種公羊白色念珠菌的分離與鑒定

柳旭偉

（新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物科技學(xué)院，新疆 昌吉831100）

白色念珠菌（Candida albicans）又稱白假絲酵母，是一種條件致病菌，廣泛存在于自然界，在蔬菜、水果和土壤中均可檢出，也可存在于健康人的皮膚、陰道、口腔和消化道等部位，在人體免疫力下降時，就易引起白色念珠菌感染。外生殖器念珠菌感染包括念珠菌外陰陰道炎和念珠菌龜頭炎，在人的方面報道較多，但在動物方面卻報道較少。最近我們從奎屯市某養(yǎng)殖場患有龜頭炎的種公羊病料中分離到1株白色念珠菌，初步結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 病料來源 奎屯市生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)129團(tuán)某養(yǎng)殖場患有龜頭炎的種公羊，其癥狀為陰莖包皮及龜頭出現(xiàn)彌散性潮紅，干燥光滑，包皮內(nèi)側(cè)及冠狀溝處附有白色奶酪樣斑片。

1.2 方法

1.2.1 涂片鏡檢 取病料少許涂于滴有10%KOH溶液的載玻片上，自然干燥，火焰固定，革蘭染色鏡檢。

1.2.2 分離培養(yǎng) 將病料接種于沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）平板，37℃培養(yǎng)48～72h。

1.2.3 鑒定培養(yǎng)

1.2.3.1 厚膜孢子試驗［1］將含有吐溫－80的玉米粉瓊脂培養(yǎng)基融化后，倒在無菌載玻片上，凝固后接種上述分離培養(yǎng)物。將玻片置于無菌平皿中，并加濕棉球防止水分蒸發(fā)，25℃培養(yǎng)48h。

1.2.3.2 芽管試驗［1］培養(yǎng)物接種于1mL無菌健康綿羊血清中，37℃培養(yǎng)2h。

1.2.3.3 生化試驗 將培養(yǎng)物接種于葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖、菊糖、甘露醇、山梨醇等生化鑒定培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24～72h。

1.2.4 致病性試驗［2］將10只健康小鼠隨機(jī)分成2組，每組5只。將收獲的菌體用生理鹽水以1∶10制成菌懸液。試驗組小鼠腹腔注射菌懸液0.1mL／只，對照組腹腔注射生理鹽水0.1mL／只。

2 結(jié)果

2.1 涂片鏡檢 可見革蘭陽性卵圓形芽孢以及假菌絲。

2.2 分離培養(yǎng) 沙氏葡萄糖瓊脂平板上可見有多量圓形、凸起、光滑、濕潤奶酪樣乳白色菌落。

2.3 鑒定培養(yǎng)（1）厚膜孢子試驗：分離菌經(jīng)吐溫－80玉米粉瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)后，鏡下觀察可見很多頂端、圓形孢子。（2）芽管試驗：可見有芽管形成。（3）生化試驗：分離菌對葡萄糖及麥芽糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，對蔗糖產(chǎn)酸，不發(fā)酵乳糖，其他生化培養(yǎng)基均呈陰性反應(yīng)。

2.4 致病性試驗 試驗組小鼠接種后陸續(xù)出現(xiàn)精神沉郁，飲食欲減退，4～7d內(nèi)全部死亡。對照組小鼠全部存活。剖檢死亡小鼠可見各個臟器都有感染，其中肝和腎最為明顯，可見腫脹、壞死以及小膿灶。取病灶涂片、染色鏡檢，可見與分離菌一致的孢子和假菌絲。重新分離可得到與分離菌特性一致的真菌。

3 小結(jié)與討論

3.1 根據(jù)臨床癥狀、直接鏡檢、病原菌的培養(yǎng)特性、厚膜孢子試驗、芽管試驗、生化試驗以及致病性試驗結(jié)果，初步確定該病原菌為白色念珠菌。

3.2 生殖器念珠菌病是由白色念珠菌在一定條件下所致生殖器炎癥性疾病。主要有念珠菌外陰陰道炎及念珠菌包皮龜頭炎。生殖器念珠菌病在人醫(yī)方面報道較多，在動物方面卻報道極少而沒有引起足夠的重視。生殖器型念珠菌病屬于念珠菌的淺部感染，如果不及時治療將引起繼發(fā)性感染，而造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

3.3 念珠菌病乃人獸共患病，我們獸醫(yī)工作者在診治的過程中一定要做好自身的防護(hù)工作。當(dāng)然，念珠菌是自然界中廣泛存在的一大類真菌，只要我們認(rèn)真做好防護(hù)工作，就可以免除感染，防范于未然。

［1］楊正時，房海.人及動物病原細(xì)菌學(xué)［M］.石家莊：河北科學(xué)技術(shù)出版社，2003.

［2］孫金福，張中華.鷓鴣念珠菌病的病原分離與鑒定［J］.畜牧與獸醫(yī)，2004，36（4）：29－30.