原子吸收光譜法測定血清鋅、銅、鐵、鈣、鎂

王景平 天津市東麗區(qū)萬新街社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 300163

鋅、銅、鐵、鈣和鎂5種微量元素都是人體必需的，缺鋅（Zn）導(dǎo)致發(fā)育不良，缺鐵（Fe）導(dǎo)致貧血、免疫力低下，缺銅（Cu）元素會導(dǎo)致不育、早產(chǎn)、心血管疾病，缺鈣（Ca）會誘發(fā)軟骨病、痙攣、畸形、骨質(zhì)疏松，鎂（Mg）元素是構(gòu)成骨骼牙齒的主要成分，還可以調(diào)節(jié)神經(jīng)和肌肉的活動，維持體內(nèi)的酸堿平衡，以及激活體內(nèi)多種酶，人體缺鎂會震顫，手足顫動，隨著科技進(jìn)步更多的人體微量元素研究問世，同時也對人體的健康有著積極地指導(dǎo)意義［1］。筆者采用原子吸收光譜法測定血清中以上5種元素含量，并得出參考值范圍。

1 材料和方法

1.1 儀器、試劑

1.1.1 儀器。GGX－9A型原子吸收分光光度計（北京地質(zhì)儀器廠）；80－1型離心機(jī)（天津華北實驗儀器有限公司）；WKY型微量移液管（上海求精生化試劑儀器有限公司）。

1.1.2 試劑及其配制。Zn、Cu、Fe標(biāo)準(zhǔn)儲備液100mg／L（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心），用時稀釋至10mg／L備用。Ca、Mg標(biāo)準(zhǔn)儲備液1 000mg／L（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心），用時稀釋至100mg／L備用。曲拉通（德國默克試劑集團(tuán)）；硝酸（天津試劑五廠，AR）；鹽酸（天津試劑五廠，AR）；氯化鈉（天津試劑五廠，AR）；氧化鑭（天津試劑五廠，AR）；曲拉通與硝酸混合液：取曲拉通141ml，加硝酸30ml用二次蒸餾水定容至3L，用時稀釋10倍后備用。鑭鹽與氯化鈉混合液：取氧化鑭287g加100ml二次蒸餾水、436ml鹽酸、30g氯化鈉最后定容至3L，用時稀釋4倍后備用。實驗用水為二次蒸餾水。

1.2 實驗步驟

1.2.1 樣品的預(yù)處理。取事先存放在冰箱保存的全血樣品，上離心機(jī)離心2min，然后用微量取樣器分取500μl血清于5ml已經(jīng)烘干干凈小塑料管中，加入2ml稀釋后的曲拉通與硝酸的混合液，搖勻備用，此試樣用于血清中Zn、Cu、Fe的測定。再分取100μl血清于5ml已經(jīng)烘干干凈小塑料管中，加入2.0ml稀釋后的鑭鹽與氯化鈉的混合液，搖勻備用，此試樣用于Ca、Mg血清中的測定。

1.2.2 校準(zhǔn)曲線的繪制。取Zn、Cu、Fe標(biāo)準(zhǔn)使用液10mg／L，（此使用液三種元素可以配在一起），分別吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于100ml容量瓶中，用稀釋后的曲拉通和硝酸混合液稀釋至刻度，此標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線分別為0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mg／L，搖 勻 備 用。取 Ca 標(biāo) 準(zhǔn) 使 用 液100mg／L，分別吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于100ml容量瓶中，用稀釋后的鑭鹽和氯化鈉的混合液稀釋至刻度，此標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mg／L，和 Ca的標(biāo)準(zhǔn)曲線配制一樣，配成 Mg的校準(zhǔn)曲線為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg／L，搖勻備用。

2 結(jié)果

按上述選定的工作條件參數(shù)見表1。

校準(zhǔn)曲線的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2，對試樣進(jìn)行平行6次的測定，精密度結(jié)果見表3，加標(biāo)回收率見表4。

表2 校準(zhǔn)曲線的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)

表3 精密度測試結(jié)果

3 討論

3.1 本法采用混合試劑直接稀釋樣品，不用消解直接上機(jī)測定，避免了待測元素的損失，實驗證明此法方便快速，重現(xiàn)性好，靈敏度高，極其適合大批樣品的測定，測定結(jié)果在校準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。

表4 加標(biāo)回收率測試結(jié)果（mg／L）

3.2 由表3看出，人體血清中鈣元素的含量較高，相當(dāng)于鎂元素的5倍，其余3種元素相對比較接近，筆者檢測100份正常健康體檢者血清樣本，按照檢測平均值±2倍標(biāo)準(zhǔn)差作為參考值范圍，則Cu：0.90～2.00mg／L，Zn：0.90～2.00mg／L，F(xiàn)e：0.90～3.00mg／L，Ca：95.0～115.0mg／L，Mg：21.0～25.0mg／L。其中注意如果血清溶血則鐵元素含量大于3.00mg／L，這時候測定的鐵元素的數(shù)值不準(zhǔn)確，需取樣品重新測定。

3.3 實驗結(jié)果表明此5種元素的回收率很好，說明該方法的可靠性好，準(zhǔn)確度高，簡單、快速易于掌握。

［1］單云.原子吸收法同時測定大豆及其乳制品中Zn、Cu、Fe、Ca、Mg〔J〕.光譜實驗室，1998，15（2）：94－95.