以上分析方法，唑草酮在小麥植株上及麥粒中的添加回收率見表1，由此得出，唑草酮在小麥植株上的平均回收率為99．4%～102．2%，變異系數(shù)為3．0%～6．5%，小麥植株中添加回收的色譜圖分別見圖1c；在麥粒上的平均回收率為86．6%～90．6%，變異系數(shù)為2．8%～8．9%，小麥粒添加回收的色譜圖見圖1d。該分析方法符合農藥殘留分析的要求。

表1 唑草酮在小麥植株中的添加回收率（n＝5）

圖1 唑草酮的質譜與色譜圖及在小麥植株與麥粒中添加回收色譜圖

2．2 唑草酮在小麥植株上的殘留消解動態(tài)

對唑草酮在山東與河南兩地田間樣品進行唑草酮殘留量的檢測。從表2可以看出，唑草酮在山東與河南兩地小麥植株上的原始沉積量分別為0．044 mg／kg和0．053 mg／kg，隨時間的延長唑草酮的殘留量逐漸下降，兩地消解狀況較為一致，到14 d時唑草酮消解90%以上，且唑草酮在小麥植株中的殘留量與施藥后間隔時間呈指數(shù)關系。

由表2的數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析得到唑草酮在小麥植株中殘留量的消解動態(tài)回歸方程（見表3）。唑草酮在山東和河南兩地小麥植株上的半衰期分別為3．50 d和3．67 d。結果表明：唑草酮屬于易降解農藥（t1／2＜30 d）。

表2 唑草酮在小麥植株中的消解動態(tài)

表3 唑草酮在小麥植株中的消解動態(tài)回歸方程

對照區(qū)與施藥區(qū)的小麥植株樣品的色譜圖見圖2a與圖2b。

2．3 唑草酮在麥粒中的最終殘留

對麥粒樣品進行殘留測定，結果見表4。山東和河南地區(qū)按最高推薦用量（30 g／667 m2）和1．5倍最高推薦劑量（45 g／667 m2）施藥1次，距最后一次施藥21 d后唑草酮在麥粒中的最終殘留量均小于0．01 mg／kg。說明唑草酮在麥粒中屬低殘留農藥。田間對照區(qū)與施藥區(qū)的麥粒樣品色譜圖見圖2c與圖2d。

表4 唑草酮在麥粒中的最終殘留量

圖2 田間小麥樣品中唑草酮的色譜圖

3 結論

本文建立了氣相色譜——串聯(lián)質譜檢測唑草酮在小麥植株中殘留的方法。研究結果表明，小麥植株中唑草酮的平均回收率為99．4%～102．2%，變異系數(shù)為3．0%～6．5%；麥粒中唑草酮的平均回收率為86．6%～90．6%，變異系數(shù)為2．8%～8．9%。

山東和河南兩地田間試驗結果表明，在小麥上使用37%炔草酸－芐嘧磺?。虿萃蓾裥苑蹌?，當春后小麥3葉至拔節(jié)期，雜草3～5葉期兌水莖葉噴霧施藥1次，施藥劑量為制劑45 g／667 m2（有效成分含量249．75 g／h m2推薦最高劑量的1．5倍量），測得山東地區(qū)小麥植株中的唑草酮的殘留消解半衰期為3．50 d，河南地區(qū)小麥植株中唑草酮的半衰期為3．67 d。在小麥上使用37%炔草酸－芐嘧磺?。虿萃蓾裥苑蹌?，按照最高推薦劑量和最高推薦劑量的1．5倍，最多施藥1次，距最后一次施藥21 d，河南和山東兩地小麥植株中唑草酮的殘留量均小于0．01 mg／kg。說明唑草酮屬于易降解性農藥，在小麥上應用安全。

中國、聯(lián)合國糧農組織（FAO）／世界衛(wèi)生組織（WHO）、歐盟均未規(guī)定唑草酮在小麥中最大殘留限量（MRL值），日本規(guī)定唑草酮在小麥中最大殘留限量為0．1 mg／kg。根據(jù)河南、山東兩地殘留試驗結果，建議我國可暫以0．1 mg／kg為唑草酮在小麥中的最大殘留限量。

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