加熱乙酸法確證尿液干化學(xué)分析儀檢測尿蛋白的結(jié)果

楊紹佑 (浙江蒼南縣第二人民醫(yī)院 325802)

全自動型尿液干化學(xué)分析儀能快速分析尿液，方法簡便。在實際應(yīng)用中，尿液干化學(xué)分析儀帶來的不足(如有形成分)可通過全自動尿沉渣儀及顯微鏡鏡檢進(jìn)行彌補(bǔ)，但對于尿蛋白陽性的標(biāo)本，卻很少進(jìn)行驗證，而是直接發(fā)出報告。我院對干化學(xué)分析儀尿蛋白陽性標(biāo)本，一律進(jìn)行加熱乙酸法加以確證，卻發(fā)現(xiàn)大多數(shù)都是假陽性。為此，我們統(tǒng)計1842份體檢尿標(biāo)本，對其中的陽性標(biāo)本又進(jìn)行了加熱乙酸法檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2011年5月15-31日農(nóng)保體檢人員尿常規(guī)數(shù)據(jù)，共1842例，男1063例，女779例，年齡17～86歲。送檢尿液按要求收集并倒進(jìn)15mm×100mm玻璃試管，貼好標(biāo)簽，送到檢驗科，2h內(nèi)檢測完。

1.2 檢測方法 所有標(biāo)本經(jīng)優(yōu)利特(Uritest-300)自動化尿液分析儀進(jìn)行檢測，尿液干化學(xué)分析儀示尿蛋白陰性的標(biāo)本，用全自動尿沉渣儀或顯微鏡再次檢查以確認(rèn);分析儀提示有弱陽性及以上含量的尿蛋白標(biāo)本(重復(fù)3次，結(jié)果相同)，用相對離心力400g、1500r/min水平離心機(jī)離心5min后，取上清液做加熱乙酸法檢測尿蛋白。尿蛋白含量＜150mg/L為陰性(-);≥150mg/L為弱陽性(±);≥300mg/L為蛋白含量陽性(≥+)。

2 結(jié)果

1842例中，干化學(xué)分析尿蛋白陽性198例(10.7%)，陰性1644例(89.3%)。1644例陰性標(biāo)本經(jīng)再次確證后，均無尿蛋白陽性者。198例陽性標(biāo)本經(jīng)加熱乙酸法證實尿蛋白陽性有78例(39.4%，78/198)。198例中男113例，女85例，男∶女為1.33∶1；78例中男43例，女35例，男∶女為1.23∶1；兩組男女比例水平差別不大。從蛋白含量分析，干化學(xué)法198例中蛋白含量弱陽性118例，但加熱乙酸法證實尿蛋白含量弱陽性只有42例(35.6%，42/118)，余76例為陰性；干化學(xué)法檢測蛋白含量陽性80例，但加熱乙酸法證實尿蛋白陽性只有36例(45.0%，36/80)，余44例為陰性。干化學(xué)分析的123例混濁尿，加熱乙酸法證實只有44例(35.8%)，余79例均為澄清。

3 討論

正常人尿液中蛋白質(zhì)含量極少，檢驗蛋白尿主要反映腎小球損害情況，以及腎小球濾過是否增加。蛋白質(zhì)定性實驗主要有干化學(xué)法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法。尿液干化學(xué)分析是一項常用的檢驗技術(shù)，在各個醫(yī)療實驗室已廣泛應(yīng)用。它的蛋白測定利用蛋白質(zhì)誤差原理即尿中存在蛋白質(zhì)時，由于蛋白質(zhì)離子對帶相反電荷指示劑離子吸引而造成溶液中指示劑進(jìn)一步電離，在不同pH值時，可使指示劑改變顏色。優(yōu)點(diǎn)是快速、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化，適于健康普查，檢出敏感度為150mg/L。加熱乙酸法，加熱煮沸可使蛋白質(zhì)凝固變性，再加酸使尿液pH下降達(dá)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，而有利于變性蛋白質(zhì)的沉淀，同時可消除尿液中某些磷酸鹽加熱析出結(jié)晶，造成混濁的干擾。本法操作較繁瑣，但結(jié)果準(zhǔn)確，是傳統(tǒng)的經(jīng)典方法，尿蛋白特異性強(qiáng)，干擾因素少，檢出敏感度為150mg/L，作為蛋白質(zhì)定性實驗的確證實驗[1]?；腔畻钏岱ǖ奶攸c(diǎn)是操作簡便、快速、敏感度高(50～100mg/L)，但干擾因素較多。

本文結(jié)果顯示，加熱乙酸法與干化學(xué)分析尿蛋白陽性符合率只有39.3%，弱陽性的符合率只有35.6%，陽性符合率較高，混濁尿的符合率也只有35.8%。可見，對于干化學(xué)分析儀報混濁尿且尿蛋白弱陽性的標(biāo)本，不能輕易報出尿蛋白陽性的結(jié)果。筆者分析，干化學(xué)法產(chǎn)生假陽性除了受尿液pH≥9的影響外[2]，混濁尿、試紙條受潮，也是產(chǎn)生假陽性的原因。另外，從我們的實際應(yīng)用中還發(fā)現(xiàn)，Uritest-300自動化尿液分析儀要每日進(jìn)行維護(hù)，每做完100個標(biāo)本，最好進(jìn)行清潔，可以減少假陽性的產(chǎn)生。總之，我們認(rèn)為，干化學(xué)分析測定尿蛋白陽性時，最好要經(jīng)過另一種方法驗證再發(fā)報告，以適當(dāng)減少病人僅對化驗單結(jié)果引起的不安。

[1]羅春麗.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:134-136.

[2]叢玉隆，馬駿龍.當(dāng)代尿液分析技術(shù)與臨床[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社，1998:46-48.