中藥注射液治療腦缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

孫能強(qiáng)，徐 侃（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院神經(jīng)外科，上海 200062）

中藥注射液治療腦缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

孫能強(qiáng)＊，徐 侃#（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院神經(jīng)外科，上海 200062）

目的：推動(dòng)中藥注射液在腦缺血再灌注損傷中的應(yīng)用。方法：查閱近5年相關(guān)文獻(xiàn)，進(jìn)行整理、分析、歸納，對(duì)中藥注射液治療腦缺血再灌注損傷的最新藥理實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)和介紹。結(jié)果：中藥注射液可通過多種機(jī)制對(duì)腦缺血再灌注損傷產(chǎn)生明顯的腦保護(hù)作用。結(jié)論：中藥注射液在治療腦缺血再灌注損傷方面具有廣泛的藥理作用基礎(chǔ)，進(jìn)一步開發(fā)與應(yīng)用的前景廣闊。

中藥注射液；腦缺血再灌注損傷；藥理研究

＊碩士研究生。研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療腦缺血再灌注損傷。電話：021-62572723-9422。E-mail：sunnengqiang123@163.com

#通訊作者：主任醫(yī)師。研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療腦缺血再灌注損傷。電話：021-62572723-9425。E-mail：diansi9@yahoo.cn

腦缺血后由于再灌注帶來繼發(fā)性損傷，且腦組織血液灌注的再損傷不可避免，如何減少腦缺血再灌注損傷對(duì)缺血性中風(fēng)的預(yù)后和治療有著重要影響。因此，尋找有效的藥物治療腦缺血再灌注損傷已成為國內(nèi)、外的研究熱點(diǎn)。從20世紀(jì)60年代開始，國內(nèi)藥企大膽試驗(yàn)，對(duì)中藥傳統(tǒng)制劑進(jìn)行劑型改革，先后研制了多種中藥注射液，一定程度上解決了中藥治療腦缺血再灌注損傷時(shí)存在的吸收差、見效慢的缺陷，并取得較好的臨床治療效果。本文僅就中藥注射液治療腦缺血再灌注損傷近5年來藥理實(shí)驗(yàn)研究作一綜述。

1 清開靈注射液

清開靈注射液是由古方安宮牛黃丸改良而來，主要成分為膽酸、珍珠母、豬去氧膽酸、梔子、水牛角、板藍(lán)根、黃芩苷、金銀花。其具有清熱解毒、化痰通絡(luò)、醒神開竅等功效，用于治療熱病、神昏、中風(fēng)偏癱、神志不清以及急性肝炎、上呼吸道感染、肺炎、腦血栓形成、腦出血見上述癥候者[1]。清開靈注射液具有改善腦水腫、減少細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載、減少自由基損傷、減輕興奮性氨基酸毒性、抑制炎癥因子損害、抑制細(xì)胞凋亡等作用。高永紅等[2]利用體外培養(yǎng)大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞，氧糖剝奪法模擬缺血再灌注損傷，MTT比色法測(cè)定細(xì)胞生存活性變化，并結(jié)合硝酸酶還原法測(cè)定細(xì)胞上清液中NO含量。結(jié)果顯示，清開靈注射液有效組分通過提高細(xì)胞生存活性、減少NO分泌而保護(hù)體外缺血再灌注損傷的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞。謝利軍等[3]采用線栓法復(fù)制大鼠持久性大腦中動(dòng)脈栓塞12、24 h的局灶性腦缺血模型，用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)腦組織勻漿轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β和熱休克蛋白（HSP）-70含量。結(jié)果顯示，清開靈注射液有效組分對(duì)大鼠局灶性腦缺血具有神經(jīng)元保護(hù)作用，其作用機(jī)制之一可能是上調(diào)TGF-β和HSP-70的表達(dá)。此外，實(shí)驗(yàn)研究證明，清開靈注射液對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化具有促進(jìn)作用，對(duì)受損神經(jīng)元有保護(hù)作用[4]，而且可在細(xì)胞黏附的不同階段、在缺血損傷的不同時(shí)間抑制細(xì)胞黏附，從而阻抑黏附因子的表達(dá)，減輕腦缺血后炎癥反應(yīng)[5]。

2 燈盞花素注射液

燈盞花素注射液是從菊科植物燈盞細(xì)辛的干燥全草中提取的滅菌水溶液，有效成分為燈盞細(xì)辛黃酮與燈盞細(xì)辛素的混合物。藥理研究證實(shí)，燈盞花素注射液具有明顯的血管擴(kuò)張作用，并能抑制血小板、紅細(xì)胞聚集，促進(jìn)纖溶酶活性，具有良好的溶栓、防栓作用和清除自由基、對(duì)抗脂質(zhì)過度氧化作用。臨床上常用于腦梗死、冠心病、心絞痛等心腦血管疾病的治療。朱麗娜等[6]研究顯示，燈盞花素注射液可使腦缺血再灌注小鼠腦組織中抗氧化酶活性增高、丙二醛（MDA）含量降低、腦皮質(zhì)血流升高，說明燈盞花素注射液能增加腦缺血再灌注小鼠抗氧化酶的活性，改善腦血流，減輕血腦屏障的損傷，對(duì)腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。在體內(nèi)腦缺血再灌注小鼠模型中，燈盞花素注射液可劑量依賴性減少缺血小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的死亡，降低一氧化氮合成酶（NOS）活性，并抑制DNA片段化的產(chǎn)生以及與X染色體相關(guān)的凋亡蛋白抑制劑（X-chromosome linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）mRNA表達(dá)的下調(diào)[7]。

3 參芎注射液

參芎注射液是國內(nèi)第1個(gè)含丹參素與川芎嗪單體的小輸液劑型。有研究發(fā)現(xiàn)，參芎注射液有良好的抗氧化與抗凋亡作用[8，9]。參芎注射液的有效成分能清除黃嘌呤-黃嘌呤氧化物體系產(chǎn)生的超氧陰離子，并能提高血清超氧化物岐化酶（SOD）的活性，還能清除線粒體脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)生的脂質(zhì)自由基，從而具有良好的抗氧化作用[10]。另有研究[11]表明，參芎注射液能夠抑制大鼠腦組織核轉(zhuǎn)錄因子（NF）-κB的激活，下調(diào)腫瘤壞死因子（TNF）-α和細(xì)胞間黏附分子（ICAM）-1的表達(dá)，從而減輕腦缺血再灌注后的炎癥反應(yīng)。相關(guān)報(bào)道[12]顯示，參芎注射液還有抗血小板、改善微循環(huán)、阻止鈣超載等作用。因此，筆者推測(cè)參芎注射液可能作用于腦缺血再灌注后損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)的多個(gè)環(huán)節(jié)，從而減輕其病理損害。

4 銀杏葉提取物注射液

銀杏葉提取物注射液能降血脂、擴(kuò)張血管、促進(jìn)血液循環(huán)、增加腦血流量、降低腦血管阻力和心肌耗氧量，有效防治冠心病、心絞痛、高血壓等心腦血管疾病。目前應(yīng)用銀杏葉提取物的制劑主要含有銀杏內(nèi)酯和銀杏黃酮類。洪森榮等[13]研究表明，銀杏葉提取物注射液能劑量依賴性減少缺血小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的死亡，提高SOD活性，降低MDA水平，并抑制XIAPmRNA表達(dá)的下調(diào)。說明銀杏葉提取物注射液可通過抗氧化作用抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡，從而減輕缺血再灌注引起的腦損傷。銀杏葉提取物之一銀杏內(nèi)酯B對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠具有保護(hù)作用，這一作用與銀杏內(nèi)酯B可減少大鼠腦缺血再灌注后腦組織中NO含量、抗自由基損傷、改善能量代謝、升高過氧化氫酶活力有關(guān)[14，15]。另外，銀杏酮酯（GBE50）可降低高脂大腦中動(dòng)脈閉塞（MCAO）缺血模型大鼠的腦梗死體積，改善神經(jīng)行為障礙和血液流變學(xué)，對(duì)高脂大鼠腦缺血損傷可產(chǎn)生保護(hù)作用[16]。

5 三七總皂苷注射液

三七總皂苷注射液具有益氣活血、化瘀通絡(luò)的功效，它能夠顯著降低纖維蛋白原及全血黏度和血漿黏度，抑制血小板聚集，從而加快血流速度，改善微循環(huán)；擴(kuò)張腦血管，增加腦血流量；降低血脂和血液黏稠度；清除自由基；抑制細(xì)胞Ca2+超載，緩解腦水腫；并具有抗血栓及抗凝的作用。徐旭等[17]利用FeCl3導(dǎo)致的大鼠腦缺血模型研究發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷注射液能夠明顯改善腦缺血引起的大鼠行為障礙，減少腦梗死范圍。Bcl-2蛋白既能阻抑壞死，又能阻抑凋亡；Bax蛋白的生物學(xué)作用是拮抗Bcl-2蛋白。周小寶等[18]觀察三七總皂苷注射液對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織皮質(zhì)和海馬區(qū)Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)和細(xì)胞凋亡變化，發(fā)現(xiàn)三七總皂苷可使Bcl-2表達(dá)增高、Bax表達(dá)降低、細(xì)胞凋亡率降低。這一結(jié)論顯示三七總皂苷注射液可抑制大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡，對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷有一定保護(hù)作用。

6 黃芪注射液

黃芪注射液具有抗氧化、抗自由基損傷、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、增加腦微血管通透性、改善腦部血液供應(yīng)、增加腦血流量、增強(qiáng)紅細(xì)胞變形能力、抑制細(xì)胞凋亡、對(duì)抗腦缺血及其再灌注后興奮性氨基酸的升高等作用。鄭敏等[19]的實(shí)驗(yàn)提示，7.5～150mg·m L－1濃度的黃芪提取液對(duì)脂質(zhì)自由基有清除作用，0.563～11.300mg·m L－1濃度的黃芪提取液對(duì)超氧陰離子自由基有清除作用，且清除自由基能力隨濃度增高而增強(qiáng)。但在低濃度情況下，黃芪注射液對(duì)超氧陰離子和脂質(zhì)自由基具有一定的增強(qiáng)效應(yīng)。另有報(bào)道，黃芪注射液可改善腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能障礙，降低外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞含量，減輕缺血腦組織的腦水腫和腦梗死面積[20]，增快局部腦皮質(zhì)血流速度[21]，從而發(fā)揮腦保護(hù)作用。

7 其他

參麥注射液具有改善血管內(nèi)皮功能、調(diào)節(jié)血清中NO含量、抑制炎癥過程中細(xì)胞因子表達(dá)等作用[22，23]。冰片注射液可以抑制大鼠腦缺血再灌注損傷時(shí)炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)，減少白細(xì)胞的浸潤，降低腦缺血再灌注損傷的程度[24]。參附注射液可通過減輕局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障通透性升高程度，減輕神經(jīng)功能受損程度，以發(fā)揮腦保護(hù)作用[25]。葛根素注射液有減輕鈣超載、抑制細(xì)胞凋亡、改善微循環(huán)、促進(jìn)血流恢復(fù)、抑制血小板聚集等作用，被廣泛應(yīng)用于腦血管疾病的治療[26，27]。

8 討論

腦缺血再灌注損傷的治療中，化學(xué)藥注射液具有起效快、治療針對(duì)性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，能夠迅速抑制病癥發(fā)展，但多數(shù)化學(xué)藥存在副作用大，易對(duì)患者肝、腎功能造成損傷，抗藥性大的缺陷。現(xiàn)代中藥對(duì)缺血性腦中風(fēng)的治療具有長效性、安全性高、較少產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)勢(shì)，但缺點(diǎn)是有效成分含量不穩(wěn)定、服用劑量大。為了解決這一難題，我國提出了中藥的二次研發(fā)計(jì)劃，挑選療效確切、前景好的傳統(tǒng)中藥，在提高療效的前提下，應(yīng)用現(xiàn)代生產(chǎn)工藝精提精制而成中藥注射液。因其組分多、作用靶點(diǎn)多，故能夠發(fā)揮多重作用；而且作為注射液，其起效速度也快，在腦缺血再灌注損傷的治療方面療效確切，完全可以與化學(xué)藥相媲美。目前市場上的清開靈注射液、參芎注射液等都是我國二次研發(fā)的成果。隨著中藥的現(xiàn)代化、規(guī)范化進(jìn)程不斷推進(jìn)，中藥注射液在腦缺血再灌注損傷領(lǐng)域的研究也將進(jìn)一步深入，這將推動(dòng)中藥在這一領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：1 110.

[2] 高永紅，袁拯忠，牛福玲，等.清開靈有效組分對(duì)體外缺血再灌注損傷大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[J].遼寧中醫(yī)雜志，2008，35（7）：1 104.

[3] 謝利軍，李澎濤，徐 雅，等.清開靈有效組分對(duì)腦缺血時(shí)TGF-β、HSP70含量的影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30（2）：94.

[4] 鐘相根，李澎濤，王永炎，等.清開靈有效組分對(duì)大鼠缺血腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響[J].中國醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2004，19（6）：338.

[5] 徐麗榮，馬世彬，李澎濤，等.清開靈有效組分對(duì)MCAO大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響[J].中藥材，2004，27（5）：348.

[6] 朱麗娜，盧曉梅，趙成海，等.燈盞花素對(duì)腦缺血再灌注小鼠腦組織抗氧化酶的影響[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，34（5）：406.

[7] 尹明華，徐曉虹，李怡佳.燈盞花素對(duì)缺血再灌注小鼠腦細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[J].中國藥學(xué)雜志，2008，43（3）：184.

[8] Fu H，Li J，LiQX，etal.Protective effectof ligustrazine on accelerated anti-glomerular basementmembrane antibody nephritis in rats is based on its antioxidantproperties Eur[J].Pharmacol，2007，563（1）：197.

[9] Zhao GR，Zhang HM，Ye TX，etal.Characterization of the radical scavenging and antioxidantactivities of danshensu and salvianolic acid B[J].Food Chem Toxicol，2008，46（7）：73.

[10] Zhou L，Zuo Z，Chow MS.Danshen：an overview of its chemistry，pharmacology，pharmacokinetics and clinical use[J].JClin Pharmacol，2005，45（12）：1 345.

[11] 陳孝東，劉春風(fēng)，曹勇軍.參芎注射液對(duì)腦缺血再灌注大鼠炎癥因子變化的影響[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志，2007，27（13）：1 017.

[12] Ho JW，Jie M.Pharmacological activity of cardiovascular agents from herbalmedicine[J].Cardiovasc Hematol AgentsMed chem，2007，5（4）：273.

[13] 洪森榮，尹明華.銀杏葉提取物對(duì)缺血再灌注小鼠腦細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[J].中草藥，2007，38（12）：1 864.

[14] 黃賤英，孫建寧，徐秋萍，等.銀杏內(nèi)酯B對(duì)缺血再灌大鼠腦損傷抗氧化活性的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥，2006，28（2）：265.

[15] 張碩峰，黃賤英，王 晶，等.銀杏內(nèi)酯B注射液對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，29（12）：836.

[16] 朱桂榮，潘家祜.GBE50對(duì)高脂大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2004，31（5）：502.

[17] 徐 旭，席文恭，趙專友.三七總皂苷對(duì)血栓性大鼠腦缺血模型的影響[J].中草藥，2009，40（增）：234.

[18] 周小寶，徐 侃.三七皂苷對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，19（1）：15.

[19] 鄭 敏，楊宏杰，張 丹，等.黃芪提取液清除自由基的實(shí)驗(yàn)研究[J].山東中醫(yī)雜志，2004，23（12）：743.

[20] 黃茸茸，李衛(wèi)平，李維族.黃芪提取物對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注血腦屏障損傷的影響[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2010，27（12）：1 064.

[21] 穆士卿，肖安平，李拴德，等.黃芪對(duì)急性腦創(chuàng)傷后局部腦皮質(zhì)血流速度變化的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2004，11（1）：45.

[22] 韓 寧，張 永.參麥注射液對(duì)腦缺血再灌注肺損傷大鼠血漿ET-1的影響[J].中國中醫(yī)急癥，2008，17（10）：1 426.

[23] 張圣塨，白 玉，王良榮，等.參麥注射液對(duì)外傷性腦損傷大鼠血清神經(jīng)元烯醇化酶一氧化氮內(nèi)皮素水平的影響

[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28（3）：583.

[24] 何曉靜，呂慶杰，劉玉蘭.冰片注射液對(duì)缺血再灌注大鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的影響[J].華西藥學(xué)雜志，2006，21（6）：523.

[25] 謝 健，閔 蘇.參附注射液對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障通透性及神經(jīng)功能的影響[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，34（11）：1 506.

[26] 張 茹，郭荷娜，吳海琴，等.葛根素對(duì)大鼠局灶性腦缺血后鈣超載的保護(hù)作用[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30（6）：1 268.

[27] Li Y，Pan WS，Chen SL，et al.Pharmacokinetic，tissue distribution and excretion of puerarin and puerarin-phospholipid complex in rats[J].Drug Dev Ind Pharm，2006，32（4）：413.

R283.612；R965

A

1001-0408（2012）23-2197-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.23.34

2011-08-22

2011-12-24）