參黃散對腹部術(shù)后小鼠小腸動力障礙的影響

張 琪，魏 星，張 杰，裘華森

參黃散對腹部術(shù)后小鼠小腸動力障礙的影響

張 琪1，魏 星1，張 杰2，裘華森1

目的：探討參黃散對小鼠腹部術(shù)后小腸動力障礙的治療效果。方法：取90只健康雄性ICR小鼠，隨機(jī)分模型組、參黃散組和假手術(shù)組，每組再隨機(jī)分為2、4、6 h組，每組10只。模型組和參黃散組小鼠制備成小腸動力障礙模型，假手術(shù)組僅行剖腹探查術(shù)。造模成功后30 min，治療組予以參黃散敷臍治療，假手術(shù)組和模型組予以等體積量細(xì)沙包敷臍。在2、4、6 h點檢測血清胃動素和生長抑素水平及墨汁推進(jìn)率。結(jié)果：參黃散組在6 h點墨汁推進(jìn)率明顯高于模型組（P＜0.05），血清胃動素和生長抑素水平在2 h和4 h點明顯高于假手術(shù)組和模型組（P＜0.05）。結(jié)論：參黃散敷臍能改善腹部術(shù)后小鼠小腸動力障礙。

參黃散;小鼠;腹部手術(shù);小腸動力障礙;胃腸激素

手術(shù)后小腸動力障礙（intestinal motility disorder，IMD）是腹部手術(shù)后常見但目前尚無法避免的臨床難題。我們采用參黃散敷臍對小鼠腹部術(shù)后IMD進(jìn)行治療，觀察墨汁推進(jìn)率，血清胃動素(motilin,MOT)及生長抑素(somatostatin,SS)含量。

1 材料與方法

1.1 動物 健康SPF級ICR小鼠90只，體質(zhì)量20～25 g，雄性，浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供。合格證編號：SCXK（浙）2009-0002。

1.2 藥物與試劑

1.2.1 參黃散 根據(jù)徐志瑛[1]對術(shù)后小腸功能恢復(fù)治療經(jīng)驗及辨證論治的原則，對術(shù)后早期最為常見的氣滯血瘀型IMD制定，由人參、丹參、大黃、枳實、厚樸、丁香、吳茱萸等藥組成，屬純中藥制劑。由浙江省中醫(yī)院制劑室制作提供。

1.2.2 透皮劑 從復(fù)方參黃散中提取，采用微量胡椒粉輔助。用法用量：使用藥包或細(xì)沙包前，用一次性注射器取3～4滴液體滴入藥包或細(xì)沙包，充分浸透均勻后，帖敷于小鼠腹部。由浙江省中醫(yī)院制劑室制作提供。

1.2.3 MOT試劑盒、SS試劑盒 購自南京建成生物工程研究所。MOT試劑盒生產(chǎn)批號為20091130，SS試劑盒生產(chǎn)批號為20091205。1.3 方法

1.3.1 動物分組 取90只SPF級雄性ICR小鼠，通過隨機(jī)數(shù)字表法，隨機(jī)分為模型組、參黃散治療組和假手術(shù)組，每組30只。各組再隨機(jī)分為2、4、6 h組，每組10只。

1.3.2 動物模型制備[2]術(shù)前24 h各組小鼠禁食，自由飲水，在無菌操作下，取腹部正中切口打開腹腔，將小腸翻向左側(cè)，置于生理鹽水浸濕的紗布上，用生理鹽水浸濕的捋腸器沿小腸的長軸自十二指腸直至回盲部推擠，模擬臨床上常見的全小腸探查操作。假手術(shù)組僅行開腹翻腸不行推擠操作。然后將小腸按順序還納，關(guān)閉腹腔。模型組和治療組小鼠手術(shù)過程均在10 min左右完成，手術(shù)時間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。

1.3.3 藥物敷臍治療 造模成功后30 min，取參黃散藥包，滴上數(shù)滴透皮劑直至藥包濕透，用紙膠環(huán)繞式以臍為中心將其固定于治療組小鼠腹部。假手術(shù)組和模型組用細(xì)沙包代替，余相同。每隔2 h換1次藥包或細(xì)沙包。

1.3.4 墨汁灌胃 各組小鼠到各自治療的時間點后，用灌胃針給予墨汁灌胃（0.5 mL/只）。

1.3.5 觀察指標(biāo)及檢測方法 血清中MOT、SS含量：灌胃后30 min，行摘眼球采血1 mL，置于含30 μL 10%EDTA二鈉的1.5 mL離心管中混勻，4℃下在離心機(jī)中離心15 min（3500 r/min），用微量移液器取血清置于另一1.5 mL離心管中，置于-20℃冰箱保存。用ELISA法測血清中MOT、SS含量。

小腸墨汁推進(jìn)率測定：灌胃后30 min脫頸處死。打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線。測量腸管長度為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長度”。計算墨汁推進(jìn)率[2，3]：墨汁推進(jìn)率(%)=墨汁推進(jìn)長度(cm)/小腸總長度(cm)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)整理后錄入SPSS 16.0，計量資料結(jié)果用樣本均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多個樣本均數(shù)比較采用ONEWAY ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析 (若方差齊性，采用最小顯著差異LSD法。若方差不齊，則采用Tsmhane’s T2法)。P＜0.05表示差異具有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 墨汁推進(jìn)率 模型組墨汁推進(jìn)率在2 h、4 h、6 h時間點明顯低于假手術(shù)組（P＜0.01）。生黃散組2 h、4 h時間點明顯低于假手術(shù)組（P＜0.01，P＜0.05），6 h點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組6 h點明顯高于模型組（P＜0.05），其余時間點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組的墨汁推進(jìn)率隨著時間的延長而增加，2 h與6 h相比差異有顯著性意義（P＜0.01）。見表 1。

表1 各組小鼠術(shù)后30 min墨汁推進(jìn)率的比較(±s，%，n=10)

表1 各組小鼠術(shù)后30 min墨汁推進(jìn)率的比較(±s，%，n=10)

注：與假手術(shù)組比較，aP＜0.05，aaP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.05；治療組2 h與6 h相比，cP＜0.01

2 h 4 h 6 h假手術(shù)組30.63±8.401 32.01±9.784 32.57±10.209模型組19.56±6.219aa 18.66±5.789aa 19.15±8.548aa治療組18.48±7.874aa 22.92±3.588a 28.18±6.400b、c

2.2 血清MOT 血清MOT含量,模型組2 h點明顯低于假手術(shù)組（P＜0.05），其余時間點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組在2 h和4 h點明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05,P＜0.01），6 h點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組在2 h和4 h點明顯高于模型組（P＜0.01,P＜0.05），6 h點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組血清MOT含量隨著時間的延長而降低，2 h與6 h相比差異有顯著性意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 血清SS 血清SS含量,模型組在2 h、4 h、6 h時間點與假手術(shù)組相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組2 h和4 h點明顯高于假手術(shù)組（P＜0.01），6 h點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組在2 h和4 h點明顯高于模型組（P＜0.01,P＜0.05），6 h點兩組間相比無明顯差異（P＞0.05）。治療組的血清SS含量隨著時間的延長而下降，2 h與6 h相比差異有顯著性意義（P＜0.01）。見表3。

表2 各組小鼠手術(shù)后30 min后血清胃動素的比較(pg/mL,±s,n=10)

表2 各組小鼠手術(shù)后30 min后血清胃動素的比較(pg/mL,±s,n=10)

注：與假手術(shù)組比較，aP＜0.05，aaP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.05，bbP＜0.01；治療組2 h與6 h相比，cP＜0.05

2 h 4 h 6 h假手術(shù)組239.50±68.417 83 194.00±53.622 13 267.00±62.872 89模型組156.83±10.303 72a 215.50±55.597 66 206.50±29.797 65治療組325.00±43.464 93a、bb 295.50±89.710 09aa、b 243.50±79.764 03c

表3 各組小鼠手術(shù)后30 min后血清生長抑素的比較(mIU/mL,±s,n=10)

表3 各組小鼠手術(shù)后30 min后血清生長抑素的比較(mIU/mL,±s,n=10)

注：與假手術(shù)組比較，aP＜0.01；與模型組比較，bP＜0.05，bbP＜0.01；治療組2 h與6 h相比，cP＜0.01

2 h 4 h 6 h假手術(shù)組14.535 5±4.231 17 12.394 4±3.019 15 15.768 5±1.945 84模型組10.054 7±0.904 05 14.611 6±3.882 86 15.179 0±1.629 65治療組21.111 0±3.816 53a、bb 19.137 5±6.401 21a、b 14.273 6±2.859 91c

3 討論

手術(shù)后IMD是腹部術(shù)后常見的并發(fā)癥，導(dǎo)致住院時間延長和醫(yī)療費用增加[4]。隨著快速康復(fù)外科的開展，多數(shù)學(xué)者已認(rèn)識到，術(shù)后IMD是影響患者術(shù)后康復(fù)的核心環(huán)節(jié)，早期干預(yù)尤為重要[5]。目前臨床上一般采取禁食、持續(xù)胃腸減壓，鼓勵早期活動等措施[6]，IMD發(fā)生率仍然居高不下。既往試圖通過胃管給藥的辦法，有增加腸道負(fù)擔(dān)之嫌，其安全性和有效性不能確定?？偟膩碚f，目前仍缺乏對術(shù)后胃腸功能恢復(fù)的主動干預(yù)措施。

中醫(yī)藥在術(shù)后IMD的治療方面體現(xiàn)較大優(yōu)勢,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，術(shù)后IMD的病機(jī)主要是手術(shù)祛邪的同時也損傷正氣，克伐后天之本，氣機(jī)不暢血行瘀滯，導(dǎo)致脾胃氣機(jī)失和，腑氣不通。我院徐志瑛教授運用人參、大黃等藥制成參黃散，貼敷于患者臍部，具有調(diào)暢氣機(jī)，標(biāo)本兼治之功效。臨床療效顯著。且通過外治法治療術(shù)后IMD，不僅用藥安全，更具有“簡，廉，易”的優(yōu)勢。如能明確其作用具體機(jī)制，則可更合理科學(xué)發(fā)揮其優(yōu)勢，推廣其臨床應(yīng)用。

墨汁推進(jìn)率是反映小鼠腸蠕動功能的一個最客觀最直接的指標(biāo)。本研究顯示，治療組有隨時間延長墨汁推進(jìn)率增加的趨勢，6 h點明顯高于模型組，提示參黃散敷臍治療確能促進(jìn)小鼠術(shù)后小腸動力的恢復(fù)。胃腸激素MOT和生長抑素SS與術(shù)后IMD的發(fā)生有一定的關(guān)系。近年來研究表明，其含量改變會引起術(shù)后IMD患者的小腸動力改變[7-9]。本研究顯示，治療組血清中MOT和SS在2 h和4 h點明顯高于模型組和假手術(shù)組，提示參黃散能在較短時間內(nèi)提高后小鼠血清中MOT和SS含量，從而刺激腸道蠕動。后期6 h點兩組間無明顯差異，提示隨著時間的延長，IMD逐漸恢復(fù)，體內(nèi)自身的調(diào)節(jié)機(jī)制使血清中MOT和SS慢慢下降，最終趨于達(dá)到一個正常的水平。因此，我們推測，胃腸激素是參黃散促進(jìn)術(shù)后腸蠕動的主要機(jī)制之一。

參黃散作為名老中醫(yī)經(jīng)驗方，療效可靠，在外科術(shù)后胃腸道早期促康復(fù)治療方面頗具前景。但其作用機(jī)制并不明確，極有可能是多途徑的，除了胃腸激素之外，還有可能和炎癥介質(zhì)及某些蛋白質(zhì)、基因的表達(dá)有關(guān)，值得進(jìn)一步研究。

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Effect of Shenhuang Powder on Intestinal Motility Disorder in Mice after Abdominal Surgery

ZHANG Qi,WEI Xing,ZHANG Jie,et al.The First Affiliated Hospital of Zhejiang Traditional Chinese Medicine Univer?sity,Hangzhou(310006)，China

ObjectiveTo investigate the effect of Shenhuang Powder on intestinal motility disorder after ab?dominal surgery in mice.MethodsNinety healthy male ICR rats were randomly divided into the model group,Shenhuang powder group and the sham operation group.The model group and Shenhuang powder group were pre?pared into the intestinal motility disorder models.In the sham operation group only exploratory laparotomy was applied.The above-mentioned groups were then randomly divided into 2 h、4 h and 6 h groups.Thirty minutes after the model was successfully established,in the Shenhuang powder group Shenhuang powder oblatum was ap?plied on bellybutton while equal volume of fine sandbag were used in the sham operation group and the model group.At the end of 2 h、4 h and 6 h after treatment，the serum levels of motilin and somatostatin and car?bon-ink transit rate were detected.ResultsThe carbon-ink transit rate in Shenhuang powder group was sig?nificantly higher than that in model group at 6 hours after operation.The serum levels of motilin and somatosta?tin were significantly higher than those in sham operation group and model control group at 2 and 4 hours after operation（P＜0.05）.ConclusionShenhuang powder can promote the recuperation of enterokinesia in mice after abdominal surgery.

Shenhuang Powder；Mice；Abdominal surgery；Intestinal motility disorder；Gastrointestinal hor?mones

R285.5；R656.7

A

1007-6948(2012)03-0255-03

10.3969/j.issn.1007-6948.2012.03.011

“十一五”國家科技支撐計劃重點項目(2008BAI53B02)

1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸外科（杭州 310006）

2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院泌尿外科（杭州 310012）

裘華森，E-mail：qhs86@163.com

（收稿：2011-10-20 修回：2012-04-10）

（責(zé)任編輯 劉洪斌）

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