結(jié)核菌痰涂片檢驗76例結(jié)果分析

相天河

（吉林省結(jié)核病醫(yī)院檢驗科，吉林 長春 130500）

結(jié)核病是一種嚴重危害人類健康的慢性傳染病，多由牛型結(jié)核分枝桿菌引起，可累及全身多臟器，最常見的患病部位是肺臟，占各器官結(jié)核病發(fā)生率的80～90%，也可以累及肝、腎、腦、淋巴結(jié)等器官。主要的傳播途徑是呼吸。結(jié)核菌痰涂片檢查是確診肺結(jié)核最特異的方法，痰結(jié)核菌檢查具有特異性高、操作簡便易行的特點，一般涂片陽性肺結(jié)核診斷即可基本確立。為了加強痰菌涂片檢驗的質(zhì)量控制，現(xiàn)將我院近兩年來共76例痰涂片檢查結(jié)果統(tǒng)計報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年1月至2011年12月我院76例肺結(jié)核就診患者的痰涂片，初診時取患者夜間痰、清晨痰和即時痰3份痰標本，（如無夜間痰或清晨痰，則在送痰時，留取兩份即時痰）。復(fù)診患者按期送檢清晨痰和夜間痰兩份痰標本。痰標本采集方法：即時痰—深呼吸后咳出的痰；晨痰—患者晨起立即清水漱口，而后咳出的第2、3口痰液；夜間痰—痰檢前一晚患者咳出的痰液。采集標本的容器：采用WHO推薦的通用螺旋蓋痰瓶、可密封塑料盒、蠟紙盒等收集痰標本（直徑4cm，高2cm）。容器應(yīng)清晰標明患者的姓名、編號。標本的性狀：多為干酪狀、血痰、黏液痰。

1.2 痰檢方法[1]

痰液收集、取樣、涂片、染色及鏡檢、結(jié)果判斷均按《全國結(jié)核病防治工作手冊》的規(guī)定進行。采用痰直接涂片萋尼氏染色檢查法。

1.2.1 涂片

小心打開承載痰標本的容器，防止產(chǎn)生氣溶膠或使標本外溢。使用折斷的竹簽茬端，挑取痰標本中干酪樣、膿樣或可疑部分0.05～0.1mL，于玻片正面右側(cè)2/3處，均勻涂抹成10mm×20mm的卵圓形痰膜。痰膜朝上，靜置，待自然干燥后（一般約需要30min）進行染色鏡檢。

1.2.2 染色

①初染：火焰固定涂片，滴加石碳酸復(fù)紅染液2～3滴蓋滿玻片，火焰徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3～5min，待標本冷卻后用水自玻片一端輕緩沖去染色液[2]。②脫色：從玻片上端外緣滴加脫色劑布滿痰膜，脫色1～2min至無紅色沖洗出來為止，清水沖洗玻片。③復(fù)染：用亞甲藍復(fù)染液復(fù)染30s。水洗，用吸水紙吸干玻片殘余水，待玻片干燥后鏡檢。

1.2.3 鏡檢

染色合格的玻片，由于被亞甲藍染色而呈淡藍色。使用100×油鏡觀察。在淡藍色背景下，抗酸菌呈紅色；其他細菌和細胞呈藍色。仔細觀察300個不同視野。載玻片使用之后用二甲苯去油，編號、登記。存放在陰涼干燥的環(huán)境中保存。

1.3 結(jié)果報告標準

連續(xù)觀察300個不同視野，未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌，報告為陰性。報告抗酸桿菌菌數(shù)：1～8條抗酸桿菌/300視野。

抗酸桿菌陽性（1＋）：3～9條抗酸桿菌/100視野?？顾釛U菌陽性（2＋）：1～9條抗酸桿菌/10視野?？顾釛U菌陽性（3＋）：1～9條抗酸桿菌/每視野?？顾釛U菌陽性（4＋）：≥10條抗酸桿菌/每視野。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件完成數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。采用卡方檢驗分析數(shù)據(jù)，以P＜0.05說明有顯著差異，有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

兩年結(jié)核菌痰涂片檢查共檢查76例患者，其中初診59例，占77.6%，涂陽率為14.2%，總涂片數(shù)177張，陽性率12.2%；復(fù)診患者17例，占22.4%，涂陽率為2.9%，總涂片數(shù)34張，陽性率2.1%，初診患者涂陽率明顯比復(fù)診患者涂陽率高，有顯著性差異（P＜0.05）；陽性涂片率結(jié)果看，初診患者亦高于復(fù)診患者，有顯著性差異（P＜0.05）[3]。男性和女性各年齡組的痰菌陽性率比較無差別，各年齡組的痰菌陽性率比較差別不大。男女比較痰菌陽性率相近。初診患者不同咳痰時間痰涂片陽性率鏡檢結(jié)果：清晨痰＞夜間痰＞即時痰。

3 小 結(jié)

結(jié)核菌痰涂片是最特異的確診肺結(jié)核方法，觀察到結(jié)核菌是肺結(jié)核確診的主要依據(jù)。通過細菌學(xué)檢測是診斷傳染性肺結(jié)核的重要手段，具有特異性高、簡便易行、費用低、易推廣的優(yōu)點。只有符合標準的標本才能準確反映病情。①檢測時應(yīng)盡量取深部呼吸道的痰液，涂陽率才能相對較高。切忌取唾液，唾液中不存在結(jié)核桿菌，涂陽率幾乎為零。②采集時間對檢測也有影響，夜間痰、晨痰菌含量較高，而晨痰又稍高于夜間痰，即時痰中菌含量最低。③患者排菌有間斷、不均勻的特點，若只送檢一次會使一半陽性傳染源漏檢，最好能夠連查3次，以防止假陰性[4]。在工作中要先采符合要求的痰液，同時要注重提高涂片和染色水平，盡可能提高樣本菌檢出率。其次也要注意個人防護，檢測完的標本及污染物要及時處理。實現(xiàn)更準確、規(guī)范化結(jié)核病痰檢工作。

患者在留取痰標本前，醫(yī)師必須向患者講明留痰的注意事項，并安排其在有排氣設(shè)備的角落咳痰，以免造成對環(huán)境的污染。收集痰標本后要立即送至化驗室進行檢查，以免標本干涸影響檢出率。痰涂片的制作應(yīng)在滅菌的通風(fēng)柜內(nèi)進行，脫色時間應(yīng)不能超過2min，以防出現(xiàn)假陰性。涂片處、顯微鏡檢查工作臺要隔開，防止造成交叉污染。廢棄標本、痰盒和污染物應(yīng)專門分放并及時處理，不可隨意丟棄。對于不能燒毀的物品要先行高壓消毒滅菌，而后再專門清洗。最后對工作場所要進行嚴格徹底的消毒。

痰菌陽性表明其病灶是開放性的，有傳染性。若排菌量在每毫升10萬個以上，即為社會傳染源，痰檢易呈陽性。痰菌量在每毫升1萬個以下，檢測時易誤診，可用集菌法進行檢測。

出現(xiàn)假陽性的常見原因如下：其他抗酸物質(zhì)，如食物、染料沉渣，腐物寄生性抗酸菌，細菌的芽胞、胞子等均可造成假陽性。此外在操作過程中的相互污染，如陽性標本脫落至陰性標本、鏡油、吸水紙、滴鏡油棒上等，都能導(dǎo)致假陽性[5]。注意出現(xiàn)陽性不僅能診斷疾病，還能說明傳染程度及病變的嚴重程度。

假陰性出現(xiàn)的主要原因如下：標本的收集是否標準、涂片制備是否按要求進行，染色過程及看片等諸多方面。標本收集得法，是涂片檢查的關(guān)鍵。涂片時如果標本選取不當，就很可能采集不到結(jié)核菌。涂片、染色不當，涂片過薄或過厚，涂片標本量太少，也會對結(jié)果有影響；涂片在固定要防止加熱過度，否則細菌會發(fā)生染色不良；加熱過度又造成染料破壞。復(fù)染時染液太濃，則會過度遮蓋抗酸菌。另外，將姓名、標本、編號、標簽搞混等不負責(zé)現(xiàn)象責(zé)也是造成錯檢的一個主要原因。檢驗結(jié)果的準確性與檢驗人員工作水平及個人素養(yǎng)有很重要的聯(lián)系，檢驗人員必須懷有崇高的敬業(yè)精神，并要熟練掌握操作規(guī)則，才能提高檢驗結(jié)果的準確性，為臨床提供可靠的診斷依據(jù)[6]。

痰菌檢驗作為發(fā)現(xiàn)結(jié)核病傳染源及制定合理治療方案的重要依據(jù)，在控制傳染源、消除結(jié)核病傳播方面起著至關(guān)重要的作用。而涂片質(zhì)量的好壞又直接關(guān)系陽性率。所以在工作中要不斷提高對痰檢重要性的認識，收集合格的痰標本，并嚴格按規(guī)范執(zhí)行。這樣才利于及早發(fā)現(xiàn)患者病情，有效地控制結(jié)核的發(fā)生和傳播，早日實現(xiàn)防治目標。

[1]劉玉紅.結(jié)核菌痰涂片檢驗85例結(jié)果分析[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2010,4(7):82.

[2]婁泉偉,戚雅萍.1270份痰標本結(jié)核菌檢測結(jié)果分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2008,17(4):582.

[3]廉世松.沅陵縣CDC2005-2009年痰抗酸桿菌檢查結(jié)果分析[J].中國民康醫(yī)學(xué),2011,23(1):32-32.

[4]馬瑞紅.2008～2009年肺結(jié)核痰涂片鏡檢結(jié)果分析[J].中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生,2011,2(1):79-80.

[5]高曉霞,邢寶芝.痰涂片檢查在肺結(jié)核病診療工作中的重要作用[J].中國民族民間醫(yī)藥,2008,17(7):63.

[6]王偉.共和縣2005至2009年痰標本質(zhì)量分析[J].中國醫(yī)藥指南,2010,8(23):54-55.