氯己定碘溶液的制備與初步穩(wěn)定性研究*

徐丹，鄒清河，劉輝，吳龍川，郭苗苗，浦金輝

(1.廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院藥劑科，430070;2.湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院2009級(jí)研究生班，武漢 430065;3.湖北省宜都市第一醫(yī)院，443300;4.解放軍75220部隊(duì)醫(yī)院，廣東 潮州 521021)

氯己定碘(chlorhexidine-iodine)是氯己定和碘的絡(luò)合物，抗菌譜廣，使用濃度低，滅菌率高，安全穩(wěn)定，消毒效果優(yōu)于氯己定和碘，是理想的高效低毒外用消毒劑［1-2］。氯己定碘對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌、真菌等都有較強(qiáng)的殺滅作用。研究證明，312～625 μg·L－1氯己定碘制劑即可有效滅活 99.99% 致病細(xì)菌、芽胞和白念珠菌，1 g·L－1氯己定碘制劑對(duì)HBsAg陽(yáng)性血清病原體的滅活率為99.95%［3］。但氯己定碘屬分子鍵化合物，難溶于水，通常要用45% ～75%乙醇或混合有機(jī)溶劑溶解稀釋?zhuān)?］。由于高濃度有機(jī)溶劑對(duì)皮膚黏膜有較大刺激，限制了這種消毒劑的使用。筆者在本研究采用增溶技術(shù)，選擇適宜的表面活性劑增加氯己定碘的溶解度，制備0.5%氯己定碘溶液劑，以期減少消毒劑的刺激性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠(chǎng))，SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵(上海亞榮生化儀器廠(chǎng))，KT-300Y超聲波藥品處理機(jī)(濟(jì)寧中冠超聲波有限責(zé)任公司)，電子天平(Mettle-Toledo Group)。

1.2 試藥 醋酸氯己定(錦州久泰藥業(yè)有限公司，批號(hào):100609)，碘化鉀(自貢泓鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào):100701)，碘(重慶新原興藥業(yè)有限公司，批號(hào):090204)，泊洛沙姆188(LutrolF 68，批號(hào):WPEE721F)、聚氧乙烯40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40，批號(hào) 17324534K0)，聚氧乙烯 35蓖麻油(Cremophor EL，批號(hào):5721336890)、純化聚氧乙烯35蓖麻油(Cremophor ELP，批號(hào):34516583F0)、聚乙二醇15羥基硬脂酸酯(Solutol HS 15，批號(hào):23417856E0)均為BASF公司惠贈(zèng)，95%乙醇(下稱(chēng)乙醇，牡丹江白酒有限公司，批號(hào):20110220)、丙二醇(湖南爾康制藥有限公司，批號(hào):101021)，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 氯己定碘的制備 取醋酸氯己定2.200 g，溶于乙醇24 mL，50℃水浴加熱15 min，攪拌得溶液Ⅰ;另取碘化鉀4.001 g，溶于純化水10 mL，加入碘3.008 g，攪拌使溶解，制得溶液Ⅱ。將溶液Ⅱ加入溶液Ⅰ，充分?jǐn)嚢?，靜置過(guò)夜，抽濾，濾渣用純化水220 mL分次洗凈，合并濾液，置4℃放置48 h。取出濾液，抽濾，得黑褐色沉淀物。沉淀物用純化水洗滌至中性，真空干燥72 h，即得氯己定碘［5］。

2.2 氯己定碘中有效碘、氯己定的含量和配合度

2.2.1 有效碘含量和氯己定含量測(cè)定 取氯己定碘絡(luò)合物約0.5 g，精密稱(chēng)定，置100 mL量瓶，加冰醋酸0.1 mL，用乙醇溶解并稀釋至刻度，混勻。精密量取上述溶液25 mL，置100 mL 錐形瓶，0.1 mol·L－1硫代硫酸鈉滴定液滴定至溶液無(wú)色，即為終點(diǎn)。滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，每0.1 mol·L－1硫代硫酸鈉1 mL滴定液相當(dāng)于碘12.69 mg。按上述方法測(cè)得氯己定碘中有效碘含量為 46.97%(RSD=0.08%，n=4)。

另取氯己定碘絡(luò)合物約0.3 g，精密稱(chēng)定，置100 mL錐形瓶，加丙酮30 mL與冰醋酸2 mL，振搖使溶解，加甲基橙的飽和丙酮溶液 1.0 mL，用0.1 mol·L－1高氯酸滴定液滴定。待溶液顯橙色，記錄高氯酸滴定液用量。滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，0.1 mol·L－1高氯酸滴定液 1 mL 相當(dāng)于氯己定25.28 mg。按上述方法測(cè)得氯己定碘中氯己定含量為53.30%(RSD=0.08%，n=4)。

2.2.2 氯己定碘的配合度 氯己定碘(C22H30Cl2N10·χ I2)的配合度 χ，按式 χ=(W碘/M碘)/(W氯己定/M氯己定)求算。其中M碘和W碘分別為碘的相對(duì)分子質(zhì)量和氯己定碘中碘的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，M氯己定和W氯己定分別為氯己定的相對(duì)分子質(zhì)量和氯己定碘中氯己定的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。經(jīng)計(jì)算，氯己定碘的配合度χ為1.76。

2.3 氯己定碘水溶液的制備

2.3.1 增溶劑的選擇 采用單因素法考察不同濃度的Lutrol F 68、Cremophor EL、Cremophor ELP、Cremophor RH 40、Solutol HS 15等非離子表面活性劑對(duì)氯己定碘的增溶作用。實(shí)驗(yàn)方法為:精密稱(chēng)取氯己定碘0.050 g，置10 mL量瓶，分別精密加入3%，9%，10%，15%，18%，20%，30%表面活性劑，混勻，加水至刻度，超聲處理10 min，置澄明度儀下觀(guān)察并記錄溶液性狀。平行實(shí)驗(yàn)3次。制得澄清0.5%氯己定碘溶液的各增溶劑最低用量分別是9%Solutol HS15，30%Cremophor RH40，20%Cremophor ELP，18%Cremophor EL。

結(jié)果表明，5種表面活性劑對(duì)氯己定碘均有不同程度增溶作用，且濃度越高增溶效果越佳，增溶作用依次為:Solutol HS 15＞Cremophor EL＞Cremophor ELP＞Cremophor RH 40＞Lutrol F 68。其中Solutol HS 15僅需9%即能制得澄清0.5%氯己定碘溶液。Lutrol F 68在溶解過(guò)程中產(chǎn)生大量泡沫且出現(xiàn)膠體現(xiàn)象，濃度增加至30%仍無(wú)法使氯己定碘完全溶解，增溶效果不理想，故在下一步實(shí)驗(yàn)中棄用。

2.3.2 潛溶劑的選擇 預(yù)實(shí)驗(yàn)證明，加入潛溶劑可以降低增溶劑的用量。筆者分別以5%丙二醇和5%乙醇作為潛溶劑，與不同濃度表面活性劑共用，考察其對(duì)氯己定碘的增溶作用，篩選最佳的表面活性劑和潛溶劑處方。用丙二醇作潛溶劑:精密稱(chēng)取氯己定碘0.050 g，置10 mL量瓶。分別稱(chēng)取9%，10%，13%，15%，18%，20%處方量表面活性劑置另一試管，加入丙二醇0.5 g，混勻，傾入上述量瓶，加水稀釋至刻度，超聲使溶解完全，即得0.5%氯己定碘溶液。用乙醇作潛溶劑:精密稱(chēng)取氯己定碘0.050 g，置10 mL 量瓶，加乙醇0.5 g，混勻，再分別稱(chēng)取9%，10%，13%，15%，18%，20%處方量表面活性劑置上述量瓶，加水稀釋至刻度，超聲使溶解完全，即得0.5%氯己定碘溶液劑。平行實(shí)驗(yàn)3次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加入潛溶劑能降低表面活性劑用量。丙二醇作潛溶劑時(shí)，除 Solutol HS 15外，Cremophor EL、Cremophor ELP和Cremophor RH 40均降至13%。雖然丙二醇能提高表面活性劑增溶作用，但超聲溶解時(shí)間均超過(guò)150 min，說(shuō)明其增溶作用有限。乙醇作潛溶劑時(shí)，表面活性劑用量較丙二醇更低，Cremophor EL、Cremophor ELP和Cremophor RH 40降至10%，Solutol HS15僅為6%，且超聲處理10 min即能得到澄清氯己定碘溶液。制得的氯己定碘溶液擦拭后無(wú)油膩感，皮膚清爽，故選用乙醇作潛溶劑。分別考察不同濃度乙醇的增溶效果，進(jìn)一步優(yōu)化潛溶劑用量，平行實(shí)驗(yàn)3次，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明，采用乙醇做潛溶劑，濃度低至1%，即可顯著降低各表面活性劑增溶濃度，提高增溶效果。

2.3.3 氯己定碘溶液劑優(yōu)化處方的驗(yàn)證 根據(jù)增溶后溶液的性狀，以最低增溶劑和潛溶劑濃度達(dá)到最佳增溶效果為目標(biāo)，獲得優(yōu)化處方和制備條件，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 氯己定碘消毒液的初步穩(wěn)定性

2.4.1 低溫實(shí)驗(yàn) 取樣品50 mL，置具塞錐形瓶，低溫循環(huán)3次，每次循環(huán)條件為:2～8℃放置2 d，40℃考察2 d，觀(guān)察性狀，取樣測(cè)定含量，并采用逐步升溫法檢測(cè)曇點(diǎn)。

2.4.2 凍融實(shí)驗(yàn) 取樣品50 mL，置具塞錐形瓶，凍融循環(huán)3次，每次循環(huán)條件:在－10～－20℃放置2 d，40℃考察2 d，觀(guān)察性狀，取樣測(cè)定含量，并采用逐步升溫法檢測(cè)曇點(diǎn)。低溫實(shí)驗(yàn)和凍融實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，低溫實(shí)驗(yàn)和凍融實(shí)驗(yàn)后，各處方的性狀、含量和曇點(diǎn)均無(wú)顯著變化(P＞0.05)，表明各制劑均較穩(wěn)定。其中，采用Cremophor RH 40為增溶劑的處方2，曇點(diǎn)最高，且起曇后能迅速恢復(fù)至澄清狀態(tài)，有利于運(yùn)輸、使用和貯存過(guò)程中的穩(wěn)定性。故確定0.5%氯己定碘溶液劑的最佳處方為:10%Cremophor RH 40(增溶劑)+1%乙醇(潛溶劑)。

3 討論

氯己定碘有多種制備方法［3，5-6］，本制備方法操作簡(jiǎn)單，產(chǎn)率和有效碘含量與其他方法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，無(wú)有機(jī)溶劑殘留，更利于產(chǎn)業(yè)化推廣。

表1 0.5%氯己定碘溶液劑的優(yōu)化處方和制備條件Tab.1 Optimized formulations and preparation conditions of 0.5%chlorhexidine-iodine solution

表2 0.5%氯己定碘溶液劑的初步穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.2 The Results of preliminary stability test of 0.5%chlorhexidine-iodine solution

僅用表面活性劑作增溶劑時(shí)，對(duì)氯己定碘的增溶作用不明顯，表面活性劑濃度需達(dá)較高時(shí)才有完全增溶作用。使用潛溶劑后，在提高氯己定碘溶解度時(shí)，顯著降低表面活性劑濃度，處方得到了進(jìn)一步優(yōu)化。預(yù)實(shí)驗(yàn)中，選擇了乙醇、丙二醇、聚乙二醇400、聚乙二醇1 000等4種潛溶劑，聚乙二醇400和1000的增溶效果不佳，故選擇丙二醇和乙醇進(jìn)行增溶實(shí)驗(yàn)。

為了闡明增溶原理，還對(duì)增溶處方進(jìn)行的極限增溶實(shí)驗(yàn)表明，以10%Cremophor RH 40為增溶劑，潛溶劑乙醇濃度1%時(shí)，氯己定碘的濃度可達(dá)0.9%;乙醇濃度5%時(shí)，氯己定碘的濃度可達(dá)1.2%。推測(cè)增加乙醇濃度能降低Cremophor RH 40的臨界膠束濃度約為0.039%，推測(cè)增加乙醇濃度降低了Cremophor RH 40的臨界膠束濃度，故有效提高了對(duì)氯己定碘的增溶作用。具體的增溶機(jī)制尚有待研究。

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