乳腺癌中HER-2和VEGF-c表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

欒曉東 蓋延紅 慕強(qiáng) 王啟堂 王炳高

人類表皮生長(zhǎng)因子-2(HER-2)是一種原癌基因，在乳腺癌的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移中起著重要作用，是評(píng)估乳腺癌預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)。陽(yáng)性者對(duì)激素及化療不敏感，而分子靶向藥物曲妥珠單抗(赫賽汀)有明顯療效。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)具有高度特異性，VEGF高表達(dá)的乳腺癌患者易轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，是誘導(dǎo)腫瘤血管生成的主要調(diào)節(jié)因子。VEGF-c是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的VEGF家族的新成員，特異的作用于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子，并與腫瘤細(xì)胞的區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究抑制淋巴管的生成可作為抗腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移治療的一種有效方法。本文就乳腺癌HER-2、VEGF-c與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及HER-2與VEGF-c的相關(guān)性作一回顧性分析。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2005至2007年在我院接受乳腺癌改良根治性手術(shù)乳腺癌78例患者的常規(guī)石蠟包埋標(biāo)本，病理類型均為乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，均為女性;年齡36～73歲，平均年齡(55±10)歲。其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移50例(有轉(zhuǎn)移組)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例(無(wú)轉(zhuǎn)移組)。2組一般資料具有均衡性。

1.2 試劑與方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)法，試劑盒由 ZYMED公司提供，設(shè)陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷 光學(xué)顯微鏡下以細(xì)胞膜、漿中存在粗細(xì)一致的棕黃色顆粒為陽(yáng)性，其中HER-2陽(yáng)性顆粒分布于胞膜，VEGF-c陽(yáng)性顆粒分布于胞漿。陽(yáng)性染色細(xì)胞＜25%為陰性，陽(yáng)性染色細(xì)胞≥25%為陽(yáng)性。細(xì)胞漿存在粗細(xì)一致的棕黃色顆粒為陽(yáng)性，陽(yáng)性染色細(xì)胞＜25%為陰性，陽(yáng)性染色細(xì)胞≥25%為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與HER-2表達(dá)的關(guān)系 HER-2的表達(dá)在無(wú)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為39.3%，在有轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為66.0%，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

表1 乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與HER-2表達(dá)的關(guān)系 例(%)

2.2 乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與VEGF-c表達(dá)的關(guān)系 VEGF-c的表達(dá)在無(wú)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為39.2%，在有轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為70.0%，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表2。

表2 乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與VEGF-c表達(dá)的關(guān)系 例(%)

2.3 HER-2狀態(tài)與VEGF-c表達(dá)的關(guān)系 VEGF-c的表達(dá)在HER-2陽(yáng)性患者中陽(yáng)性率為70.5%，在HER-2陰性患者中陽(yáng)性率為44.1%，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。見表3。

表3HER-2狀態(tài)與VEGF-c表達(dá)的關(guān)系 例(%)

3 討論

HER-2(C-erbB-2)基因又稱neu基因是乳腺癌中常見的基因標(biāo)志物之一，編碼一185KD有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，定位于17q21，該蛋白與表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)具有高度同源性，是上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(EGFR)家族中的重要成員之一。在乳腺癌組織中有不同程度的擴(kuò)增和過(guò)表達(dá)［1］，在診斷，治療及預(yù)后判定等方面具有重要的參考價(jià)值。免疫組化方法或熒光原位雜交技術(shù)都可用于腫瘤HER-2狀態(tài)的首次評(píng)估。乳腺癌HER-2過(guò)度表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)［2，3］，本組顯示乳腺癌中腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性表達(dá)率(68.0%)明顯高于非腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(35.7%)(P ＜0.01)，二者有顯著性差異。有研究發(fā)現(xiàn)HER-2過(guò)表達(dá)的乳腺癌對(duì)很多化療藥物耐藥，對(duì)內(nèi)分泌治療反應(yīng)差［4］。

人VEGF-c基因位于染色體4q34上，編碼產(chǎn)物為419個(gè)氨基酸殘基的蛋白，分子量為46.9KDa。不少研究表明原發(fā)腫瘤組織中VEGF-c的高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤淋巴管生成，并且與腫瘤細(xì)胞向區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。O-charoenrat等［5］研究表明VEGF-c誘導(dǎo)的淋巴管生成介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞播散和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的形成。為了直接評(píng)價(jià)淋巴管生成對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的重要性，Cao等［6］的研究結(jié)果第一次表明乳腺癌中瘤內(nèi)淋巴管生成的發(fā)生，并確認(rèn)了VEGF-c可作為腫瘤淋巴管生成的一種潛在的增強(qiáng)因子，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞向區(qū)域淋巴結(jié)和肺的轉(zhuǎn)移性播散的增加。Witzenbichler等［7］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明VEGF-c有利于腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴管的轉(zhuǎn)移性播散。雖然VEGF-c被認(rèn)為是淋巴管生長(zhǎng)因子，但Valtola等［8］研究表明 VEGF-c/VEGFR-3信號(hào)通路還與血管發(fā)生和造血有關(guān)。近年來(lái)，已有較多的有關(guān)成功采用抗VEGF及其受體以抑制血管生成和腫瘤生長(zhǎng)研究的報(bào)道［9］。原發(fā)癌組織中VEGF-c的表達(dá)與區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)［10］。本實(shí)驗(yàn)研究顯示，VEGF-c蛋白在乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性表達(dá)率(70.0%)明顯高于非腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(39.2%)(P ＜0.01)。

目前認(rèn)為腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多基因協(xié)同作用的過(guò)程。在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的過(guò)程中HER-2、VEGF-c有協(xié)同作用，兩者有一定的內(nèi)在聯(lián)系，本研究顯示兩者呈正相關(guān)，Yamad等［11］研究發(fā)現(xiàn)HER-2在細(xì)胞過(guò)表達(dá)則會(huì)引起VEGF-c水平的明顯升高，提示在乳腺癌細(xì)胞上調(diào)VEGF-c表達(dá)的過(guò)程中，HER-2起著重要作用。Yamad等［11］提出在人乳腺癌細(xì)胞存在著這樣一種上調(diào)VEGF-c表達(dá)的機(jī)制:HER-2的配體HRG-β1經(jīng)由P38-MAPK信號(hào)通路并且是細(xì)胞核因子KB(NF-KB)依賴刺激 VEGF-c的上調(diào)。HER-2、NF-KB及 VEGF-c及其受體VEGFR-3之間可能存在著一條促進(jìn)乳腺癌淋巴道轉(zhuǎn)移的通路，即:HER-2→ NF-KB→ VEGF-c→ VEGFR-3→淋巴管生成→ 淋巴道轉(zhuǎn)移。HRG-β1的這種刺激作用能被HER-2的抗體Herceptin(赫賽汀)有效地抑制。其機(jī)制有待于進(jìn)一步探討。在臨床病理工作中開展乳腺癌HER-2，VEGF-c的檢測(cè)對(duì)指導(dǎo)臨床治療，預(yù)測(cè)患者預(yù)后有十分重要的意義。

1 Witte MH，Erickson R，Bernas M，et al.Phenotypic and genotypic heterogene in familial Milroy lymphedema.Lymphology，1998，31:145-155.

2 Aziz SA，Pervez S，Khan S，et al.Significance of immunohistochemical c-ErbB-2 product localisation pattern for prognosis in human breast cancer.Pathol Oncol Res，2001，7:190-196.

3 Tokatli F，Altaner S，Uzal C，et al.Association of HER-2/neu overexpression with the number of involved axillary lymph nodes in hormone receptor positive breast cancer patients.Exp Oncol，2005，27:145-149.

4 Fitzgibbons PL，Page DL，Weaver D，et al.Prognostic factors in breast.Arch Pathl Lab Med，2000，124:966-978.

5 O-charoenrat P，Rhys-Evans PA，Eccles S.Expression of Vascular Endothelial Growth Factor Family Members in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Correlates With Lymph Node Metastasis.Cancer，2001，92:556-568.

6 Cao Y，Linden P，F(xiàn)arnebo J，et al.Vascular endothelial growth factor C induces angiogenesis in vivo.Proc Natl Acad Sci USA，1998，95:14389-14394.

7 Witzenbichler B，Asahara T，Murohara T，et al.Vascular endothelial growth factor-C(VEGF-C/VEGFR-2)promotes angiogenesis in the setting of tissue is chemia DI.American Journal of Pathology，1998，153:381-394.

8 Valtola R，Salven P，Heikkila P，et al.VEGFR-3 and Its Ligand VEGF-C Are Associated with Angiogenesis in Bresat Cancer DI.American Journal of Pathology，1999，154:1381-1390.

9 Jain PK，Duda DG，Clark JW，et al.Lessons from phase III clinical trials on anti-VEGF therapy for cancer.Nat Clin Pract Oncol，2006，3:24-40.

10 Toi M，Bando H，Ogawa T，et al.Significance of vascular endothelial growth factor(VEGF)/soluble VEGF receptorl relationship in breast cancer.Int J Caner，2002，9:14-18.

11 Yamad Y，Nezu J，Shimane M，et al.Molecular clconing of a novel vascularendothelial growth factor，VEGF-D.Genomics，1997，42:483-488.