腎舒康合劑對馬杉腎炎白兔血脂代謝的影響※

閆翠環(huán) 陳志強 張邊江 方 敬 陳金金 劉云肖

(河北醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院基礎(chǔ)護理教研室，河北 石家莊 050091)

馬杉腎炎(masugi glomerulonephritis，MGN)是一種典型的抗腎小球基底膜性腎小球腎炎，其主要臨床表現(xiàn)為腎病綜合征，隨著疾病的發(fā)展甚至?xí)鹉I功能嚴重損傷［1］。目前，西醫(yī)多采用激素類、免疫抑制劑等藥物治療，但其毒副作用較明顯，所以尋找具有多種治療作用，而無毒或低毒的安全藥物對MGN的治療具有重要意義。研究表明，腎舒康合劑能降低尿蛋白，減輕腎組織病理損傷，保護腎功能［2］。本研究通過白兔注射羊抗兔腎血清制備MGN動物模型，同時以腎舒康合劑進行干預(yù)性治療，并設(shè)雷公藤多苷組作為對照，通過觀察實驗動物血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)的變化，觀察腎舒康合劑對MGN的治療作用，并探討其可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 清潔級成年綿羊1只，雌性，12月齡，體質(zhì)量25 kg，由中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)動物中心提供，實驗動物許可證號SCXK(滬)2007－0003;健康新西蘭種大耳白兔46只，9周齡，雌雄各半，體質(zhì)量1.75～2.25 kg，由武漢市新洲區(qū)全耀動物養(yǎng)殖場提供，實驗動物許可證號SCXK(鄂)2004－0006。

1.1.2 藥品及試劑 腎舒康合劑(藥物組成:黃芪15 g，黃精 15 g，生地黃 15 g，丹參 30 g，川芎 15 g，石韋 15 g，白花蛇舌草15 g，積雪草15 g，柴胡10 g，地龍15 g。藥材購自河北省安國市一方中藥材有限公司，由河北省中醫(yī)院中藥房孟熙中藥師鑒定為真品)由河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)院提供;雷公藤多苷片(湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司，國藥準字Z43020138，批號20050702)。TC試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號3400195);TG試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號3400198);弗氏完全佐劑(Sigma公司，批號Lot102K8930)。

1.1.3 主要儀器 7170－A型全自動生化分析儀(日本日立公司);TGL－16G－A型低溫高速離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠);DK－600A型電熱恒溫水箱(上海一恒科技有限公司);MDF－382E型超低溫冰箱(日本三洋公司)。

1.2 方法

1.2.1 抗原及血清制備 ①白兔腎皮質(zhì)抗原制備:取健康新西蘭種大耳白兔6只，體質(zhì)量(2±0.25)kg，雌、雄兼用，處死后，取出腎臟，插入導(dǎo)管，用0.9%氯化鈉注射液水反復(fù)沖洗后，取腎皮質(zhì)5 g研成勻漿，與弗氏完全佐劑混勻成10 mL，加0.9%氯化鈉注射液20 mL，反復(fù)研磨制成油包水混懸液，即兔腎抗原。②羊抗兔腎血清制備:取家兔靜脈血，抗凝處理后3 000 r/min離心5 min，棄去血漿和白細胞部分，沉積的紅細胞用0.9%氯化鈉注射液洗滌3次，前2次離心5 min，第3次離心10 min，去除上清液備用。取兔腎抗原，于綿羊皮下分5處注射，每處1 mL，每2周1次，連續(xù)4次。末次注射后2周末，取羊動脈血，分離血清，加入等量兔紅細胞混勻，置4℃冰箱放置24 h使之充分吸附，離心后吸取上清液，于56℃水浴中滅活30 min，此即羊抗兔腎血清(用雙向瓊脂擴散法測定，抗血清效價為1∶32)取上清液。

1.2.2 白兔MGN模型制備［3］及分組 選用健康新西蘭種大耳白兔，雌雄各20只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，分別置于代謝籠里取尿，檢測尿蛋白和尿紅細胞均為陰性的用于實驗。整個實驗過程中白兔可自由進食和飲水，溫度(22±1)℃，光照明、暗各12 h循環(huán)。隨機分為正常組、模型組、腎舒康組及雷公藤多苷組，每組各10只。除正常組外，其他各組白兔均經(jīng)耳緣靜脈注射羊抗兔腎血清2 mL，30 min 1次，連續(xù)6次。檢測尿蛋白呈陽性反應(yīng)，表明MGN模型制備成功［1］。

1.2.3 給藥方法 造模成功后第1 d開始給藥。腎舒康組予腎舒康合劑10 mL/(kg·d)(含生藥8.16 g)、雷公藤多苷組予雷公藤多苷混懸液10 mL/(kg·d)(含原藥5 mg)灌胃給藥，模型組和正常組給予等容積0.9%氯化鈉注射液灌胃給藥，每日1次，連續(xù)4周。其中模型組死亡2只。

1.3 觀察指標及方法 給藥4周末白兔禁食(不禁水)12 h，經(jīng)耳緣靜脈取血，分離血清，采用日立7170－A型全自動生化分析儀檢測TC、TG水平，按照試劑盒說明書進行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用均數(shù)±標準差(±s)表示，采用t檢驗。

2 結(jié)果

各組白兔TC、TG比較見表1。

表1 各組白兔TC、TG比較mmol/L，±s

表1 各組白兔TC、TG比較mmol/L，±s

與正常組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與模型組比較，△P ＜0.01

組 別 n TC TG正常組10 1.97±0.36 1.34±0.23模型組 8 3.79±0.51＊＊ 2.26±0.33＊＊腎舒康組 10 3.16±0.29＊＊△ 1.70±0.23＊＊△雷公藤多苷組 10 3.01±0.36＊＊△ 1.63±0.19＊△

由表1可見，模型組、腎舒康組及雷公藤多苷組TC、TG均較正常組明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)。腎舒康組和雷公藤多苷組TC、TG與模型組比較均明顯降低(P＜0.01)。腎舒康組TC、TG稍高于雷公藤多苷組，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。

3 討論

腎舒康合劑是按腎病綜合征脾腎功能失調(diào)，陰陽氣血不足，水濕、濕熱、瘀血阻滯的病機特點擬方。方中黃芪、黃精、生地黃健脾溫中而不燥，益腎養(yǎng)陰而不膩，并助諸藥之力，使氣旺以促血行，祛瘀而不傷正，共奏健脾補腎、益氣養(yǎng)陰之功效，為君藥;丹參、川芎、地龍、柴胡具有活血化瘀通絡(luò)、調(diào)暢氣血運行的功效，其中柴胡配川芎可以氣血同治，相互協(xié)同以暢行氣血，共為臣藥;積雪草、白花蛇舌草、石韋清熱利濕，解毒消腫，共為佐使藥。

近年來，大量臨床資料和動物模型及體外研究結(jié)果表明，高脂血癥可促進腎小球局灶性節(jié)段性硬化［4］，脂質(zhì)尤其是低密度脂蛋白及氧化修飾低密度脂蛋白在引起和促進腎小球硬化的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。增高的膽固醇沉積于血管壁，損傷血管內(nèi)膜而加重腎臟的病理進展。由此可見，減少脂質(zhì)在腎臟的沉積有利于延緩腎小球的病變進程。本實驗結(jié)果顯示，MGN存在脂質(zhì)代謝紊亂，TC、TG均明顯升高，腎舒康合劑治療后均有所下降，其機制可能是利用黃芪提高脂蛋白脂酶和卵磷脂膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶活性，改善脂質(zhì)代謝紊亂［5］;通過丹參、川芎等降低血液黏度，擴張血管，抗擊血小板凝集，抗纖維化及調(diào)節(jié)免疫功能，從而保護腎單位免受進一步損傷［6－7］。

［1］王海燕.腎臟病學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1996:531－532.

［2］韓琳，張邊江，陳志強.腎舒康對家兔C－BSA腎炎模型治療作用的研究［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報，2006，21(3):5－7，26.

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［5］黃逸輝，鄧穎，翁志媛，等.黃芪注射液對腎病綜合征患兒尿蛋白影響的研究［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2004，13(12):1562－1563.

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