色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在保健食品違禁化學(xué)物質(zhì)分析中的應(yīng)用

彭 濤，李曉娟，代漢慧，陳冬東，林 燕，王國民

（1.中國檢驗檢疫科學(xué)研究院，北京 100123；2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193；3.重慶出入境檢驗檢疫局，重慶 400020）

色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在保健食品違禁化學(xué)物質(zhì)分析中的應(yīng)用

彭 濤1，李曉娟1，代漢慧1，陳冬東1，林 燕2，王國民3

（1.中國檢驗檢疫科學(xué)研究院，北京 100123；2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193；3.重慶出入境檢驗檢疫局，重慶 400020）

色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是將色譜的高分離能力和質(zhì)譜的鑒別能力相結(jié)合，組成一種現(xiàn)代分析技術(shù)，它充分體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜的優(yōu)勢互補。本研究介紹了保健食品的定義、分類；歸納了常見保健食品中可能添加的違禁化學(xué)物質(zhì)種類；介紹了保健食品中違禁化學(xué)物質(zhì)分析技術(shù)現(xiàn)狀；并按照保健食品功效分類，對近年來色質(zhì)聯(lián)用（主要是液相色譜－質(zhì)譜和氣相色譜－質(zhì)譜）技術(shù)在保健食品違禁化學(xué)物質(zhì)分析中的應(yīng)用進行綜述。

色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)；保健食品；違禁化學(xué)物質(zhì)；應(yīng)用；綜述

保健食品（health foods）又稱功能食品（functional foods）、營 養(yǎng) 食 品 （nutritional foods）、革新食品（reform foods）等，是指適宜于特定人群食用，具有調(diào)節(jié)機體功能，不以治療疾病為目的，并且對人體不產(chǎn)生任何急性、亞急性或者慢性危害的食品。保健食品首先具有食品屬性，應(yīng)符合普通食品的基本要求，能提供一種或多種營養(yǎng)素，能被人體消化吸收，安全無毒；其次具有功能屬性，除了具有一般食品皆具的營養(yǎng)功能和感官功能（色、香、味、形）外，還具有一般食品所沒有的或不強調(diào)的調(diào)節(jié)人體生理節(jié)律、預(yù)防疾病、促進健康的第三功能，可滿足特殊人群生理機能需要的特殊食品，并受食用對象、食用量限制，并非人人皆宜；再次具有非藥物屬性，保健食品不是藥品，是以具有某一功能的動物、植物或天然物作為原料，在“醫(yī)學(xué)上或營養(yǎng)學(xué)上具有特殊要求的特定功能的食品”，不能取代藥物對病人的治療作用，不能以治療疾病為目的［1］。目前我國已批準的保健食品的保健功能有增強免疫力、抗氧化、輔助改善記憶、緩解體力疲勞、減肥、改善生長發(fā)育、提高缺氧耐受力、輔助降血脂、輔助降血糖、改善睡眠、改善營養(yǎng)性貧血、促進泌乳、緩解視疲勞、輔助降血壓、促進消化、通便、補充營養(yǎng)素等28種。隨著人們生活水平的提高，越來越關(guān)注自身的健康狀況，對保健品的需求逐年增加。

由于我國保健食品產(chǎn)業(yè)發(fā)展起步晚、企業(yè)素質(zhì)參差不齊、市場管理不完善，摻偽現(xiàn)象屢屢發(fā)生：這些一直困擾著保健食品產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展。特別是在保健食品中添加違禁化學(xué)物質(zhì)，不僅嚴重危害消費者的身體健康和經(jīng)濟利益，而且極大地損害了我國保健食品的形象。據(jù)有關(guān)調(diào)查顯示，近幾年我國發(fā)現(xiàn)非法添加藥品、防腐劑及非食品成分的保健食品有數(shù)百種，其中，市場熱銷的減肥、調(diào)節(jié)血糖、降血壓等保健食品中，添加違禁化學(xué)藥物問題尤為嚴重［2］，常見保健食品中可能添加的違禁化學(xué)物質(zhì)列于表1。加強保健食品質(zhì)量安全監(jiān)控，研究建立保健食品中違禁化學(xué)物質(zhì)確證檢測技術(shù)刻不容緩。

表1 常見保健食品中可能添加的違禁化學(xué)物質(zhì)Table 1 Possible illegal chemicals in health foods

續(xù)表

1 保健食品中違禁化學(xué)物質(zhì)分析技術(shù)現(xiàn)狀

近年來，國內(nèi)外報道了大量保健食品中違禁化學(xué)物質(zhì)的檢測方法，一般采用儀器方法進行檢測，主要有薄層色譜法（TCL）［3－5］、毛細管電泳法（CE）［6］、高效液相色譜法（HPLC）［7－10］、毛細管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用法（CE/MS）［11］、氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法（GC/MS）［12－22］和液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法（LC/MS）［23－61］等。由于保健品成分復(fù)雜，目前常規(guī)的檢測手段難以全面、準確地鑒別各種添加的違禁化學(xué)物質(zhì)，建立和完善非法添加化學(xué)物質(zhì)的檢測方法已成為分析界的熱點之一。

隨著分析儀器的發(fā)展，質(zhì)譜技術(shù)特別是色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在食品安全檢測中發(fā)揮著越來越重要的作用，主要有 CE/MS、GC/MS、LC/MS、LCMS/MS、LC-ICP/MS等。這些高新技術(shù)具有傳統(tǒng)方法無法比擬的優(yōu)勢，既應(yīng)用了現(xiàn)代色譜對復(fù)雜樣品的高分離能力，又發(fā)揮了質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度以及能夠準確提供化合物分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點。本工作主要對GC/MS和LC/MS聯(lián)用技術(shù)在保健食品違禁化學(xué)物質(zhì)分析中的應(yīng)用進行綜述。

2 色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在保健食品違禁添加化學(xué)物質(zhì)分析中的應(yīng)用

自1957年首次實現(xiàn)GC和MS聯(lián)用以來，GC/MS聯(lián)用技術(shù)得到十分完備的發(fā)展，成為目前最完善、應(yīng)用最廣泛的儀器分析技術(shù)之一。與一般的分離分析方法相比，GC/MS具有操作條件穩(wěn)定、使用方法成熟、分離效率高、檢測靈敏度高、用電子電離（EI）得到的化合物譜圖可以與標準譜庫進行對照等優(yōu)點。但GC/MS要求樣品經(jīng)過氣化后才可進入色譜柱和質(zhì)譜儀，因此僅適宜小分子、易揮發(fā)和熱穩(wěn)定的化合物分析。然而在實際分析中，只有20%左右的物質(zhì)可以滿足這些條件。絕大多數(shù)化合物由于具有強極性、低揮發(fā)度、高分子量或熱不穩(wěn)定性等特點，需要采用液相色譜來完成。LC/MS具有獨特的優(yōu)勢，其分析的化合物多數(shù)無需衍生化處理而直接進樣，在HPLC上得到分離，并進一步在MS上獲得準確的定性和定量，從而大大地縮短了分析時間，提高了分析的靈敏度和準確性，逐漸被研究人員所認識和發(fā)展起來，并廣泛應(yīng)用于保健食品的分析。

2.1 減肥食品分析

減肥保健食品中的違禁添加物以食欲抑制劑、能量消耗劑、利尿劑、胃腸脂肪酶抑制劑和瀉藥為主。這些藥物通過抑制食欲，加速代謝，少吸水，或者幫助燃燒脂肪和儲備的卡路里來達到減輕體重的目的。雖然減肥效果顯著，但對人體及其內(nèi)環(huán)境平衡都有很大的損害，并且存在嚴重的藥物依賴性，我國嚴令禁止其在保健食品中使用。

GC/MS主要被用來分析減肥食品中的違禁添加物（如芬氟拉明、苯丁胺、芐非他明、氯苯丁胺、氯芐苯丙胺、苯雙甲嗎啉、苯甲嗎啉及安非拉酮和嗎吲哚［13－15］等）食欲抑制劑。樣品用HP-5MS柱分離，EI源電離，全掃描（SCAN）或選擇離子方式（SIM）監(jiān)測方式分析。NIST譜庫中標準圖譜在違禁添加物定性確證方面發(fā)揮了重要作用。潘振球等［14］建立了減肥食品中嗎吲哚的GC/MS測定方法。樣品采用甲醇水超聲提取，再加入與甲醇等量的水沉淀雜質(zhì)后，過C18固相萃取柱（SPE）凈化，洗脫液進行GC/MS（SIM）分析，以保留時間和特征離子峰（m/z 268、266、231、176）的相對豐度定性。方法的加標回收率在94.2%～102%之間，相對準標偏差（RSD）小于5%，最低檢測限（LOD）和定量限（LOQ）分別為0.02～0.07mg/kg和0.068～0.23mg/kg。王杉等［15］建立了同時測定減肥保健品中芬氟拉明、苯丁胺、芐非他明、氯苯丁胺、氯芐苯丙胺、苯雙甲嗎啉、苯甲嗎啉及安非拉酮等8種合成食欲抑制劑的方法。以二苯胺為內(nèi)標，樣品經(jīng)叔丁基甲醚－水－甲醇混合溶劑超聲提取后，用 GC-NPD初篩，再用 GC/MS（SCAN）方式確證。

LC/MS是減肥保健食品中違禁添加物監(jiān)測的主要手段。

王柯等［23］建立了檢測減肥類保健食品中28種非法摻加藥物的專屬性方法。樣品經(jīng)甲醇提取，采用Agilent Zorbax SB-C18分離，將28種化合物分為7組，分別以不同比例的0.5%甲酸溶液－乙睛或0.5%甲酸溶液－甲醇進行梯度洗脫，液相色譜－離子阱質(zhì)譜（LC-Trap MS）在電噴霧電離（ESI）模式下自動掃描測定。通過與標準譜庫中保留時間和多級質(zhì)譜圖的雙重對比，對樣品中非法摻加的藥物進行定性鑒別。在1 000批供試品中，分別檢測到芬氟拉明、咖啡因、西布曲明及其2個衍生物、番瀉苷A、番瀉苷B、酚酞和二甲雙呱。曾祥林等［24］也采用LC-Trap MS方法，在ESI正負離子模式，SCAN、SIM、多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）方式下，甄別保健食品中的氯噻嗪、鹽酸西布曲明、酚酞、吲噠帕胺、布美他尼、吉非羅齊等6種化學(xué)減肥藥物。

Li等［25］建立了以克倫特羅作為內(nèi)標的液相色譜－電噴霧－串聯(lián)質(zhì)譜（LC-ESI-MS/MS）方法，可同時測定減肥功能食品中非法添加的偽麻黃堿、去甲偽麻黃堿、咖啡因、士的寧、芬氟拉明、西地那非、安非他酮等7種違禁藥物。片劑用氨化甲醇提取，液體、植物粉末或膠囊用V（氨化甲醇）∶V（乙醚）＝2∶1的混合溶液提取后，用RP-C18色譜柱分離，以含0.03%甲酸的乙腈和0.01%甲酸水溶液梯度洗脫，在10min內(nèi)，7種組分得到良好分離。方法回收率為81.2%～110.3%，LOD 為4.2～16.7μg/kg，RSDs為1.1%～8.4%。馬微等［26］采用加速溶劑萃取法（ASE）建立了減肥保健食品中芬氟拉明、苯丙醇胺、西布曲明、舍曲林、利莫那班、安非他酮、西酞普蘭、氟西汀、苯氟雷司、托吡酯、唑尼沙胺等11種食欲抑制劑的LC-MS/MS分析方法。采用ESI電離，MRM模式檢測，以保留時間和子離子比定性，外標法定量。方法LOD為0.05～4.0mg/kg，回收率為78.3%～103.6%，RSDs均小于15%。同時，還建立了減肥咖啡、減肥茶、減肥膠囊、蘋果醋咀嚼片、減肥餅干等不同類型減肥保健食品中非法添加酚酞和大黃素的LC-MS/MS分析方法［27］。在檢測的24種樣品中，大黃素的檢出率為25%，酚酞的檢出率為66.7%。朱炳輝等［28］采用超聲提取、MCX固相萃取柱凈化，建立了保健品中可待因、麻黃堿、甲基安非他明、咖啡因、芬氟拉明、引達帕胺、西布曲明、布美他尼等8種減肥化學(xué)藥物的LC-MS/MS檢測方法。馬長路等［29］也采用超聲提取，建立了咖啡、茶葉、膠囊和片劑類減肥保健食品中吲達帕胺、布美他尼、托拉沙米、氨苯喋啶等4種利尿劑的超高效液相色譜－電噴霧－串聯(lián)質(zhì)譜（UHPLC-ESI-MS/MS）分析方法。Gay等［30］還報道了一種測定膳食補充劑中麻黃堿類物質(zhì)和辛氟林的簡單分析方法。樣品采用過濾凈化、串聯(lián)質(zhì)譜檢測，獲得與采用SPE凈化、單極質(zhì)譜源內(nèi)裂解法檢測類似的結(jié)果。并對由ESI和大氣壓化學(xué)電離（APCI）離子化方式獲得的結(jié)果進行了比較，發(fā)現(xiàn)ESI電離方式下更易受到基質(zhì)效應(yīng)的影響。

2.2 抗疲勞食品分析

抗疲勞保健食品中的違禁添加物主要以同化激素、5-磷酸二酯酶（PDE-5）抑制劑和糖皮質(zhì)激素為主。這些藥物通過補充能量，提高機體器官功能，特別是循環(huán)系統(tǒng)功能，加速體內(nèi)代謝物質(zhì)的清除以達到緩解疲勞的目的。但多為激素類物質(zhì)，對機體代謝和生長發(fā)育具有重要影響，嚴格禁止添加到保健食品中。

同化激素、PDE-5抑制劑主要采用GC/MS分析。王占良等［16］采用GC/MS法同時檢測了抗疲勞保健品中的睪酮、醋酸睪酮、丙酸睪酮、異己酸睪酮、庚酸睪酮、環(huán)戊丙酸睪酮、葵酸睪酮、苯丙酸睪酮和十一酸睪酮等9種睪酮酯類藥物。樣品用叔丁基甲醚提取，針對保健食品劑型的不同分別采取C18反相SPE柱和硅膠正相SPE柱凈化，經(jīng)V（三甲基硅基三氟乙酰胺（MSTFA））∶V（三甲基碘硅烷（TMSI））∶V（二硫代赤糖蘚醇（DTE））＝1 000∶3∶1的溶液衍生化后，采用HP-1MS柱程序升溫分離，EI源電離，以甲基睪酮作為內(nèi)標，SIM檢測。方法LOD和回收率滿足日常檢測要求。De Cock等［17］建立了保健食品中諾龍、睪酮、19去甲雄烯二酮、4-雄烯二酮、去甲雄酮和去甲腎上腺素等6種同化激素的分析方法。以17α－甲基睪酮作為內(nèi)標，樣品采用正戊烷-NaOH提取，用HPLC分離凈化，收集15.2～18.3min的流出物，經(jīng)V（MSTFA）∶V（NH4I）∶V（乙硫醇（EtSH））＝380∶1∶2溶液衍生化后，采用HP Ultra-1柱程序升溫分離，EI源電離，SIM 檢測。王占良等［18］采用 GC/MS法同時檢測抗疲勞保健品中的他達那非、西地那非、好貓西地那非和伐地那非等4種PDE－5抑制劑。樣品用乙酸乙酯－磷酸鹽－碳酸鹽緩沖液提取，HP-1MS柱程序升溫分離，EI源電離，SCAN方式檢測，方法LOD滿足日常檢測要求。

糖皮質(zhì)激素主要采用LC/MS分析。吳小紅等［31］建立的 LC-MS/MS法可檢測保健品中可能非法添加的潑尼松、地塞米松、曲安萘德、醋酸潑尼松龍、醋酸氫化可的松、醋酸潑尼松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸曲安萘德、潑尼松龍、氫化可的松、倍他米松、醋酸氟輕松和丙酸倍氯米松等14種糖皮質(zhì)激素類化學(xué)藥物。樣品經(jīng)甲 醇 提 取，Shimadzu Shim-packVP-ODS（250 mm×4.6mm×5μm）色譜柱分離，14種糖皮質(zhì)激素分為兩個液相系統(tǒng)，以20mmol/L醋酸銨（含0.1%甲酸）-乙腈進行梯度洗脫，ESI＋模式，SCAN一級質(zhì)譜、選擇離子二級掃描檢測。通過與標準譜庫中保留時間和多級質(zhì)譜圖的雙重對比，對樣品中非法添加的糖皮質(zhì)激素進行定性鑒別。在50批供試品中，檢測到7種樣品中含有醋酸潑尼松和醋酸曲安萘德。雷玉萍等［32］建立了檢測保健食品中6種糖皮質(zhì)激素的方法。樣品經(jīng)甲醇提取，Agilent ZORBAX SB-C18（2.1 mm×150mm×3.5μm）分離，柱溫35℃，以乙腈-0.1%甲酸溶液進行梯度洗脫，流速0.25 mL/min，以ESI＋模式進行質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集。6種糖皮質(zhì)激素的HPLC圖譜分離度良好，質(zhì)譜分辨率符合鑒別要求，方法最小檢出量為2～14ng。

2.3 安神鎮(zhèn)靜食品分析

安神鎮(zhèn)靜保健食品中的違禁添加物以苯二氮卓類和巴比妥類為主。這些藥物除具有鎮(zhèn)靜催眠作用外，還有抗焦慮、抗驚厥和中樞性骨骼肌松弛的作用，但能夠?qū)χ袠猩窠?jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生抑制，甚至麻痹呼吸中樞致死，且易產(chǎn)生耐受性及依賴性，是嚴格管控的藥物，嚴禁在保健食品中添加。

GC/MS和LC/MS均可用于該類藥物的分析。

王占良等［19］采用GC/MS法同時檢測保健品中的地西泮、咪達唑侖、硝基安定、唑吡坦、氯硝安定、艾司唑侖、阿普唑侖和佐匹克隆等8種苯二氮卓類藥物。樣品用叔丁基甲醚－磷酸鹽－碳酸鹽緩沖液提取，HP-1MS柱分離，程序升溫，EI源電離，以甲基睪酮作為內(nèi)標，SCAN方式檢測。采用CLARKE’s Analysis of Drugs和Poisons 2004標準質(zhì)譜圖確認。方法回收率在85%～97%之間，LOD能夠滿足日常檢測要求。劉吉金等［20］建立了鎮(zhèn)靜安神類保健食品中非法添加4種巴比妥類和10種苯二氮卓類化學(xué)成分的GC/MS快速篩查驗證方法。樣品采用甲醇超聲提取，DB-5MS柱分離，程序升溫，EI源電離，SCAN方式檢測，于NIST質(zhì)譜庫中檢索定性信息。標準品LOD小于0.01g/L。

與 GC/MS相比，LC/MS 特別是 LC-MS/MS方法排除樣品基質(zhì)干擾的能力更強，靈敏度更優(yōu)，應(yīng)用也更廣，常用于甄別中藥制劑及保健食品中的違禁添加物。樣品經(jīng)LC分離，ESI電離，再采用 MRM方式檢測。陳安珍等［33］建立了鎮(zhèn)靜安神類中藥制劑及保健品中非法添加5種化學(xué)藥品的檢測方法，并發(fā)現(xiàn)了非法添加艾司唑侖、氯丙嗪和地西泮的樣品。祝波等［34］建立了保健品中非法添加15種鎮(zhèn)靜催眠劑的LCMS/MS分析方法，LOD為0.2～5.9pg。高青等［35］采用 Waters Sunfire C18色譜柱，20mmol/L醋酸銨溶液－甲醇梯度洗脫，流速為1mL/min（分流比為4∶1），選擇正負離子SCAN方式檢測。利用質(zhì)譜解析軟件研究上述藥物的質(zhì)譜裂解規(guī)律，通過比較樣品峰與對照品峰的一級質(zhì)譜、二級質(zhì)譜質(zhì)荷比，確定樣品中是否摻雜了鎮(zhèn)靜催眠藥物化學(xué)藥物，LOD為1～40ng。崔福春等［36］建立了中成藥、保健食品中非法添加的21種安神類化學(xué)成分的快速測定方法，LOD低于2ng。

2.4 降血壓食品分析

降血壓保健食品中的違禁添加物以鈣離子通道抑制劑、利尿劑為主。前者使血管（主要是動脈血管）平滑肌舒張或心肌細胞收縮力減弱，從而產(chǎn)生降血壓效應(yīng)；后者通過其利尿和排鈉作用，減少血容量，使心排出量降低而降壓。但它們都有導(dǎo)致血壓下降或者體位性低血壓、心率不齊、失眠等副作用，而且對性功能有影響。因此嚴禁添加到保健食品中。

GC/MS主要用于鈣離子通道抑制劑分析。李濤等［21］建立了GC/MS法檢測降壓類保健食品中非法添加化學(xué)藥物的方法。樣品采用無水乙醇－氯仿－丙酮混合溶液超聲提取，或水－氯仿液液分配富集，Rtx-5ms柱程序升溫分離，EI源電離，SCAN模式分析，NIST標準質(zhì)譜庫檢索確證。方法LOD在5～20ng之間，能夠在30～60 min內(nèi)快速檢測降壓類保健食品中非法添加的尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平、可樂定、氟桂利嗪、卡托普利等7種化學(xué)藥物。

LC/MS法也普遍用于降血壓保健食品中違禁添加物的分析。吳西梅等［37］同時測定了保健品和中成藥中違禁添加的利血平、氫氯噻嗪、米諾地爾、卡托普利、哌唑嗪、尼卡地平和奈諾普利等7種抗高血壓藥物的檢測方法。樣品用80%甲醇提取，以保留時間和質(zhì)譜二級特征離子作為定性依據(jù)。7種抗高血壓藥物的加標回收率為80.5%～101.0%，RSD為2.7%～7.9%。盧亞玲等［38］以西力士為內(nèi)標，建立了降血壓保健食品中8種違禁添加成分的測定方法。ESI＋模式下標準品的LOD為2.5μg/L；ESI-模式下為50μg/L，回收率為63.3%～107.4%。封淑華等［39］建立了中藥及保健食品中非法摻入7種鈣拮抗劑的方法，藥物的分子離子峰及加和離子峰可作為進一步判斷的有力依據(jù)。胡青等［40］采用LC-Trap MS聯(lián)用法建立了檢測抗高血壓類中藥及保健品中15種非法摻加化學(xué)藥品的專屬性方法。通過與標準譜庫中保留時間和多級質(zhì)譜圖的雙重對比，對樣品中非法摻加的化學(xué)藥品進行定性鑒別。

2.5 降血脂食品分析

降血脂保健食品中的違禁添加物以3－羥基－3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶競爭性抑制劑為主。該藥物可降低血漿總膽固醇、低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白的膽固醇含量，亦可中度增加高密度脂蛋白膽固醇和降低血漿甘油三酯。但可能造成胃腸道不適，頭痛，皮疹，視覺模糊和味覺障礙，以及引起血氨基轉(zhuǎn)移酶可逆性升高等，嚴禁添加到保健食品中。

該類樣品主要采用LC-MS方法檢測。張喆等［41］建立了LC/MS/MS方法檢測保健品中非法添加的煙酸、普伐他汀鈉、瑞舒伐他汀鈣、苯扎貝特、阿托伐他汀、氟伐他汀鈉、吉非羅齊、洛伐他汀、非諾貝特和辛伐他汀等10種化學(xué)降脂藥物。采用甲醇超聲提取，C18色譜柱分離，20 mmol/L醋酸銨溶液和甲醇為流動相，梯度洗脫，ESI正負離子模式檢測。并利用質(zhì)譜解析軟件研究了該類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律，通過比較樣品峰與對照品峰的一級和二級質(zhì)譜的質(zhì)荷比，確定樣品中是否摻雜了化學(xué)降脂藥物。該方法不受藥物輔形劑干擾，各藥物色譜峰之間分離度良好，質(zhì)譜分辨率符合要求，最小檢出量為2～40ng。胡青等［42］建立了 LC-MS/MS法檢測降血脂類保健食品中違禁添加的17種化學(xué)藥物。樣品采用甲醇提取，C18柱分離，以0.5%甲酸-乙腈和20mmol/L醋酸銨溶液－乙腈進行梯度洗脫，ESI正離子模式檢測。通過與標準譜庫中保留時間和多級質(zhì)譜圖的雙重對比，定性鑒別樣品中違禁添加的17種化學(xué)藥物。17種藥物的LOD為0.05～1.96ng。

2.6 降血糖食品分析

降血糖保健食品中的違禁添加物以α－葡糖苷酶抑制劑、雙胍類和磺酰脲類降糖藥為主。該類藥物通過阻斷碳水化合物分解，或刺激胰島素分泌，或增加胰島素對受體靶組織的敏感性，來達到降血糖的功效。但有刺激胃腸道，導(dǎo)致低血糖等副作用，不得作為保健食品添加劑。

該類藥物主要采用LC/MS方法檢測。代秀梅等［43］建立了反相LC/MS法，可同時定量檢測維力波糖、米格列醇、維格列波糖和阿卡波糖等4種α－葡糖苷酶抑制劑。楊釗等［44］使用UHPLC-MS/MS的 MRM模式測定降糖類中藥制劑及保健品中添加的11種化學(xué)藥。樣品以Acquity Uplctm BEH C18（2.1mm×100mm×1.7 μm）色譜柱進行分離，甲醇-10mmol/L醋酸銨溶液梯度洗脫，流速0.2mL/min，ESI＋電離，質(zhì)譜檢測。11種化學(xué)藥物檢出濃度在0.1～3.6ng/g之 間，3個水平的回收率在90.0%～118.7%之間。殷帥等［45］建立了保健食品中非法添加11種輔助降血糖類化學(xué)藥物的LC-MS/MS檢測方法。樣品經(jīng)甲醇提取后，用Ultimate XB-C18（2.1mm×150mm×3.5μm）色譜柱分離，柱溫30℃，以甲醇-0.1%乙酸銨溶液進行梯度洗脫，流速0.2mL/min，ESI＋電離，采集質(zhì)譜數(shù)據(jù)。11種輔助降血糖類化學(xué)藥物的HPLC色譜圖分離度良好，質(zhì)譜分辨率符合鑒別要求。方法LOD為0.01～1.4mg/kg。

2.7 壯陽食品分析

壯陽保健食品中的違禁添加物以PDE-5抑制劑及其類似物、腎上腺素能阻斷劑、多巴胺激動劑為主。通過擴張陰莖平滑肌，增加血液流量，或阻滯腎上腺素能受體、多巴胺受體而達到壯陽目的。但對神經(jīng)系統(tǒng)、臟器具有一定的損傷，且有依賴性，不得作為保健食品添加劑。

該類藥物主要采用LC/MS法檢測。張魯南等［46］建立了LC-MS/MS法測定性保健品中可能違禁添加的西地那非、他達那非、甲磺酸酚妥拉明、紅地那非、鹽酸伐地那非、還陽酚和還陽堿等7種藥物。樣品用C18色譜柱，以0.02%甲酸－乙腈為流動相，梯度洗脫。以D3-他達那非為內(nèi)標，方法回收率為85.29%～119.5%，RSD小于5%。陳安珍等［47］建立了保健品中非法添加西地那非、他達拉非和優(yōu)地那非的檢測方法。采用UHPLC-MS/MS，MRM 模式進行定性和定量檢測。3種化學(xué)藥的LOD在0.02～0.05μg/L之間，3個水平的回收率在95.2%～98.5%之間。對50批中成藥及保健品進行篩查，其中有兩批含有西地那非。魯藝等［48］采用LC/MS聯(lián)用技術(shù)研究了補腎壯陽類中藥制劑及保健品中非法添加西地那非類似物－硫代西地那非的檢測方法。以液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)提供的相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息，對篩查結(jié)果做出準確判斷。Zou等［49］采用 LC-ESI-MS/MS 方法篩查西地那非、伐地那非、他達拉非、豪莫西地那非、紅地那非和羥基豪莫西地那非等合成PDE-5抑制劑及其類似物。采用MRM模式同時測定，通過保留時間、紫外光譜和質(zhì)譜圖進行定性鑒定。劉暢等［50］利用LC/MSn對補腎壯陽類中成藥和保健食品中添加的性功能類化學(xué)藥品阿樸嗎啡、育亨賓、伐地那非、西地那非和前列地爾的檢測方法進行了研究。樣品用ZORBAX SB C18色譜柱，乙腈-0.5%甲酸梯度洗脫，ESI（±）電離，離子阱質(zhì)譜檢測。阿樸嗎啡、育亨賓、伐地那非和西地那非均產(chǎn)生［M＋H］＋分子離子峰，前列地爾產(chǎn)生［M－H］-分子離子峰，MSn譜圖的特征碎片離子明顯，由此建立了包含保留時間與MSn譜圖的標準譜庫。

2.8 消炎鎮(zhèn)痛食品分析

消炎鎮(zhèn)痛保健食品中的違禁添加物以非甾體抗炎藥為主。該類藥物通過抑制前列腺素的合成，發(fā)揮其解熱、鎮(zhèn)痛、消炎作用，但對胃腸道、肝臟、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等具有一定的毒副作用，嚴禁用于保健食品添加劑。

GC/MS和LC/MS均可用于該類藥物的分析。蘇小川等［22］應(yīng)用GC/MS聯(lián)用技術(shù)對可疑添加違禁藥物的保健膠囊進行篩查。樣品分別采用丙酮和正己烷超聲提取，用HP-5MS柱程序升溫分離，EI源電離，SCAN檢測。譜圖采用NIST 02.I、NIST 98.I、PMW＿TOX 2.I和 WILEY 275.I譜庫檢索，準確定性出布洛芬、非那西丁、消炎痛8種違禁添加藥物及6種藥物分解物。胡青等［51］建立了檢測解熱鎮(zhèn)痛類保健品中26種非法摻加化學(xué)藥品的專屬性方法。樣品采用甲醇超聲提取，Aglient ZORBAX SB色譜柱分離，以0.5%甲酸－乙腈為流動相，梯度洗脫，ESI電離，離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。通過與標準譜庫中保留時間和多級質(zhì)譜圖的雙重對比，對樣品中非法摻加的化學(xué)藥品進行定性鑒別。在60批供試品中，檢測出布洛芬、阿司匹林、萘普生。

2.9 養(yǎng)顏保健食品分析

養(yǎng)顏保健食品中的違禁添加物以雌激素為主。該類藥物可以使皮膚柔嫩、細膩，有光澤和彈性，但可能干擾人體的正常激素代謝，嚴禁在保健食品中添加。

該類藥物主要采用LC/MS方法檢測。劉暢等［52］建立了LC-MS/MS法檢測保健食品中違禁添加的雌三醇、雌二醇、炔雌醇、雌酮、己烯雌酚和美雌醇等6種雌激素類化學(xué)藥品。建立了包含保留時間和MSn譜圖的標準譜庫。樣品采用甲醇超聲提取，C18色譜柱分離，乙腈－20mmol/L乙酸銨溶液為流動相，梯度洗脫，ESI＋檢測。6種雌激素均產(chǎn)生［M＋H］＋分子離子峰，MSn譜圖的特征碎片離子明顯。

3 結(jié)束語

綜上所述，色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在保健食品違禁化學(xué)物質(zhì)分析中以LC/MS方法為主，GC/MS方法相對較少。目前分析的保健食品樣品類型主要是膠囊、口服液、粉末和丸劑等；違禁化學(xué)物質(zhì)主要采用有機溶劑或緩沖溶液，配合超聲波或加速溶劑萃取方式提??；凈化方法相對簡單，以液液分配為主，SPE方法較少，一些樣品的分析甚至采用提取過濾后直接進樣的方法；在檢測中，多采用串聯(lián)質(zhì)譜和MSn標準譜庫方法，以彌補樣品凈化步驟的不足。

目前，色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在保健食品分析中的對象主要為違禁添加的化學(xué)藥品，對具有毒副作用的天然物尚缺乏分析應(yīng)用。相信隨著色譜分離技術(shù)和質(zhì)譜檢測能力的提高，色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在定量分析、鑒定靶物質(zhì)和篩選未知成分等研究領(lǐng)域的深度應(yīng)用，將進一步推動色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，也必將對我國的保健食品分析研究起到巨大的促進作用。

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Application of Chromatography-Mass Spectrometry Combined Technology on Illegal Chemical Analysis in Health Foods

PENG Tao1，LI Xiao-juan1，DAI Han-hui1，CHEN Dong-dong1，LIN Yan2，WANG Guo-min3
（1.Chinese Academy of Inspection and Quarantine，Beijing100123，China；2.College of Science，China Agricultural University，Beijing100193，China；3.Chongqing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Chongqing400020，China）

Chromatography-mass spectrometry is a modern analytical technique，which combines the ability of high resolution of chromatography and identification of mass spectrometry，and fully reflects the superiority of chromatography and mass spectrometry.This paper presented the definition and classification of health foods，summarized the types of illegal chemicals that may be spiked in common health foods，introduced the status of illegal chemical analysis in health foods，and according to the classification of effectiveness of health foods，summarized the application of chromatography-mass spectrometry combined technology，liquid chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-mass spectrometry mainly，on illegal chemical analysis in health foods in recent years.

chromatography-mass spectrometry；health foods；illegal chemical；application；review

林 燕（1974～），女，副教授，從事食品農(nóng)產(chǎn)品安全研究。E-mail：linyan＠cau.edu.cn

O 657.63

A

1004-2997（2012）06-0370-10

2012-06-28；

2012-10-11

國家科技支撐計劃《功能食品質(zhì)量安全保障技術(shù)研究》（2012BAD33B02）資助

彭 濤（1976～），男，博士，副研究員，從事食品農(nóng)產(chǎn)品安全研究。E-mail：caiq＿pengtao＠126.com