五苓散對(duì)腹瀉模型大鼠體重及血清、尿滲透壓的影響＊

向麗華，張治國(guó)，王 震，孫 剛，王笑紅，李媛媛，劉 洋

(中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700)

正常人每天攝入和從消化腺及胃腸上皮細(xì)胞分泌的消化液總量約9L，大部分被胃腸道重吸收，最終隨糞便排出的水液只有0.12L左右。腹瀉時(shí)胃腸道分泌、消化、吸收和運(yùn)動(dòng)等功能發(fā)生障礙，致使黏液分泌量增加、食物消化吸收不完全、水液吸收量減少和腸動(dòng)力加速等，最終導(dǎo)致大便次數(shù)增加，糞便稀薄而形成腹瀉。腹瀉可引起大鼠體重明顯下降，檢測(cè)體重可了解大鼠通過大小便丟失的水液量。腹瀉易引發(fā)脫水及電解質(zhì)紊亂，腎臟通過排滲透壓不同的尿液來維持血液及組織液正常滲透壓，檢測(cè)尿滲透壓可了解腎的濃縮功能。因此，本研究觀察了五苓散對(duì)腹瀉模型大鼠體重及血清、尿滲透壓的影響，探討五苓散的止瀉作用機(jī)理。

1 材料

1.1 動(dòng)物

SD大鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，2月齡，體重150g±10g，共101只，由中國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心提供(許可證號(hào) SCXK(京)2005-0004)。

1.2 藥品

五苓散購(gòu)于同仁堂藥店，按《中國(guó)藥典》和《傷寒論》制法配制:豬苓 150g，澤瀉 250g，白術(shù) 150g，茯苓150g，桂枝100g，共研細(xì)粉，過 120目篩，干燥備用。使用前加蒸餾水配成相應(yīng)濃度。氫氯噻嗪由山西云鵬制藥股份有限公司生產(chǎn)(批號(hào)A090802)，使用前加蒸餾水配成相應(yīng)濃度?？诜}液(ORS)按世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦配方配制:葡萄糖20g，氯化鈉3.5g，碳酸氫鈉2.5，氯化鉀1.5g，加蒸餾水至1000ml。番瀉葉液制備:200g番瀉葉浸入 100℃1000ml純凈水，充分?jǐn)嚢?0min后用紗布絞出濾液約600ml備用。

1.3 儀器

SMC30滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀，天津天河醫(yī)療儀器有限公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 分組及給藥方法

動(dòng)物隨機(jī)分7組:①正常對(duì)照組;②腹瀉模型組;③口服鹽液組:自由飲用口服鹽液(ORC);④氫氯噻嗪組:灌胃氫氯噻嗪9mg/kg(相當(dāng)于成人劑量100mg/d等效劑量);⑤五苓散低劑量組:灌胃五苓散1.35g/kg(相當(dāng)于成人劑量15g/d等效劑量);⑥五苓散中劑量組:灌胃五苓散2.7g/kg;⑦五苓散高劑量組:灌胃五苓散5.4g/kg。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行6d。② ～⑦組連續(xù)6d每日上午灌胃20ml/kg番瀉葉液制作并維持模型腹瀉狀態(tài)，④～⑦組每日下午灌胃給藥1次。各組大鼠實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)開始后每天下午給藥前稱體重，觀察大鼠的一般狀態(tài)、糞便狀態(tài)、稀便率等。分別于第4天上午、第7天上午用拉尾促排尿方法收集大鼠尿液。通過眼球取血法獲取血液，凝固后離心取上清液為血清。采用冰點(diǎn)法檢測(cè)血清滲透壓、尿滲透壓的摩爾濃度(Osmol/kg)。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

②～⑦組灌胃番瀉葉液后全部出現(xiàn)腹瀉，排不成形含大量水和黏液的稀便，稀便率為100%。同時(shí)大鼠出現(xiàn)不同程度的精神萎靡、皮毛色澤下降、肛門周圍污濁等。五苓散高劑量組3d后，大便已成形，黏液減少，但與對(duì)照組比較大便仍顯濕軟。各組大鼠體重變化見圖1，各組血清、尿滲透壓變化結(jié)果見表1、2。

圖1 大鼠體重變化圖

結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠體重在實(shí)驗(yàn)期間繼續(xù)增長(zhǎng)，其他各組體重在灌胃番瀉葉液后第2天檢測(cè)均下降，隨后體重變化如下:腹瀉模型組體重增長(zhǎng)下降;口服鹽液組體重繼續(xù)增長(zhǎng)，但增長(zhǎng)低于正常對(duì)照組，高于其他組;氫氯噻嗪組和五苓散各劑量組體重停止增長(zhǎng)或體重下降。各組大鼠血清滲透壓在實(shí)驗(yàn)前后沒有明顯變化，腹瀉模型組和口服鹽液組尿滲透壓下降，6d后檢測(cè)更明顯，明顯低于其他各組(P ＜0.001)。

表1 實(shí)驗(yàn)3d后大鼠血清、尿滲透壓變化

表1 實(shí)驗(yàn)3d后大鼠血清、尿滲透壓變化

組別 例數(shù) 血清滲透壓 例數(shù) 尿滲透壓正 常 對(duì) 照 組5 0.308±0.005 8 1.524±0.520腹 瀉 模 型 組 7 0.306±0.004 12 1.341±0.726口 服 鹽 液 組 7 0.300±0.006 8 1.053±0.451氫 氯 噻 嗪 組 7 0.299±0.005 14 1.454±0.713五苓散低劑量組 7 0.304±0.013 11 1.350±0.405五苓散中劑量組 7 0.305±0.004 14 1.660±0.546五苓散高劑量組7 0.305±0.005 14 1.664±0.570

表2 實(shí)驗(yàn)第6天后大鼠血清、尿滲透壓變化

表2 實(shí)驗(yàn)第6天后大鼠血清、尿滲透壓變化

注:與正常組比較:＊＊P＜0.01;與模型組比較:△△P＜0.01

組別 例數(shù) 血清滲透壓 例數(shù) 尿滲透壓正 常 對(duì) 照 組 6 0.305±0.005 6 1.780±0.343△△腹 瀉 模 型 組 8 0.305±0.005 8 0.504±0.252＊＊口 服 鹽 液 組 8 0.307±0.003 8 0.833±0.281＊＊?dú)?氯 噻 嗪 組 8 0.315±0.011 7 1.715±0.594△△五苓散低劑量組 8 0.308±0.006 8 1.507±0.396△△五苓散中劑量組 8 0.312±0.009 8 1.459±0.601△△五苓散高劑量組 8 0.307±0.004 8 1.781±0.521△△

4 討論

番瀉葉能使腸蠕動(dòng)增加，損傷結(jié)腸黏膜和促進(jìn)大腸排空，使腸道對(duì)水的吸收受抑制，造成大鼠腹瀉［1］。本實(shí)驗(yàn)顯示，20ml/kg(合生藥 3.6g/kg)番瀉葉液灌胃能使大鼠明顯腹瀉，體重增長(zhǎng)下降，尿滲透壓下降，說明腹瀉大鼠丟失了大量水、電解質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使處于體重增長(zhǎng)期的2月齡大鼠體重增長(zhǎng)下降。大鼠通過增加飲水補(bǔ)充部分水液，使電解質(zhì)丟失顯得更突出，大鼠通過排泄低電解質(zhì)尿液等維持血清滲透壓正常，這是腹瀉模型組大鼠血滲透壓正常而尿滲透壓下降的原因，說明腹瀉時(shí)機(jī)體有維護(hù)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的自我調(diào)節(jié)能力。

口服鹽液能補(bǔ)充大鼠因腹瀉丟失的水和電解質(zhì)，這是口服鹽液組大鼠能維持大鼠體重增長(zhǎng)的原因。但由于每日灌胃番瀉葉，大鼠仍處于腹瀉狀態(tài)，所以口服鹽液組體重增長(zhǎng)低于正常組，尿滲透壓也低于正常組。氫氯噻嗪是利尿劑，作用機(jī)制主要是抑制遠(yuǎn)端腎小管前段和近端小管對(duì)氯化鈉的重吸收，從而增加遠(yuǎn)端小管和集合管的Na+-K+交換，使尿鈉、鉀、氯、磷和鎂等離子排泄增加，尿量增加，這可能是氫氯噻嗪組尿滲透壓沒有明顯下降的原因。其利尿作用是氫氯噻嗪組體重增長(zhǎng)低于腹瀉膜型組的原因。

藥理研究表明，五苓散水煎劑有明顯的利尿作用，40g/kg灌胃明顯增加家兔、水負(fù)荷大鼠、小鼠的尿量[2]。五苓散的利尿作用維持時(shí)間長(zhǎng)于西醫(yī)利尿劑，五苓散中的茯苓、豬苓、澤瀉、桂技均有利尿作用，但單味藥的利尿作用不如五苓散復(fù)方強(qiáng)[3]，茯苓與桂枝有協(xié)同利尿作用[4]。五苓散利尿的作用機(jī)理主要是通過抑制腎小管重吸收功能，促進(jìn)Na+以及K+、Cl－的排出;其中茯苓有抗醛固酮作用，澤瀉增加心鈉素(ANF)的含量[5-6]。五苓散的利尿作用是五苓散各劑量組大鼠體重不增長(zhǎng)和體重低于腹瀉模型組的原因。因此，認(rèn)為五苓散對(duì)腹瀉模型大鼠的止瀉作用可能與利尿作用有關(guān)，這與五苓散“利小便實(shí)大便”治療腹瀉觀點(diǎn)相符合。五苓散的利尿作用不利于腹瀉大鼠體重增長(zhǎng)，在應(yīng)用五苓散治療腹瀉時(shí)要多飲熱水或補(bǔ)充鹽液，用以補(bǔ)充體內(nèi)水液丟失，這可能正是《傷寒論》141條、386條提到應(yīng)用五苓散時(shí)要“多飲暖水，汗出愈”的原因。

[1]劉順良，周月彩，李建新，等.番瀉葉的化學(xué)成分毒性及用藥安全性研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2002，13(11):693-693.

[2]陳奇.中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2001:47-52.

[3]劉青云.中藥藥理學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:83-84.

[4]劉新，馬成，盛萍，等.茯苓與桂枝配伍對(duì)小鼠利尿的實(shí)驗(yàn)研究[J].新疆中醫(yī)藥，2009，27(5):45-48.

[5]侯家玉.中藥藥理學(xué)[M].北京，中國(guó)中醫(yī)出版社，2002:95-100.

[6]周聯(lián)，陳芝喜，陳津巖.五苓散及其組分對(duì)正常小鼠血漿心鈉素含量的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，1995，15(1):36.