多刺綠絨蒿的化學(xué)成分*

吳海妹，袁瑞瑛，小尼瑪頓珠，馮 鋒**

1中國藥科大學(xué)天然藥化教研室，南京 210009；2西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院，拉薩 850000

多刺綠絨蒿Meconopsis horridula Hook.f.et Thoms為罌粟科綠絨蒿屬植物，一年生草本植物，高約15～20 cm，全株包被黃褐色或淡黃色堅硬而平展的刺[1]，生于海拔4100～5400米的山坡石縫中，主要分布于西藏、云南、四川、青海和甘肅，緬甸、印度東北部、不丹、錫金和尼泊爾也有分布。多刺綠絨蒿在藏藥中屬于“刺兒恩類”，《晶珠本草》記載：“刺兒恩味苦，功效清蒸熱，為治頭創(chuàng)傷最有療效之藥”。藏醫(yī)認為其具有接骨、活血化瘀、止痛的作用，多用于治療頭傷、骨折、跌打損傷等癥。藏醫(yī)藥典籍《四部醫(yī)典》和《晶珠本草》對其都有詳細的記載，且沿用至今[2]。但國內(nèi)對其化學(xué)成分的研究報道尚少，作者對多刺綠絨蒿的化學(xué)成分進行了研究，從中分離得到了13個化合物，大多為黃酮類。

1 儀器與材料

Bruker AV-300核磁共振儀 （TMS為內(nèi)標(biāo)）；LC-MSD-Trap-SL質(zhì)譜儀；Sephadex LH-20（Pharmacia公司生產(chǎn)）；ODS為Merck C-18型；薄層硅膠GF254（青島海洋化工廠生產(chǎn)）；D101型大孔樹脂；所用試劑均為分析純。

多刺綠絨蒿，由西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院卓瑪東智鑒定為多刺綠絨蒿M.horridula全草。

2 提取與分離

多刺綠絨蒿干燥全草3.8 kg，用95%乙醇冷浸提取3次，每次7天，溶劑用量為8倍。合并提取液濃縮得浸膏約500 g。浸膏與D101大孔樹脂拌樣后上處理好的D101大孔樹脂柱，以水-20%、40%、60%、80%、95%乙醇依次洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流份，主要針對40%和60%乙醇洗脫的A、B、C、D、E五個部位進行分離。A部位 （7 g）經(jīng)多次的Sephadex LH-20柱分離，得化合物1（15 mg），化合物2（180 mg），化合物3（12 mg）；B部位（1 g）經(jīng)反相處理后經(jīng)Sephadex LH-20柱分離得化合物4（10 mg），化合物5（10 mg）；C部位經(jīng)反相和Sephadex LH-20柱分離得化合物6（6 mg），化合物7（6 mg）；D部位（3.9 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱分離得化合物8（13 mg），化合物9（550 mg），化合物10（14 mg）；E部位（3.2 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱分離得化合物11（32 mg），化合物12（25 mg），化合物13（20 mg）。各化合物結(jié)構(gòu)見圖1。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物8～11的數(shù)據(jù)與文獻對照基本一致，分別鑒定為5，7，4′-三羥基-3′，5′-二甲氧基黃酮，即小麥黃素（8，tricin）[3]；5，7，3′，4′-四羥基黃酮，即木犀草素 （9，luteolin）[4]；3，5，7，3′，4′-五羥基黃酮，即槲皮素（10，quercetin）[5]；5，7，4′-三羥基黃酮，即芹菜素（11，apigenin）[6]。

圖1 各化合物的結(jié)構(gòu)式

化合物1 黃色針狀晶體。ESI-MS m/z 447 [M-H]-，285[M-H-Glc]-。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：13.00（1H，s，5-OH），10.02（1H，br s，4′-OH），9.48（1H，br s，3′-OH），7.45（1H，d，J=8.2 Hz，H-6′），7.43（1H，s，H-2′），6.91（1H，d，J=8.2 Hz，H-5′），6.79（1H，s，H-8），6.77（1H，s，H-3），6.44（1H，s，H-6），5.10（1H，d，J=6.8 Hz，H-1′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[7]報道的基本一致，故鑒定該化合物為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物2 淡黃色膨松狀顆粒。ESI-MS m/z 609[M-H]-，447[M-H-Glc]-，285[M-H-2×Glc]-。1HNMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：12.68（1H，s，5-OH），10.87（1H，br s，7-OH），10.20（1H，br s，4′-OH），8.06（2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，H-6′），6.92（2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，H-5′），6.43（1H，s，H-8），6.20（1H，s，H-6），5.47（1H，d，J=7.3 Hz，H-1′′），4.60（1H，d，J=7.5 Hz，H-1′′′）；13C-NMR（DMSO-d6，75 MHz）δ：156.3（C-2），132.8（C-3），177.5（C-4），161.2（C-5），98.6（C-6）, 164.0（C-7），93.6（C-8），156.3（C-9），103.9（C-10），120.9（C-1′），130.9（C-2′，C-6′），159.9（C-4′），115.2（C-3′，C-5′），97.9（C-1′′），82.4（C-2′′），76.5（C-3′′），69.5（C-4′′），77.0（C-5′′），60.5（C-6′′），104.1（C-1′′′），74.4（C-2′′′），76.6（C-3′′′），69.7（C-4′′′），77.5（C-5′′），60.8（C-6′′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[8-9]報道的基本一致，故鑒定該化合物為山奈酚-3-O-[β-D-葡萄糖（1→2）]-β-D-葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl（1→2）-β-D-glucopyranoside）。

化合物3 黃色針狀晶體。ESI-MS m/z 625 [M-H]-，463[M-H-Glc]-，301[M-H-Gal-Glc]-。1HNMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：12.69（1H，s，5-OH），10.86（1H，br s，7-OH），9.72（1H，br s，4′-OH），9.22（1H，br s，3′-OH），7.61（1H，dd，J=8.4 Hz，2.0 Hz，H-6′），7.56（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.87（1H，d，J= 8.4 Hz，H-5′），6.40（1H，d，J=1.7 Hz，H-8），6.19（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），5.69（1H，d，J=6.8 Hz，H-1′′），4.60（1H，d，J=7.5 Hz，H-1′′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道的基本一致，故鑒定該化合物為槲皮素-3-O-[β-D-半乳糖（1→6）]-β-D-葡萄糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranosyl（1→6）-β-D-glucopyranoside）。

化合物4 黃色針狀晶體。ESI-MS m/z 491 [M-H]-，476[M-H-CH3]-，461[M-H-2×CH3]-，329[MH-Glc]-。1H-NMR （DMSO-d6，300 MHz）δ：12.95（1H，s，5-OH），9.40（1H，br s，4′-OH），7.37（2H，s，H-2′，H-6′），7.08（1H，s，H-3），6.94（1H，d，J=1.9 Hz，H-8），6.46（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），5.05（1H，d，J=7.4 Hz，H-1′′），3.89（6H，s，-OCH3×2）。以上數(shù)據(jù)與文獻[10]報道的基本一致，故鑒定該化合物為小麥黃素-7-O-β-D-葡萄糖苷 （tricin-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物5 淡黃色晶體。ESI-MS m/z 447[MH]-，285[M-H-Glc]-。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：12.63 （1H，s，5-OH），10.85 （1H，br s，7-OH），10.20（1H，br s，4′-OH），8.04（2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，H-6′），6.89（2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，H-5′），6.43（1H，d，J=1.9 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），5.45（1H，d，J=7.0 Hz，H-1′′）;13C-NMR（DMSO-d6，75 MHz）δ：156.5（C-2），133.4（C-3），177.6（C-4），161.4（C-5），98.9（C-6），164.4（C-7），93.9（C-8），156.6（C-9），104.2（C-10），121.1（C-1′），131.1（C-2′，C-6′），160.1（C-4′），115.3（C-3′，C-5′），101.0（C-1′′），74.4（C-2′′），76.6（C-3′′），70.0（C-4′′），77.6（C-5′），61.0（C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[5]報道的基本一致，故鑒定該化合物為山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物6 白色晶體。ESI-MS m/z 148[M+H]+。1H-NMR （CDCl3，300 MHz）δ：7.74（1H，d，J=15.7 Hz，H-3），6.64（1H，d，J=15.7 Hz，H-2），7.40（5H，in total，m）。以上數(shù)據(jù)與文獻[11]報道的基本一致，故鑒定該化合物為桂皮酰胺（cinnamamide）。

化合物7 白色晶體。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：9.83（1H，s，7-OH），9.17（1H，s，6′-OH），8.00（1H，t，J=5.1 Hz，=NH），7.38（2H，d，J=8.4 Hz，H-5，H-9），7.31（1H，d，J=15.7 Hz，H-3），7.01（2H，d，J= 8.2 Hz，H-4′，H-8′），6.78（2H，d，J=8.4 Hz，H-6，H-8），6.68（2H，d，J=8.2 Hz，H-5′，H-7′），6.39（1H，d，J=15.7 Hz，H-2），3.39（2H，t，J=7.5 Hz，H-1′），2.63（2H，t，J=7.5 Hz，H-2′）。以上數(shù)據(jù)與文獻[12]報道的基本一致，故鑒定該化合物為對羥基桂皮酰胺對羥基苯乙胺（N-p-hydroxyl-trans-coumaroyltyramine）。

化合物12 黃色粉末。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：12.95（1H，s，5-OH），10.83（1H，br s，7-OH），9.98（1H，br s，3-OH），7.57（2H，br d，H-2′，H-6′），6.94（2H，br d，H-3′，H-5′），6.50（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），3.89（3H，s，-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]報道的基本一致，故鑒定該化合物為3，5，7-三羥基-4′-甲氧基黃酮，即山奈酚-4′-甲醚（kaempferide）。

化合物13 亮黃色晶體。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：12.52（1H，s，5-OH），10.80（1H，s，7-OH），10.12（1H，s，3-OH），9.42（1H，s，4′-OH），8.04（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，H-6′），6.92（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，H-5′），6.44（1H，s，H-8），6.19（1H，s，H-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻[5]報道的基本一致，故鑒定該化合物為3，5，7，4′-四羥基黃酮，即山奈酚（kaempferol）。

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