邱波,王艷,胡建廷,李艷,王韶艷,王鳳乾,屈卉錦
(1.山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所藥物安全性評(píng)價(jià)中心,濟(jì)南250033;2.山東力明科技職業(yè)學(xué)院,濟(jì)南250116)
SD大鼠與巴馬小型豬的皮膚組織學(xué)比較
邱波1,王艷2,胡建廷1,李艷1,王韶艷1,王鳳乾1,屈卉錦1
(1.山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所藥物安全性評(píng)價(jià)中心,濟(jì)南250033;2.山東力明科技職業(yè)學(xué)院,濟(jì)南250116)
目的研究及觀(guān)察SD大鼠和巴馬小型豬皮膚的正常比較組織學(xué)。方法取SD大鼠和巴馬小型豬不同部位的皮膚進(jìn)行石蠟切片、HE染色,光學(xué)顯微鏡觀(guān)察。結(jié)果兩種動(dòng)物的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)在以下方面存在著顯著差異:1.SD大鼠的毛囊成簇分布,平均3~9成群,而巴馬小型豬的毛囊較稀少;2.SD大鼠表皮較薄,沒(méi)有透明層,基底細(xì)胞缺乏異質(zhì)性,真皮與表皮連接面平坦,沒(méi)有皮釘;而在巴馬小型豬皮膚表皮和真皮連接區(qū),有上下交錯(cuò)的表皮皮釘和真皮乳頭;3.SD大鼠的真皮結(jié)構(gòu)相對(duì)松散,真皮血管系統(tǒng)不發(fā)達(dá),而巴馬小型豬皮膚的真皮網(wǎng)織層和乳頭層交界的地方,水平分布著很多的淺表小靜脈和小動(dòng)脈叢,這種血管分布的方式與人類(lèi)皮膚中的血管分布極為類(lèi)似;4.SD大鼠的汗腺只局限于足墊的皮膚,汗腺上皮只有一種細(xì)胞類(lèi)型,腺細(xì)胞呈立方形或矮柱狀,胞核圓形,導(dǎo)管短而彎曲,由兩層上皮細(xì)胞組成。而巴馬小型豬皮膚的汗腺是頂泌汗腺,分布于真皮和脂肪相接的真皮深層,分泌部為粗管,管腔大,盤(pán)曲成團(tuán)。腺細(xì)胞呈立方形或扁平,胞核圓形或長(zhǎng)梭形。腺細(xì)胞與基膜之間也有肌上皮細(xì)胞。導(dǎo)管較細(xì)而直,開(kāi)口于毛囊上段。
SD大鼠;巴馬小型豬;皮膚;組織學(xué)
動(dòng)物與外界環(huán)境接觸的表面幾乎完全由皮膚覆蓋,經(jīng)皮膚吸收是環(huán)境毒物進(jìn)入機(jī)體的一個(gè)主要途徑。皮膚是機(jī)體最大的器官之一,皮膚完全暴露于環(huán)境,是機(jī)體抵御各種外來(lái)物作用的第一道防線(xiàn),很容易受到外界毒物的影響;而影響皮膚解剖結(jié)構(gòu)的因素可以改變皮膚的屏障功能而使毒物的吸收速率發(fā)生變化。因此,要研究特定毒物經(jīng)皮吸收、代謝以及其皮膚毒性,必須首先掌握皮膚的解剖學(xué)結(jié)構(gòu)。
皮膚毒理學(xué)是研究外來(lái)物理、化學(xué)和生物因素對(duì)皮膚的直接損害以及通過(guò)皮膚吸收引起皮膚局部或全身?yè)p傷及其毒性作用的機(jī)制和防治措施,并對(duì)各種皮膚接觸的理化因素進(jìn)行綜合性評(píng)價(jià)的科學(xué)。家兔、豚鼠、小型豬、SD大鼠、蛇蛻等常用作皮膚毒理學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。其中SD大鼠又是人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的主要來(lái)源之一,是進(jìn)行皮膚病理、皮膚腫瘤、皮膚老化、脫發(fā)、老年學(xué)研究及化妝品和外用藥品檢定等常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[1]。而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物巴馬小型豬,豬的皮膚在解剖和生理上都是與人類(lèi)皮膚最為接近的[2-10]。而經(jīng)常應(yīng)用于皮膚方面的研究。
因此,毒理病理工作者應(yīng)熟悉SD大鼠與巴馬小型豬的正常組織學(xué)和相互間的異同點(diǎn),這對(duì)今后工作的開(kāi)展具有一定的實(shí)用價(jià)值。本文就藥物慢性毒性試驗(yàn)中常用的SD大鼠和巴馬小型豬兩種動(dòng)物的皮膚進(jìn)行逐一描述并加以比較。
SPF級(jí)SD大鼠,由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供[合格證號(hào):SCXK(滬)2007-0005],動(dòng)物飼養(yǎng)于本中心屏障環(huán)境(SPF級(jí))動(dòng)物房[合格證號(hào): SYXK(魯)2005-0055],日常喂以60Co照射消毒飼料。
巴馬小型豬普通級(jí),健康,4~6月齡,由上海南江縣老港鎮(zhèn)華新特種養(yǎng)殖場(chǎng)提供[合格證號(hào): SCXX(滬)2007-0013]。
蘇木素-伊紅(HE)染色液由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。
1.3.1 動(dòng)物剖檢
剖檢前12 h禁食,SD大鼠及巴馬小型豬用1%戊巴比妥鈉麻醉(40 mg/kg,ip),取SD大鼠及巴馬小型豬的不同部位的皮膚于10%中性福爾馬林中固定。
1.3.2 切片及染色
組織固定6 h后進(jìn)行常規(guī)脫水、包埋、切片,并根據(jù)說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行HE染色。
SD大鼠與巴馬小型豬兩種動(dòng)物的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)存在著以下幾點(diǎn)差異:1.SD大鼠的毛囊成簇分布,平均3~9成群(圖1),而巴馬小型豬的毛囊較稀少(圖2);2.SD大鼠表皮較薄,沒(méi)有透明層,基底細(xì)胞缺乏異質(zhì)性,真皮與表皮連接面平坦,沒(méi)有皮釘(圖3);而在巴馬小型豬皮膚表皮和真皮連接區(qū),有上下交錯(cuò)的表皮皮釘和真皮乳頭(圖4); 3.SD大鼠的真皮結(jié)構(gòu)相對(duì)松散,真皮血管系統(tǒng)不發(fā)達(dá)(圖6),而巴馬小型豬皮膚的真皮網(wǎng)織層和乳頭層交界的地方,水平分布著很多的淺表小靜脈和小動(dòng)脈叢(圖5),這種血管分布的方式與人類(lèi)皮膚中的血管分布極為類(lèi)似,并且與在鼠科動(dòng)物中觀(guān)察到的分布方式完全不一樣;4.SD大鼠的汗腺只局限于足墊的皮膚,汗腺的分泌部位于真皮的深層和皮下組織,汗腺上皮只有一種細(xì)胞類(lèi)型,腺細(xì)胞呈立方形或矮柱狀,胞核圓形,導(dǎo)管短而彎曲,由兩層上皮細(xì)胞組成(圖9,10)。而巴馬小型豬皮膚的汗腺是頂泌汗腺,分布于真皮和脂肪相接的真皮深層,在頦部、蹄間、包皮開(kāi)口及乳腺外周較多。分泌物通過(guò)接近于毛囊的開(kāi)口排放于體外。分泌部為粗管,管腔大,盤(pán)曲成團(tuán)。腺細(xì)胞呈立方形或扁平,胞核圓形或長(zhǎng)梭形。腺細(xì)胞與基膜之間也有肌上皮細(xì)胞。導(dǎo)管較細(xì)而直,開(kāi)口于毛囊上段(圖7,8)。
通過(guò)組織切片,在顯微鏡下觀(guān)察皮膚組織的病理變化,已被廣泛用于皮膚毒理學(xué)研究。皮膚組織病理學(xué)檢查相對(duì)客觀(guān)、準(zhǔn)確,可發(fā)現(xiàn)肉眼不能觀(guān)察到的變化和鑒別可能存在的假陰性,提供皮膚變化的真實(shí)材料,提高皮膚刺激反應(yīng)評(píng)估的分辨率和準(zhǔn)確度。本實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)在光學(xué)顯微鏡下的大體觀(guān)察,判定SD大鼠和巴馬小型豬兩種動(dòng)物的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)存在著明顯差異。與SD大鼠相比,巴馬小型豬的皮膚與人類(lèi)皮膚更為接近。這對(duì)毒理病理工作者今后皮膚毒性病理工作的開(kāi)展具有一定的實(shí)用價(jià)值。
另外,目前嚙齒類(lèi)動(dòng)物大鼠被廣泛應(yīng)用于建立人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型;但是嚙齒類(lèi)與人類(lèi)之間存在極大的種屬差異,巴馬小型豬體型小,操作容易,遺傳穩(wěn)定,個(gè)體差異小,雖是一種理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,但國(guó)內(nèi)小型豬的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化工作還剛剛起步,還有大量的基礎(chǔ)研究工作要做,巴馬香豬作為中國(guó)獨(dú)特的實(shí)驗(yàn)用小型豬種之一,缺乏系統(tǒng)而完整的基礎(chǔ)資料,制約了巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用。
(4):356-3581.
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Comparison of Skin Histology between SD Rats and BAMA Minipig
QIU Bo1,WANG Yan2,HU Jian-ting1,LI Yan1,WANG Shao-yan1,WANG Feng-qian1,QU Hui-jin1
(1.Shandong Institute of Pharmaceutical Industry,Jinan 250033,china; 2.Shandong Liming Polytechnic Vocational College,Jinan 250116,china)
ObjectiveTo observe the normal histology of skin in SD rat and BAMA minipig.MethodsThe skins are removed from SD rat and BAMA minipig,then fixed with 10%formalin,embedded with paraffin,stained with HE and observed under light microscope.ResultsTwo animal skin histological structures are notably different in the following areas:1.The hair follicles of SD rat are distributed,the average is 3-9 groups,while the hair follicles of BAMA minipig are rare;2.The periderm of SD rat is thinner and there is no diaphanotheca.The basal cell is lack of heterogeneity.The junction of dermal and epidermal is flat,which is no skin nails.while in BAMA minipig,skin nails and dermal papillas are staggered up and down.3.The structure of the dermis is relatively loose in SD rats.The vascular system is underdeveloped in dermal.However,in the junction of Bama miniature pig skin dermis reticular layer and papillary layer,a lot of the superficial plexus of small veins and arteries are distributed horizontally.The Distributed manner of the blood vessels in Bama miniature pig skin is very similar with human skin;4.Sweat glands are confined to the foot pad of SD rat,Epithelial cells of sweat gland are the only one cell type,glandular cells are cuboidal or low columnar,nucleus is round,Duct which is composed of two layers of epithelial cells is short and curved.However,the sweat glands in the Bamaminipig are named apocrine sweat glands.Porcine sweat glands are located in the deep dermis which is connected by dermis and fat.The secretory portion is wide,lumens is large,and is coiled into the group.Gland cells are cube or flat,nucleus is round or fusiform shape.There are myoepithelial cells between the gland cells and the basement membrane.The ducts are fine and straight,which are opened to the upper hair follicle.
SD rat;BAMA minipig;Skin;Histology
Q954.6 R332
A
1671-7856(2012)06-0014-03
10.3969/j.issn.1671-7856.2012.06.004
2012-03-28
邱波(1983-),男,碩士生,主要從事藥物的毒性病理學(xué)研究,E-mail:qiubo.1983@163.com。