美洛西林與四種常用輸液的配伍穩(wěn)定性考察

臧治滿，李晨晨，譚愛萍*

美洛西林鈉是臨床上常用的一種半合成青霉素類抗生素，常用于革蘭陰性菌中敏感菌屬所致的感染［1］。該藥說明書中未說明是否能與0.9%氯化鈉注射液配伍使用，僅說明與5%葡萄糖氯化鈉注射液或5%、10%葡萄糖注射液配伍使用。但在臨床上，糖尿病患者因病情需要，不能使用葡萄糖注射液。而且臨床曾發(fā)生過幾例美洛西林鈉與氯化鈉注射液配伍后出現(xiàn)沉淀的案例。因此，本文模仿臨床用藥條件，考察美洛西林鈉與4種常用輸液的配伍穩(wěn)定性，為臨床用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 Lc-2010C HT高效液相色譜儀:日本島津公司制造;HYPERSIL BDS-C18色譜柱(250mm ×4.6mm，5μm):大連依利特有限公司制造;萬分之一分析天平:中德合資SARTORIOUS公司生產(chǎn);DelTA320PH計:梅特勒-托利上海有限公司。

1.1.2 試藥 注射用美洛西林鈉，1 g/瓶，瑞陽制藥有限公司生產(chǎn)，批號:10073001;0.9%氯化鈉注射液，250mL/瓶，大連泰華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:810081821;5%葡萄糖注射液，250mL/瓶，大連泰華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:810060512;10%葡萄糖注射液，250mL/瓶，大連泰華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:809091212;5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液，250mL/瓶，大連泰華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:8090992711;蒸餾水:自制(經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過);磷酸二氫鉀(分析純)，沈陽市新西試劑廠生產(chǎn)，批號:2007年05月20日;磷酸氫二鉀(分析純)，天津市博迪化工有限公司生產(chǎn)，批號:2007年6月7日;甲醇(色譜純)，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號:20090210。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱:BDS-C18(250mm×4.6mm，5μm);流動相:磷酸鹽緩沖溶液(pH 值為5.8)∶甲醇 =60∶40;檢測波長:210 nm;流速:

1.2 mL/min;進(jìn)樣量:1μL;柱溫為30℃。

1.2.2 溶液的配置 流動相的配制:精密稱取磷酸二氫鉀8.3409 g與磷酸氫二鉀0.8700 g，加水溶解定容至1000mL，超聲振蕩10min，用孔徑為0.22μm的微孔濾膜過濾。

對照品溶液的配制:取1 g注射用美洛西林鈉，將其溶于10mL注射用水中，搖勻，使其充分溶解。

樣品溶液的配制:按臨床常用劑量，分別將2 g注射用美洛西林鈉加入到0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液中，制成樣品溶液。

1.3 方法學(xué)考察

1.3.1 專屬性考察 取對照品溶液1mL，將其稀釋至 8 mg/mL，取 1μL 進(jìn)樣，再分別取 1μL 0.9%氯化鈉注射液、1μL 5%葡萄糖注射液、1μL 10%葡萄糖注射液、1μL 5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液進(jìn)樣，比較所得色譜圖。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取對照品溶液1mL，用流動相稀釋至 1、2、4、8、12 mg/mL，在上述色譜條件下進(jìn)行測定，記錄峰面積，以色譜峰面積(Y)對美洛西林鈉濃度(C)進(jìn)行線性回歸。

1.3.3 精密度考察 取對照品溶液1mL，將其稀釋至8 mg/mL，連續(xù)進(jìn)樣5次，進(jìn)樣量1μL，記錄峰面積，計算變異系數(shù)。

1.4 配伍穩(wěn)定性考察 首先，測定5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖氯化鈉注射液的pH值，將2 g美洛西林鈉溶于上述4種輸液中，再分別測定4種溶液的pH 值，作為 0 h 的 pH 值，然后于 0、0.5、1、2、3、4、5、6 h分別測定pH值及含量，同時記錄配伍液外觀變化。

2 結(jié)果

2.1 專屬性考察結(jié)果 見圖1～圖5?？梢?種輸液對美洛西林鈉的測定無影響，表明所建立的分析方法的專屬性好。

圖1 美洛西林鈉色譜圖

圖2 5%葡萄糖注射液色譜圖

圖3 10%葡萄糖注射液色譜圖

圖4 0.9%氯化鈉注射液色譜圖

圖5 5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 美洛西林鈉的線性回歸方程:Y=2694317.7361 C+173722.5053，r=0.9999，結(jié)果表明，美洛西林鈉在1～12 mg/mL范圍內(nèi)，濃度與面積呈良好的線性關(guān)系。見圖6。

圖6 標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 精密度考察結(jié)果 見表1。

表1 美洛西林鈉日內(nèi)精密度考察結(jié)果

2.4 樣品配伍后穩(wěn)定性考察 見表2～表5。結(jié)果表明，美洛西林鈉與4種輸液配伍后，樣品峰面積變化小于2%，表明配伍溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定。

表2 美洛西林鈉與5%葡萄糖注射液配伍的穩(wěn)定性考察

表3 美洛西林鈉與10%葡萄糖注射液配伍的穩(wěn)定性考察

表4 美洛西林鈉與5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液配伍的穩(wěn)定性考察

表5 美洛西林鈉與0.9%氯化鈉注射液配伍的穩(wěn)定性考察

3 討論

3.1 流動相的選擇 由于美洛西林鈉偏堿性，且當(dāng)pH值為5.5～7.5時較穩(wěn)定，因此，本文選擇了磷酸鹽緩沖液(pH 5.8)∶甲醇為流動相。有報道對美洛西林鈉的測定采用磷酸鹽緩沖液-乙腈(80∶20)為流動相［2］。由于甲醇和乙腈極性相似，且價格便宜，所以，在本研究中，將乙腈換為甲醇。在預(yù)實驗過程中，筆者發(fā)現(xiàn)，當(dāng)磷酸鹽緩沖液∶甲醇為80∶20，保留時間過長，因此，調(diào)整了磷酸鹽緩沖液與甲醇的比例。經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化，最終確定以磷酸鹽緩沖液∶甲醇(60∶40)為流動相，實現(xiàn)了主峰與雜質(zhì)的良好分離，且保留時間短，縮短了實驗時間。

3.2 測定波長的選擇 于200～400 nm處對美洛西林鈉樣品溶液進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)美洛西林鈉的吸收峰在210 nm處［3］，且在預(yù)實驗中發(fā)現(xiàn)，氯化鈉溶液、葡萄糖溶液、葡萄糖氯化鈉溶液在210 nm處無吸收峰，對美洛西林鈉的測定無影響，因此，選擇210 nm作為美洛西林鈉的檢測波長。

3.3 在繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的過程中發(fā)現(xiàn)，載樣量過大時，美洛西林鈉峰形不呈正態(tài)分布，因此，若采用本實驗所建立的色譜條件對美洛西林鈉進(jìn)行分析測定，樣品溶液的適用濃度范圍應(yīng)在1～12 mg/mL。

3.4 本研究表明，美洛西林鈉與氯化鈉溶液配伍前后pH值無明顯變化，而與葡萄糖溶液、葡萄糖氯化鈉溶液配伍后，溶液的pH值變化較大，這可能是因為美洛西林鈉偏堿性，實驗中測得的氯化鈉溶液pH值約為5.36，配伍后美洛西林鈉對氯化鈉的pH值影響不大。實驗中測得5%葡萄糖溶液的pH值為4.32，10%葡萄糖溶液的 pH值為3.81，5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液的pH值為3.58，這3種溶液均偏酸性，美洛西林鈉對配伍后的pH值影響較大，因此，配伍后溶液的pH值變化較大。

3.5 美洛西林鈉在pH值為5.5～7.5時較穩(wěn)定，pH值＜4.5時會有沉淀發(fā)生，pH值＜4.0及＞8.0效價下降較快。葡萄糖注射液的pH值為3.2～5.5，葡萄糖氯化鈉注射液的pH值為3.5～5.5，且在實際應(yīng)用中，發(fā)現(xiàn)兩者pH值經(jīng)常低于4.5。若考慮pH值的影響，則美洛西林鈉在葡萄糖注射液和葡萄糖氯化鈉注射液中應(yīng)當(dāng)不穩(wěn)定，但本實驗結(jié)果顯示，二者配伍后能穩(wěn)定存在，這可能說明美洛西林鈉與葡萄糖氯化鈉注射液和葡萄糖注射液配伍后穩(wěn)定存在的pH值范圍較寬，因此，雖然配伍后二者的pH值偏低，美洛西林鈉仍能穩(wěn)定存在。0.9%氯化鈉注射液的pH值為4.5～7.0。因此，理論上美洛西林鈉在0.9%氯化鈉注射液中穩(wěn)定，且本實驗結(jié)果證實了這一推測。但美洛西林鈉說明書的用法中，沒有說明可以與0.9%氯化鈉注射液配伍使用，且在臨床曾發(fā)生過用0.9%氯化鈉注射液配伍后出現(xiàn)沉淀的案例。推測其可能與以下幾個方面有關(guān):①配伍濃度。臨床上根據(jù)病情的需要，常會增加美洛西林鈉的用量，若劑量過大，當(dāng)超過了美洛西林鈉與0.9%氯化鈉注射液的配伍濃度時，就會有沉淀析出。②溫度。溫度是影響藥物穩(wěn)定的一個重要因素，若溫度過高，藥物穩(wěn)定性下降，可能會有沉淀析出。③配制配伍液時，氯化鈉注射液的pH值不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，超出了美洛西林鈉穩(wěn)定存在的pH值范圍，美洛西林鈉不能穩(wěn)定存在，因而在使用過程中有沉淀析出。目前，關(guān)于美洛西林鈉與0.9%氯化鈉注射液配伍后出現(xiàn)沉淀的原因尚未明確。

3.6 目前，糖尿病患者數(shù)量不斷增長，如果在輸液時，使用葡萄糖注射液或葡萄糖氯化鈉注射液作為溶媒，會增加其血糖濃度，加重患者的用藥負(fù)擔(dān)。為減輕糖尿病患者的負(fù)擔(dān)，臨床上糖尿病患者應(yīng)盡量避免使用葡萄糖注射液液。本實驗結(jié)果表明，美洛西林鈉與氯化鈉注射液配伍后穩(wěn)定性好，臨床上可以配伍使用。

3.7 配置樣品的過程中，由于操作手法不專業(yè)，藥物有所損失，存在人為誤差，因此，我們以0 h的峰面積為100，以峰面積比代替峰面積，從而消除了人為誤差的影響。

本實驗結(jié)果表明，美洛西林鈉與0.9%氯化鈉注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖注射液以及5%葡萄糖+0.9%氯化鈉注射液配伍后穩(wěn)定，臨床上可配伍使用。

［1］謝映姿，謝奕如，江曉梅.美洛西林不良反應(yīng)20例臨床分析［J］.中國醫(yī)藥，2008，3(9):526-527.

［2］黃漢清，秦斌.HPLC法測定注射用美洛西林鈉的含量［J］.中國藥師，2002，5(2):98-99.

［3］胡偉，張禮菊.美洛西林鈉注射液在6種輸液中的穩(wěn)定性［J］.安徽藥學(xué)，2003，7(2):92-93.