大葉白蠟樹皮的化學(xué)成分研究Δ

肖正華，蔡玉鑫，阿依別克·馬力克（1.四川理工學(xué)院，四川自貢643000；.新疆大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，烏魯木齊 830046）

木樨科梣屬大葉白蠟樹（Fraxinus chinensis var.rhynchophylla Hemsl.），又名亞生（維吾爾語(yǔ)），為城市綠化樹種，全新疆均有分布。其皮性寒、味苦，具清熱燥濕、收斂之效；其種子性溫、味辛，具鎮(zhèn)靜安神之效，為常用維吾爾醫(yī)藥[1]。新疆部分地區(qū)以其同屬美洲綠梣的樹皮作秦皮，其化學(xué)成分與正品秦皮（富含香豆素類）差異很大[2]。為了開發(fā)新疆藥用資源，本課題組對(duì)大葉白蠟樹的皮及種子進(jìn)行了系統(tǒng)研究。從大葉白臘樹皮的90%乙醇提取物中分離出11個(gè)化合物。經(jīng)理化常數(shù)檢測(cè)、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、文獻(xiàn)比較和波譜學(xué)等方法，鑒定為咖啡酸（1）、丁香醛（2）、槲皮素（3）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、黃芩素（6）、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（7）、丁香苷（8）、木犀草素（9）、漢黃芩素（10）、蘆丁（11）。

1 儀器與試藥

MP-S3型熔點(diǎn)儀（溫度計(jì)未經(jīng)校正，日本Yanaco公司）；ARX-300型核磁共振（NMR）儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）、Equinox 55 FT-IR型（KBr壓片）紅外光譜（IR）儀（德國(guó)Bruker公司）；1100LC-MS（ESI）型質(zhì)譜（MS）儀（美國(guó)HP公司）；lambda17UV/VIS型紫外光譜（UV）儀（美國(guó)Perkin-Elmer公司）。

薄層（TLC）和柱色譜用硅膠（青島海洋化工廠）；所用試劑均為分析純。大葉白蠟樹皮采自烏魯木齊市，由新疆大學(xué)阿依別克·馬力克副教授鑒定為真品，標(biāo)本現(xiàn)存于四川理工學(xué)院天然藥物實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

取大葉白蠟樹皮2 kg，粉碎，用90%乙醇滲漉，減壓濃縮至適量，加水分散，冷置。濾液依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇抽提，得石油醚提取物17 g、氯仿提取物68 g、醋酸乙酯提取物38 g、正丁醇提取物43 g。經(jīng)D101大孔樹脂、Sephadex LH-20、硅膠柱（100～200目）制備色譜反復(fù)分離，甲醇反復(fù)重結(jié)晶等方法分離純化。氯仿部分用石油醚-醋酸乙酯洗脫，得化合物1、2；正丁醇部分用氯仿-甲醇洗脫，得化合物8、9、11；其余化合物由醋酸乙酯部分用氯仿-甲醇、乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫而得。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：土黃色粉末（甲醇），mp 224～226℃；分子式：C9H8O4。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：12.06（1H，br s，COOH），9.49（1H，br s，OH），9.10（1H，br s，OH），7.40（1H，d，J＝15.9 Hz，H-3），7.01（1H，d，J＝2.0 Hz，5-H），6.95（1H，dd，J＝8.1，2.0 Hz，9-H），6.75（1H，d，J＝8.1 Hz，8-H），6.16（1H，d，J＝15.9 Hz，2-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：168.0（C-1），148.3（C-7），145.7（C-6），144.7（C-3），125.9（C-4），121.2（C-2），115.9，115.3，114.8（C-5，8，9）。根據(jù)1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)[3]對(duì)照，確定化合物1為咖啡酸。

化合物2：白色羽狀結(jié)晶（甲醇）；分子式：C9H10O4；ESI-MS（m/z）：181[M-H]-；IRνkBrmax（cm－1）：3440，1671，1607，1588，1465，1331，1107。1H-NMR（CDCl3，300 MHz）δ：9.83（1H，s，H-7），7.15（2H，s，H-2，6），6.10（1H，br s，OH-4），3.98（6H，s，3，5-OCH3）。13C-NMR（CDCl3，75 MHz）δ：190.6（C-7），147.5（C-3，5），141.0（C-4），128.6（C-1），106.9（C-2，6），56.5（3，5-2×OMe）。理化數(shù)據(jù)及波譜與文獻(xiàn)[4]報(bào)道一致，故確定化合物2為丁香醛。

化合物3：黃色晶體（醋酸乙酯），mp 313～315℃；紫外燈光（365 nm）下顯黃綠色熒光，Mg-HCl反應(yīng)呈陽(yáng)性，濃硫酸反應(yīng)呈黃色。其TLC的Rf值、UV和IR與槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品基本一致，故確定化合物3為槲皮素。

化合物4：黃色粉末（甲醇），mp 284～285℃；紫外燈光（365 nm）下顯黃色熒光，Mg-HCl反應(yīng)呈陽(yáng)性，濃硫酸反應(yīng)呈黃色，Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性（nm）：257，269，299，362；IR（cm－1）：3500～3200（OH），1665（C＝O），1560，1510（芳香烴雙鍵），1095，1030（葡萄糖C－O－C）；EI-MS m/z（%）：302（100）。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：6.18（1H，s，H-6），6.38（1H，s，H-8），6.84（1H，d，J＝8.4 Hz，H-5′），7.54（1H，d，J＝8.4 Hz，H-6′），7.56（1H，s，H-2′），5.46（1H，d，J＝7.5 Hz，H-1″）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：156.2（C-2），133.3（C-3），177.4（C-4），161.3（C-5），98.7（C-6），164.1（C5-7），93.5（C-8），156.3（C-9），104.0（C-10），121.2（C-1′），115.2（C-2′），144.8（C-3′），148.-5（C-4′），116.2（C-5′），121.6（C-6′），100.1（Gal-C-1），73.2（Gal-C-2），76.5（Gal-C-3），69.6（Gal-C-4），78.2（Gal-C-5），60.7（Gal-C-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[5]一致，故確定化合物4為槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物5：黃色粉末（甲醇）；mp 252～254℃；Mg-HCl反應(yīng)呈陽(yáng)性cm－1）：3483，3447，1656，1607，1566，1498，1273，1177，1086，1030，839。nm）：255，268（sh），348。1H-NMR（DMSO-d6）：7.47（1H，d，J＝2.3 Hz，C2′-H），7.44（1H，dd，J＝2.2，8.2 Hz，C6′-H），6.91（1H，d，J＝8.2 Hz，C5′-H），6.81（1H，d，J＝2.1 Hz，C8-H），6.75（1H，s，C3-H），6.46（1H，d，J＝2.1 Hz，C6-H），5.07（1H，d，J＝7.2 Hz，C1′-H）。13C-NMR（DMSO-d6，75 MHz）：182.0（4-C），164.6（2-C），163.1（7-C），161.2（5-C），157.1（9-C），150.0（4′-C），145.8（3′-C），121.5（1′-C），119.3（6′-C），116.1（5′-C），113.6（2′-C），105.4（10-C），103.3（3-C），99.7（6-C），94.8（8-C），100.0（1″-C），77.2（3″-C），76.5（5″-C），73.2（2″-C），69.7（4″-C），60.7（6″-C）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[6]基本一致，故確定化合物5為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物6：黃色針狀結(jié)晶（氯仿-甲醇）；mp 273～275℃；Mg-HCl反應(yīng)呈櫻紅色，Molish反應(yīng)呈陰性（nm）：278，314；EI-MS（m/z）：270[M]+，168[A1]+，140[A1-CO]+，102[B1]+，提示A環(huán)有3個(gè)羥基，B環(huán)無(wú)取代。1H-NMR：12.70（1H，s，C5-OH），10.60（1H，s，C7-OH），8.48（1H，s，C6-O），8.04（2H，m，C2，′6′-H），7.57（3H，m，C3，′4，′5′-H），6.91（1H，s，C3-H），6.62（1H，s，C8-H）。13C-NMR（DMSO-d6）：163.0（C-2），104.6（C-3），182.2（C-4），147.1（C-5），129.4（C-6），153.7（C-7），94.1（C-8），149.9（C-9），104.4（C-10），131.0（C-1′），126.3（C-2′），129.1（C-3'），131.8（C-4′），129.1（C-5′），126.3（C-6′）。其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[7]基本一致，聚酰胺和硅膠TLC的結(jié)果也與黃芩素對(duì)照品基本一致，故確定化合物6為黃芩素。

化合物7：黃色無(wú)定型粉末（甲醇）；mp 181～183℃；紫外燈光（365 nm）下顯黃色熒光，Mg-HCl反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示該化合物為黃酮苷類。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：6.21（1H，d，J＝2.4 Hz，H-6），6.39（1H，d，J＝2.4 Hz，H-8），7.30（1H，d，J＝2.1 Hz，H-2′），6.87（1H，d，J＝8.7 Hz，H-5′），7.26（1H，dd，J＝2.1，8.7 Hz，H-6′），5.26（1H，br s，H-1″of Rha），0.82（3H，d，J＝5.7 Hz，H-6″）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：157.4（C-2），134.3（C-3），177.8（C-4），161.4（C-5），98.7（C-6），164.2（C-7），93.7（C-8），156.5（C-9），104.1（C-10），120.8（C-1′），115.7（C-2′），145.3（C-3′），148.5（C-4′），115.5（C-5′），121.2（C-6′），101.9（C-1″），70.4（C-2″），70.6（C-3″），71.2（C-4″），70.1（C-5″），17.5（C-6″）。其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)均與文獻(xiàn)報(bào)道[8]基本一致，故確定化合物7為槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（即槲皮苷）。

化合物8：白色針晶（甲醇），mp 188～190℃，分子量：372，分子式：C17H24O9。（nm）：279，235，222，217（cm－1）：3431，3387，2900，1587，1510，1466，1420，1239，1133，1094，986，967。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：6.73（2H，s，H-2，6），6.47（1H，d，J＝15.8 Hz，H-7），6.34（1H，td，J＝4.8，15.8 Hz，H-8），5.0～4.8（糖上羥基和端基氫），4.10（2H，d，J＝4.5 Hz），3.77（6H，s，2OCH3），3.7～3.2（6H，m）。其理化檢測(cè)數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[9]基本一致，TLC的Rf值與丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品也基本一致，故確定化合物8為丁香苷。

化合物9：黃色粉末（氯仿-甲醇），mp 203～205℃；（cm－1）：3396（－OH），1658（－C＝O），1608，1510，1446；EI-MS m/z（%）：286[M]+（100），285（10），258（17），153（25），134（12），125（15），69（10）。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：12.96（1H，s，5-OH），7.41（1H，dd，J＝9.0，2.7 Hz，6′-H），7.38（1H，d，J＝2.7 Hz，2′-H），6.89（1H，d，J＝9.0 Hz，5′-H），6.66（1H，s，3-H），6.43（1H，d，J＝1.8 Hz，8-H），6.18（1H，d，J＝1.8 Hz，6-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）：163.8（C-2），102.9（C-3），181.6（C-4），157.3（C-5），98.8（C-6），164.0（C-7），93.9（C-8），161.2（C-9），103.7（C-10），119.0（C-1′），113.3（C-2′），145.6（C-3′），149.6（C-4′），116.0（C-5′），121.5（C-6′）。經(jīng)TLC多體系檢測(cè)，其Rf值與木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品一致，波譜數(shù)據(jù)也與文獻(xiàn)報(bào)道[10]基本一致，故確定化合物9為木犀草素。

化合物10：黃色顆粒狀結(jié)晶（甲醇），mp 203～204℃；紫外燈光（365 nm）下顯黃色熒光。1H-NMR（300 MHz，acetone-d6）：12.57（1H，s，5-OH），9.40（1H，s，7-OH），8.07（2H，m，2′，6′-H），7.62（3H ，m，3′，4′，5′-H），6.80（1H，s，3-H），6.32（1H，s，6-H），3.86（3H，s，OCH3）。13C-NMR（75 MHz，CDCl3），164.4（C-2），105.6（C-3），183.2（C-4），157.9（C-5），99.8（C-6），158.2（C-7），127.2（C-8），151.0（C-9），105.4（C-10），130.0（C-1′），130.1（C-2′，6′），127.2（C-3′，5′），132.8（C-4′），61.9（OCH3）。EI-MS m/z：284（M+），269（M+-CH3），241（M+-H2O），102（Ph-C≡CH）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[11]基本一致，經(jīng)TLC檢測(cè)其Rf值也與漢黃芩素標(biāo)準(zhǔn)品基本一致，故確定化合物10為漢黃芩素。

化合物11：黃色無(wú)定形粉末（甲醇），mp 187～188℃；紫外燈光（365 nm）下顯黃綠色熒光；FeCl3反應(yīng)呈深綠色，濃硫酸反應(yīng)呈黃色。經(jīng)TLC對(duì)照，其Rf值與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品一致，混合后熔點(diǎn)不下降，故確定化合物11為蘆丁。

4 討論

本研究發(fā)現(xiàn)大葉白蠟樹皮的化學(xué)成分（富含黃酮類）與正品秦皮（富含香豆素類）差異很大，其中有7個(gè)化合物（化合物3、4、5、6、7、9、10）為首次從該屬植物中分得。這為研究維吾爾藥的活性成分奠定了一定的物質(zhì)基礎(chǔ)，但其藥理活性及抑菌等方面的工作有待進(jìn)一步開展。另外，本課題小組在試驗(yàn)過程中還發(fā)現(xiàn)大葉白蠟樹的種子富含多酚類色素，并作了部分理化性質(zhì)研究，證明其種子是天然食用紅色素的有效材料之一。

（致謝：感謝新疆大學(xué)理化測(cè)試中心孫萬(wàn)福老師對(duì)本試驗(yàn)所做的部分測(cè)試工作?。?/p>

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