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    攝食行為對小型豬心臟自主神經(jīng)功能的影響

    2012-02-01 09:28:06潘永明徐孝平陳民利
    中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2012年1期
    關(guān)鍵詞:攝食心臟動物

    潘永明,陳 亮,何 歡,徐孝平,陳民利

    (浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗研究中心/比較醫(yī)學(xué)研究中心,杭州 310053)

    攝食行為是動物和人的本能之一,以獲取適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng),滿足機體的能量需要。攝食的調(diào)控是一個受多種因素影響的復(fù)雜系統(tǒng)[1],并受到高級大腦認(rèn)知活動的控制,神經(jīng)生理學(xué)研究表明,下丘腦不僅是動物的皮質(zhì)植物性中樞,也是神經(jīng)內(nèi)分泌的中心[2],其將調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動與其它生理活動聯(lián)系起來,并經(jīng)下丘腦各神經(jīng)區(qū)域通過接受、整合、發(fā)放食欲信號相互聯(lián)系,相互影響,從而達(dá)到對食欲的調(diào)節(jié),以維持動物的體重和體脂的相對恒定,并有研究證實交感神經(jīng)系統(tǒng)能改變采食行為和體重[3]。心率變異性(heart rate variability,HRV)作為分析自主神經(jīng)系統(tǒng)活動的敏感性評價手段,能有效評估人類或其它動物的應(yīng)激狀態(tài)、情緒變化和病理進(jìn)程[4,5,6],其高頻(high frequency,HF)和低頻(low frequency,LF)成分分別可反映副交感神經(jīng)和交感神經(jīng)的活動[7],且LF/HF比值亦反映了交感和迷走神經(jīng)的平衡狀況。

    隨著人們生活水平的提高,與攝食行為相關(guān)的疾病也越來越受到關(guān)注,如肥胖、冠心病、糖尿病、動脈粥樣硬化等疾病,且臨床資料顯示代謝綜合征、冠心病和糖尿病等疾病均可引起 HRV的降低[8]。巴馬小型豬是我國特有小型豬的品種之一,且與人類的解剖、生理以及疾病發(fā)生機理等多方面具有相似性,深受實驗研究者的青睞。目前在代謝綜合征、冠心病、糖尿病等疾病動物模型復(fù)制中大多需要高脂誘導(dǎo),因此,攝食是一個重要的環(huán)節(jié),研究小型豬攝食行為對心臟自主神經(jīng)功能的影響,有助于深化了解代謝性疾病和心腦血管疾病的發(fā)生機理和改善攝食行為具有重要指導(dǎo)意義;雖然,近年來對攝食行為的研究探討大多局限在瘦素、神經(jīng)肽、胰島素以及膽囊收縮素等相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)和激素的探討,對心臟自主神經(jīng)活動的研究報道甚少。因此,本文利用大動物無創(chuàng)生理遙測技術(shù),通過觀察攝食行為對小型豬心臟自主神經(jīng)功能的影響,探討小型豬攝食行為整個過程中心臟自主神經(jīng)活動規(guī)律及相互關(guān)系。

    1 材料和方法

    1.1 實驗動物

    普通級巴馬小型豬4只,體重25~30 kg,雄性,由上海市南匯區(qū)老港鎮(zhèn)華新特種養(yǎng)殖場提供(SCXK[滬]2007-0013),常規(guī)飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗研究中心(SYXK[浙]2008-0116),環(huán)境溫度為22±3℃,相對濕度為50±20%。飼喂普通營養(yǎng)飼料和自由飲水,12 h/12 h明暗交替。

    1.2 主要儀器

    EMKA大動物無創(chuàng)生理信號遙測系統(tǒng),法國EMKA公司生產(chǎn)。

    1.3 方法

    1.3.1 動物訓(xùn)練

    小型豬適應(yīng)性恢復(fù)飼養(yǎng)2周后,若無異常后則進(jìn)入實驗階段。在正式實驗前,給小型豬進(jìn)行為期3 d的馬甲適應(yīng)性訓(xùn)練,訓(xùn)練方式如下:①第1天上下午給小型豬穿上馬甲適應(yīng)1 h;②第2天穿馬甲適應(yīng)6~8 h;③第3天穿馬甲適應(yīng)24 h。第4天給所有動物剃毛,貼上ECG電極,穿好馬甲后放回籠內(nèi)飼養(yǎng)。

    1.3.2 攝食誘導(dǎo)

    首先觀察小型豬攝食前的心電圖及活動情況,然后于上午8:30給予小型豬250 g的飼料作為攝食誘導(dǎo),觀察小型豬攝食過程(IP)、攝食后此刻(AI)、攝食后2h、4h的心電圖及活動情況,并在下午重復(fù)上述操作方法,于15:30進(jìn)行重復(fù)攝食誘導(dǎo)實驗,實驗操作流程見圖1。

    圖1 小型豬攝食行為觀察Fig.1 Feeding behavior observation in m iniature swine

    1.3.3 數(shù)據(jù)采集及分析

    小型豬Ⅱ?qū)?lián)心電圖和活動信號均連續(xù)記錄于EMKA IOX軟件中,心電圖放大倍數(shù)為500 Hz,活動放大倍數(shù)為100 Hz,并用 EMKA“ECGAuto”V2.6.0.10軟件進(jìn)行自動化分析心電圖和活動指標(biāo)。心率變異性分析時,首先用計算機程序進(jìn)行R波檢測,計算RR間期(RRI),并根據(jù)圖形同步進(jìn)行手工剔除分析異常的 RRI后,進(jìn)行時間排序,并自動HRV分析,時域分析指標(biāo)以 RR間期的標(biāo)準(zhǔn)差(SDNN),相鄰 RR間期差值平方和的均方根(RMSSD)表示;按文獻(xiàn)[9]采用 FFT功率譜分析,獲取總功率(TP)、極低頻功率(VLF)、低頻功率(LF)和高頻功率(HF),并進(jìn)行LOG化,并對LF和HF進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化計算[LFnu或HFnu=LF或HF/(Total power-VLF)],計算LF/HF平衡指數(shù)。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

    2 結(jié)果

    2.1 攝食行為對小型豬RRI和自主活動的影響

    與攝食前(BI)比,小型豬攝食過程(IP)中RRI顯著降低(P<0.01),自主活動明顯增加(P<0.01);與攝食過程(IP)比,小型豬攝食后(AI)RR間期隨著恢復(fù)時間的延長逐漸升高,并在攝食后AI 2 h和4 h時差異顯著(P<0.01),而自主活動隨攝食后恢復(fù)時間的延長而逐漸降低,并在AI、AI 2 h和4h時均差異顯著(P<0.01),見圖2。

    2.2 攝食行為對小型豬心率變異性時域分析指標(biāo)的影響

    圖2 攝食行為對小型豬RRI和自主活動的影響Fig.2 Effect of feeding behavior on RRI and autonom ic activities in miniature swine

    與BI比,小型豬攝食過程(IP)中HR明顯加快(P<0.01),SDNN和RMSSD均有所降低,但差異不顯著(P>0.05);與IP比,小型豬攝食后(AI)HR和RMSSD均有所升高趨勢,其中HR在攝食后AI 2 h和4 h時差異顯著(P<0.01);而SDNN則在攝食后進(jìn)一步降低,直到攝食后 AI 2 h后開始有所恢復(fù),但差異不顯著(P>0.05),見圖3。

    2.3 攝食行為對小型豬HRV頻域分析指標(biāo)的影響

    圖3 攝食行為對小型豬HR、SDNN和RMSSD的影響Fig.3 Effects of feeding behavior on HR,SDNN and RMSSD in miniature swine

    與BI比,小型豬攝食過程(IP)中TP、VLF、HF均有顯著降低(P<0.01),且LFnu和LF/HF均顯著升高(P<0.05);與 IP比,隨著攝食后(AI)恢復(fù)時間的延長,小型豬TP、VLF、HF和LF/HF均有所恢復(fù),并在攝食后AI2 h、4 h時差異顯著(P<0.05,P<0.01),見圖4。

    2.4 小型豬攝食行為活動與心臟自主神經(jīng)功能的相關(guān)性

    圖4 攝食行為對小型豬HRV頻域分析指標(biāo)的影響Fig.4 Effects of feeding behavior on HRV power spectral analysis indexes in miniature swine

    經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示,小型豬攝食行為活動 activity與 LnVLF(r=-0.730,P <0.01)、LnHF(r=-0.518,P<0.01)、LnTP(r=-0.717,P<0.01)、LFnu(r=0.634,P<0.01)、HFnu(r =-0.634,P<0.01)和LF/HF(r=0.653,P<0.01)密切相關(guān);進(jìn)一步采用多元線性逐步回歸分析后得到3個相關(guān)模型,即(1)activity=9.683-0.852LnVLF,R=0.730,P=0.000、(2)activity= 7.041-0.624Ln VLF+0.283LF/HF,R=0.796,P =0.000、(3)activity= 6.677-4.417LnVLF+ 0.419LF/HF+3.804LnTP,R=0.844,P=0.000,以上相關(guān)模型表明小型豬攝食行為與VLF、LF/HF、TP密切相關(guān),且VLF在攝食行為中起主要作用。

    3 討論

    隨著人們生活水平的提高,對生活習(xí)慣性疾病的研究和防治也越來越受到關(guān)注,尤其與攝食行為有關(guān)產(chǎn)生的疾病。流行病學(xué)調(diào)查顯示冠心病、糖尿病、高血壓、腦血管病、動脈粥樣硬化、高脂血癥、肥胖、癌癥,其發(fā)病一般都與攝食行為有關(guān),故對攝食行為的研究具有重要意義。攝食行為是指人類或動物機體為維持個體生存、保障機體各器官的功能以及從事各種活動的能量需要所進(jìn)行的覓食、進(jìn)食、消化、吸收等各種有關(guān)活動。攝食行為除了是一種本能外,還受到高級大腦認(rèn)知活動的控制;且中醫(yī)理論認(rèn)為:“心主神明”,“頭者,精明之府”,即表明心與大腦高級中樞神經(jīng)功能密切相關(guān)。因此,心臟活動與攝食行為可能有著密切的聯(lián)系,故利用大動物無創(chuàng)遙測技術(shù)觀察攝食行為對小型豬心電和活動的影響,并從心臟自主神經(jīng)功能的角度探討與攝食行為的關(guān)系。研究結(jié)果顯示,小型豬在攝食過程中出現(xiàn)心率和自主活動明顯的增加,RRI間期明顯縮短,說明小型豬在攝食過程中出現(xiàn)明顯的心肌興奮現(xiàn)象;另外,隨著攝食后恢復(fù)時間的延長,小型豬心率和自主活動明顯降低,RRI間期明顯延長,表明小型豬攝食后逐漸處于安靜狀態(tài)??梢姡⌒拓i的攝食行為與心臟活動密切相關(guān)。

    攝食作為一種反射性的活動,受各種外界環(huán)境的刺激均可引起胃腸激素的分泌,且激素能作用于傳入神經(jīng)將信號傳遞給神經(jīng)中樞,然后由神經(jīng)中樞信息整合后發(fā)出指令,經(jīng)傳出神經(jīng)到達(dá)效應(yīng)器引起或終止攝食活動,在這個信號傳遞過程中迷走神經(jīng)發(fā)揮了重要作用[10]。而迷走神經(jīng)是腸-腦軸中神經(jīng)解剖的基礎(chǔ),其經(jīng)食物成分接觸胃腸道所引起的進(jìn)食相關(guān)信號傳遞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,介導(dǎo)攝食與消化行為的部位,并對攝食行為進(jìn)行調(diào)節(jié)[11]。已有研究證實交感神經(jīng)系統(tǒng)對增重的病因?qū)W中起著重要的角色且影響采食[12];Bray[12]和 Ravussin[13]的研究均顯示肥胖的產(chǎn)生是由于交感神經(jīng)活動降低所致。本研究結(jié)果亦顯示小型豬在攝食過程中SDNN、RMSSD、TP、VLF、HF均有所降低,LFnu和LF/HF比值均明顯升高,提示攝食行為能引起交感神經(jīng)活動的增強,且在攝食后恢復(fù)過程中交感神經(jīng)活動又逐漸降低,也說明了交感神經(jīng)活動異?;蛎宰呱窠?jīng)活動抑制可能是引起動物采食及體重發(fā)生異常的主要原因之一。

    現(xiàn)代研究證實腦-腸軸中的某些肽類物質(zhì)所激發(fā)產(chǎn)生的信號可控制攝食行為,可分為兩大類:一類是刺激攝食的肽類物質(zhì),包括神經(jīng)肽Y(NPY)、食欲素(Orexin)、Ghrelin等,另一類是抑制攝食的肽類物質(zhì),包括膽囊收縮素(CCK)、酪酪肽(PYY)、瘦素等[10];近來也有發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子亦參與了攝食行為過程,如白細(xì)胞介素-1(IL-1)、腫瘤壞死因子-α (TNF-α)和干擾素-α(IFN-α)等[14]。其中神經(jīng)肽 Y (NPY)通過與Y1或Y5受體結(jié)合并傳出信號,可抑制交感神經(jīng),興奮副交感神經(jīng),具有增加食欲或采食量的作用[15],且本文相關(guān)分析顯示小型豬攝食行為與TP、LFnu、HFnu、LF/HF密切相關(guān),證實了攝食行為與心臟自主神經(jīng)活動密切有關(guān),而NPY所發(fā)生的信號亦可能參與心臟自主神經(jīng)調(diào)控過程,究其明確關(guān)系還有待于進(jìn)一步研究。

    另外,對于VLF生理意義還不十分明確,目前普遍認(rèn)為其來源可能既包括溫度調(diào)節(jié)過程,也包括激素對腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的活動有關(guān)[7],本研究Pearson r相關(guān)和多元線性逐步回歸分析均顯示,VLF不僅可單獨調(diào)控或協(xié)同LF/HF平衡以及TP共同參與調(diào)控小型豬的攝食行為??梢?,VLF的調(diào)控變化在攝食行為過程中起著重要的作用,從而也說明攝食行為的過程可能是體液、神經(jīng)遞質(zhì)、激素等共同參與和釋放的復(fù)雜過程。

    綜上所述,小型豬攝食行為不僅影響心臟活動;而且能引起小型豬心臟自主神經(jīng)控制能力發(fā)生改變,其中VLF在攝食行為過程中占有重要作用,故用HRV頻域分析指標(biāo)可用來評估攝食行為狀態(tài)以及探討與攝食行為有關(guān)的發(fā)生機制。

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