• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    5-氟尿嘧啶在pH敏感型分子篩控釋載體中的緩釋行為

    2012-01-08 05:13:48吳都督龍爍杭施志海吳銳彬
    化學(xué)研究 2012年1期
    關(guān)鍵詞:腸液胃液介孔

    吳都督,陳 稚,龍爍杭,施志海,吳銳彬

    (1.廣東醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院,廣東 東莞523808; 2.廣東醫(yī)學(xué)院 分析中心,廣東 東莞523808)

    5-氟尿嘧啶在pH敏感型分子篩控釋載體中的緩釋行為

    吳都督1*,陳 稚2,龍爍杭1,施志海1,吳銳彬1

    (1.廣東醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院,廣東 東莞523808; 2.廣東醫(yī)學(xué)院 分析中心,廣東 東莞523808)

    以腸溶性的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)作為包覆材料,制備了HPMCP包覆的SBA-15介孔分子篩藥物控釋載體(HPMCP/SBA-15),并考察了抗癌藥物5-氟尿嘧啶(5-Fu)負載于控釋載體后,在不同pH釋放環(huán)境中的釋放行為.結(jié)果表明,在模擬胃液中(pH=1.2),HPMCP能明顯地延緩5-Fu的釋放速度;藥物釋放4h后,其釋放率僅為15%.而在模擬腸液中(pH=7.5)HPMCP迅速溶解,對5-Fu釋放速度的影響甚微;藥物釋放4h后,釋放率可達到80%.與此同時,包覆膜的干燥溫度影響5-Fu的釋放行為,干燥溫度越高,藥物在模擬胃液中的釋放速度越慢.

    5-氟尿嘧啶;羥丙基甲基纖維素;鄰苯二甲酸酯;pH敏感型介孔分子篩;藥物緩釋行為

    5-氟尿嘧啶(5-Fu)是常用的治療癌癥(如腸癌)的藥物[1].但在傳統(tǒng)口服給藥方式中,藥物分子在到達腸道以前大部分被胃吸收或者被胃中的酶所破壞,這樣不僅降低了藥物到達腸道后的有效濃度,而且5-Fu的毒副反應(yīng)容易對胃、肝等正常器官造成傷害[2].因此開發(fā)一些新型的腸道靶向藥物控釋系統(tǒng)具有重要的實用價值和廣闊的應(yīng)用潛力.最近,納米技術(shù)的發(fā)展激發(fā)了廣大研究者使用新開發(fā)的納米材料作為醫(yī)藥載體的興趣.而硅基介孔分子篩因具有分布均勻且連續(xù)可調(diào)的納米孔徑、高比表面積、大孔容、表面可官能團化和良好的生物相容性等優(yōu)點,已成為一種很有應(yīng)用潛力的新型藥物載體[3].2001年,VALLET-REGí首次報道了介孔分子篩的藥物輸送性能,將硅基介孔分子篩的應(yīng)用拓展到藥物制劑領(lǐng)域[4].隨后,相繼有幾個研究小組分別報道了以介孔分子篩作藥物載體的安全性和生物相容性等方面的研究成果,并對調(diào)控藥物釋放速度的影響因素,如介孔孔徑、分子篩表面官能團、藥物釋放環(huán)境等進行了探索性的研究,這些研究結(jié)果表明在以硅基介孔分子篩為載體的藥物體系中,藥物分子能夠以分子級別分布在介孔孔道中,從而可更加精確地調(diào)控藥物釋放速度,實現(xiàn)對藥物的定時定量釋放[5-7].

    與此同時,人體環(huán)境是一個很復(fù)雜的生理環(huán)境,比如整個相連通的消化系統(tǒng)中,胃液的pH是1.2左右,十二指腸中的pH是5.4左右,而小腸部位的pH又是7.4左右,所以復(fù)雜的人體環(huán)境為介孔分子篩這種新型載體的發(fā)展也提出了復(fù)雜的要求,“靶向釋放”這種更高級的藥物釋放模式被人們提了出來.鑒于胃和腸道各自環(huán)境中pH的差異,設(shè)計一種pH控制的藥物釋放載體應(yīng)用于藥物控釋應(yīng)該是一個切合實際的研究方向.如果設(shè)計出的pH控制藥物釋放系統(tǒng),不僅能夠很明顯地延緩藥物(如5-Fu)在胃液中的釋放速度,而且又不限制藥物在其他器官(如腸道)中的釋放,那么所得到的應(yīng)該是一個好的pH敏感的藥物釋放系統(tǒng).該控釋系統(tǒng)不僅可阻止毒副反應(yīng)對胃、肝等器官的損害,還可提高藥效,因而在癌癥(如腸癌)治療中應(yīng)具有良好的應(yīng)用前景.然而,到目前為止,基于介孔分子篩這種新型載體的pH敏感藥物控釋研究卻只有很少的報道.YANG等人利用羧基官能團化SBA-15表面的-COOH和聚電解質(zhì)PDDA之間的靜電相互作用,開發(fā)了一種pH敏感藥物釋放載體.該系統(tǒng)在堿性條件下,利用聚合物將藥物束縛在介孔孔道內(nèi),使之不能很快釋放出來.而在酸性條件下,聚合物與分子篩表面的作用力消失,藥物則能夠快速的被釋放.遺憾的是,該控釋系統(tǒng)對酸過于敏感,應(yīng)用價值不大[8].

    羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)是一種良好的pH敏感包覆材料,自從1971年上市以來,常作為纖維素的衍生物用于包衣,并在藥學(xué)行業(yè)中廣泛應(yīng)用[9].它具有非常好的成膜能力,所以在制備過程中無須任何其他處理,就能與負載藥物的載體緊密結(jié)合.操作過程非常簡單,而且對制備過程無特別要求,因此是一種理想的介孔分子篩的包覆材料.因此,作者以pH敏感的HPMCP作為包覆材料,通過提拉的方法,制備HPMCP包覆的SBA-15介孔分子篩藥物控釋載體(HPMCP/SBA-15),同時利用5-Fu與分子篩的表面硅羥基的耦合將5-Fu負載于載體中,并考察其在模擬胃液(SGF)和模擬腸液(SIF)中的藥物控釋行為,以驗證HPMCP/SBA-15載體的pH敏感性能.

    1 實驗部分

    1.1 試劑

    5-氟尿嘧啶,分析純,Sigma公司;羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯,分析純,廣州市鼎泰樹脂有限公司;P123(H(CH2CH2O)20(CH2CH2CH2O)70(CH2CH2O)20H),分析純,Aldrich公司;正硅酸乙酯(TEOS),分析純,天津市化學(xué)試劑一廠;磷酸二氫鉀,磷酸氫二鉀,分析純,天津科密歐化學(xué)試劑公司;無水乙醇,鹽酸,分析純,廣東番禺化學(xué)試劑廠.

    1.2 介孔分子篩SBA-15的合成

    在磁力攪拌下,將4.0g表面活性劑P123加入到80mL 2.0mol·L-1的HCl溶液中,溫度恒定在40℃,攪拌至P123完全溶解后,加入5.0mL的TEOS.反應(yīng)混合物在40℃下恒溫攪拌24h后轉(zhuǎn)移至100 mL的晶化釜中,于100℃下晶化36h.所得產(chǎn)物過濾后,用去離子水和無水乙醇反復(fù)沖洗直至濾液的pH為7.0左右,然后樣品在80℃下干燥,最后將樣品在索氏抽提器中用無水乙醇萃取48h,80℃下烘干即得純硅基介孔SBA-15.

    1.3 藥物吸附

    分別取1.0g SBA-15粉末和1.5g 5-氟尿嘧啶,加入到250mL的去離子水和甲醇的等體積混合溶劑中.室溫攪拌12h后過濾,所得固體在80℃烘箱中干燥.取2.0mL濾液稀釋到25.0mL,用WFZ-26A型紫外可見分光光譜儀(天津拓普儀器有限公司)測定溶液中的5-氟尿嘧啶的濃度,按公式(1)確定載藥量.

    1.4 HMPCP/SBA-15的制備和藥物緩釋行為的測定

    取0.20g負載了藥物的SBA-15粉末,在5.0MPa的軸向壓力下制得13mm×3mm的藥片.然后將2.0g的HPMCP加入到總體積為50mL的甲醇和去離子水的混合溶劑中(甲醇和水的體積比為1∶1),攪拌至HPMCP全部溶解.接著以提拉的方式在SBA-15藥片上包覆HPMCP聚合物,提拉的速度控制在20 cm/min.每個藥片的HPMCP包覆過程重復(fù)3次.將包覆有HPMCP聚合物膜的藥片置于烘箱中干燥30 min,然后20℃下真空干燥12h備用.

    在100r/min的攪速下,將以上所得藥片分別在模擬胃液(pH=1.2,HCl水溶液)和模擬腸液(pH=7.4,磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀的緩沖溶液)中研究藥物的緩釋行為,實驗溫度控制在37℃.用WFZ-26A型紫外可見分光光譜儀測定溶液中釋放出來的5-氟尿嘧啶的濃度,并按公式 (2)確定藥物釋放率.

    藥物釋放率 = (釋放過程中游離的藥物質(zhì)量/負載的藥物質(zhì)量)×100% (2)

    1.5 材料表征

    透射電鏡(TEM)測試在日立H 600透射電鏡儀上進行,具體操作為:首先把少量樣品放入稱量瓶內(nèi),乙醇作分散劑,超聲振蕩20min后,用潔凈的滴管取一滴于銅網(wǎng)上,干燥后進行觀察,操作電壓為200kV.

    紅外光譜在FTS175C-UMA500型傅立葉紅外光譜儀(美國Bio-Rad公司)上測得,掃描累加128次.采用KBr壓片法進行測定.

    X射線衍射(XRD)測試于日本理學(xué)(Rigaku)D/max-γA型X射線衍射儀上進行,使用Cu Kα輻射(λ=0.154 2nm),金屬Ni濾波,石墨單色器,電壓40kV,電流30mA,閃爍記數(shù)器記錄強度.

    N2吸附-脫附和孔分布在美國Tristar 3000自動物理吸附儀上進行.樣品在80℃和1.33×10-4Pa下脫氣12h后,在-196℃下進行測定,并由Brunauer-Emmett-Teller(BET)方程計算樣品的比表面積,用Barrett-Joyner-Halenda(BJH)方法和N2吸附-脫附曲線中的脫附分支計算材料的孔分布.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 材料的表征分析

    2.1.1 SBA-15介孔分子篩的透射電鏡分析

    SBA-15介孔分子篩的透射電鏡圖如圖1所示.由圖1可見,所合成的SBA-15長度約為10~20μm,并具有很好的直徑均一的棒狀結(jié)構(gòu).

    2.1.2 SBA-15介孔分子篩的紅外光譜分析

    表1列出了SBA-15介孔分子篩吸附5-Fu前后的主要紅外特征吸收峰.由表1可見,純SBA-15介孔分子篩在3 465cm-1、1 644cm-1、1 090cm-1、971.6cm-1和 802.5cm-1出現(xiàn)特征吸收峰.其中,3 465cm-1屬于分子篩表面吸附的水的O-H伸縮振動,1 644cm-1屬于吸附的水的O-H彎曲振動,1 090 cm-1屬于Si-O的不對稱伸縮振動,971.6cm-1和802.5cm-1屬于SiO-H 的彎曲振動[10].當(dāng)SBA-15介孔分子篩吸附5-Fu后,其表面除了依然有上述硅骨架的特征峰外,還在1 730cm-1、882.6cm-1和753.3 cm-1出現(xiàn)了新的特征峰.其中,1 730cm-1屬于5-Fu的CO伸縮振動,882.6cm-1屬于-CFCH-中C-H的面外彎曲振動,753.3cm-1屬于-CFCH-中C-H的面外變形振動[11].這些屬于5-Fu的特征峰的出現(xiàn),意味著5-Fu已成功地負載到介孔SBA-15的表面.

    表1 SBA-15介孔分子篩的主要紅外吸收峰Table 1 Principal IR band frequencies of SBA-15mesoporous molecular sieves cm-1

    2.1.3 SBA-15介孔分子篩的X射線衍射分析

    圖2是負載5-Fu前后的SBA-15介孔分子篩的XRD圖.由圖可見,SBA-15在負載5-Fu前后均在2θ=1.0°左右存在一個六方晶系d100衍射主峰,與文獻報道一致[12].該衍射峰是典型的SBA-15介孔材料的特征峰,表明樣品長程有序的六方孔道結(jié)構(gòu)已經(jīng)形成.另外,SBA-15在負載5-Fu后,其XRD圖基本不變,僅峰強度略有降低,這表明5-Fu在SBA-15上負載并不會改變分子篩的有序結(jié)構(gòu),但是會使其介孔結(jié)構(gòu)的有序性降低.

    圖1 SBA-15介孔分子篩的透射電鏡圖Fig.1 Typical TEM image of SBA-15 mesoporous molecular sieves

    圖2 SBA-15介孔分子篩的XRD圖Fig.2 Typical XRD image of SBA-15 mesoporous molecular sieves

    2.1.4 SBA-15介孔分子篩的N2吸附-脫附和孔分布圖

    圖3是羧基官能團化SBA-15吸附5-Fu前后的N2吸附脫附和孔分布圖.如圖3所示,兩樣品在吸附5-Fu前后吸附脫附等溫線都呈現(xiàn)了典型的Ⅳ型曲線并保留著完整的H1滯后環(huán),這說明所合成的SBA-15具有有序的介孔結(jié)構(gòu).同時,發(fā)現(xiàn)當(dāng)分子篩在吸附藥物后,其比表面積由543.7m2/g降至509.5m2/g,孔容由1.023cm3/g降至0.962cm3/g,孔徑由5.9nm降為5.6nm.分子篩吸附藥物后,其比表面積、孔徑和孔容的降低,再次證實了5-Fu分子被成功地負載到介孔SBA-15的孔道內(nèi).另外,根據(jù)UV-Vis所測得的濃度,計算出5-Fu在SBA-15介孔分子篩上的藥物負載量為10.3%.

    圖3 SBA-15介孔分子篩的N2吸附-脫附圖和孔分布曲線(插圖)Fig.3 BET isotherms and pore size distributions(inserts)patterns of SBA-15mesoporous molecular sieves

    2.2 藥物緩釋行為

    采用體外模擬釋放實驗來評價藥物載體對5-Fu的緩釋行為.圖4是SBA-15載藥粒和HPMCP/SBA-15載藥粒在模擬胃液(a)和模擬腸液(b)中的緩釋行為.從圖4(a)中可以看到,沒有包覆HPMCP的SBA-15載藥粒在模擬胃液中釋放5-Fu的速度很快,2h后藥物基本釋放完全.而有HPMCP包覆的SBA-15載藥粒在模擬胃液中釋放5-Fu的速度較慢(見圖4(a)),2h之前藥物的釋放不超過10%,而到達4h時,被釋放出來的5-Fu也僅有15%,即使24h后,藥物的釋放也僅達到50%,這表示HPMCP/SBA-15可以很好地延緩5-Fu在模擬胃液中的釋放速度.由于食物在胃中的停留時間一般為4h,因此我們認為HPMCP/SBA-15可以很好的在胃環(huán)境中保護吸附于介孔孔道中的藥物分子.另外,我們發(fā)現(xiàn),在模擬腸液中,藥物緩釋過程基本不受所包覆的HPMCP膜層的影響,包覆前后的藥物緩釋曲線變化不大,5-Fu在模擬腸液中均可快速釋放,這一點,恰恰可以滿足5-Fu對于腸道疾病治療(如腸癌)的需要.因為該藥物緩釋系統(tǒng),不僅可以明顯延緩5-Fu在胃液中的釋放速度,而且又不影響5-Fu在腸液中的釋放,可減少胃液對藥物的影響,因而是一種理想的pH敏感載體.

    圖4 5-Fu在純SBA-15和 HPMCP/SBA-15中的釋放曲線Fig.4 5-Fu released profiles of SBA-15and HPMCP/SBA-15in different solutions

    另外,HPMCP(pKa值約為4.5~5.5)是一種生物兼容和pH敏感的聚合物,其表面存在一個pH控制的疏水作用和靜電斥力之間的敏感平衡.在模擬胃液中,HPMCP會因為表面羧基被質(zhì)子化,疏水作用占主導(dǎo)地位,從而包覆在SBA-15藥片上不溶解,使藥物難以釋放.因此,膜的厚度對載體的緩釋效果有著重要的影響,而干燥溫度無疑是影響膜厚度的一個重要因素[10].因此,我們考察了膜的干燥溫度對藥物釋放行為的影響.從圖5(a)可見,提高干燥溫度對藥物在模擬胃液中的釋放速度減緩效果非常明顯,樣品干燥溫度越高,5-Fu的釋放速度越慢,這說明提高干燥溫度可以使HPMCP的膜層變得更加致密,使藥物的緩釋效果增強.而在模擬腸液中,我們發(fā)現(xiàn)提高制樣時的干燥溫度對5-Fu的釋放速度基本沒有影響,5-Fu在短時間內(nèi)均可快速釋放(見圖5(b)),這主要是因為HPMCP在模擬腸液中,其表面的靜電斥力起主導(dǎo)作用,可使其快速溶解的緣故[13].

    圖5 膜的不同干燥溫度對5-Fu在HPMCP/SBA-15中的釋放的影響Fig.5The effect of drying temperature of HPMCP on the release of 5-Fu from HPMCP/SBA-15

    結(jié)論:通過簡單的提拉方法,將HPMCP聚合物膜成功包覆于負載有5-Fu的SBA-15藥片的表面,制備了pH敏感型藥物緩釋材料HPMCP/SBA-15,并且考察了其在模擬胃液和模擬腸液中的緩釋行為.研究發(fā)現(xiàn),在包覆HPMCP后,載體HPMCP/SBA-15能夠有效地減緩抗癌藥物5-Fu在模擬胃液中的釋放速度.同時,又不影響藥物在模擬腸液中的釋放速度,是一種較好的pH敏感型藥物緩釋材料.而且,膜的干燥溫度越高,載體的緩釋性能越強.HPMCP/SBA-15良好的pH敏感性能,有望使其實現(xiàn)對腫瘤組織的主動靶向和控制釋藥.

    [1]陳志和,黃靈珍.奧沙利鉑聯(lián)合5-氟尿嘧啶、亞葉酸鈣治療晚期大腸癌的臨床觀察 [J].醫(yī)學(xué)理論與實踐,2011,24(5):543-544.

    [2]季風(fēng)存,程若川,康俊升.5-氟尿嘧啶誘導(dǎo)直腸癌HR8348細胞凋亡作用的研究 [J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2003,10(6):564-567.

    [3]ANGELOS S,JOHANSSON E,STODDART J F,et al.Mesostructured silica supports for functional materials and molecular machines[J].Adv Funct Mater,2007,17(14):2261-2271.

    [4]VALLET-REGI M,RAMILA A,DEL REAL R P,et al.A new property of MCM-41:Drug delivery system[J].Chem Mater,2001,13(2):308-311.

    [5]RADU D R,LAI Cheng Yu,JEFTINIJA K,et al.A polyamidoamine dendrimer-capped mesoporous silica nanospherebased gene transfection reagent[J].J Am Chem Soc,2004,126(41):13216-13217.

    [6]SONG S W,HIDAJAT K,KAWI S.Functionalized SBA-15materials as carriers for controlled drug delivery:influence of surface properties on matrix-drug interactions[J].Langmuir,2005,21(21):9568-9575.

    [7]HORCAJADA P,RAMILA A,GERARD F.Influence of superficial organic modification of MCM-41matrices on drug delivery rate[J].Solid State Sci,2006,8(10):1243-1249.

    [8]YANG Qing,WANG Shi Chao,F(xiàn)AN Pei Wei,et al.pH-responsive carrier system based on carboxylic acid modified mesoporous silica and polyelectrolyte for drug delivery[J].Chem Mater,2005,17(24):5999-6003.

    [9]張憲康,沈健平.腸溶性藥用輔料HPMCP的合成研究 [J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,1993,24(3):104-107.

    [10]徐武軍,高 強,徐 耀,等.基于HPMCP包覆介孔SBA-15的pH敏感藥物緩釋系統(tǒng)[J].化學(xué)學(xué)報,2008,66(14):1658-1662.

    [11]梁麗蕓,郭 俊,譚必恩.5-氟尿嘧啶明膠微球的制備、表征及釋藥性能 [J].廣東化工,2009,36(5):117-119.

    [12]ZHAO Dong Yuan,F(xiàn)ENG Jiang Lin,HUO Qi Sheng,et al.Triblock copolymer syntheses of mesoporous silica with heriodic 50to 300angstrom pores[J].Science,1998,279:548-552.

    [13]QIU Yong,PARK K.Environment-sensitive hydrogels for drug delivery[J].Adv Drug Deliver Rev,2001,53(3):321-339.

    Release behavior of 5-fluorouracil in pH-sensitive molecular sieve drug release carrier

    WU Du-du1*,CHEN Zhi2,LONG Shuo-h(huán)ang1,SHI Zhi-h(huán)ai1,WU Rui-bin1

    (1.SchoolofPharmacy,GuangdongMedicalCollege,Dongguan523808,Guangdong,China;2.CenterofAnalysis,GuangdongMedicalCollege,Dongguan523808,Guangdong,China)

    A pH-sensitive mesoporous molecular sieve as drug release carrier was synthesized by coating SBA-15tablet with hydroxypropyl methylcellulose phthalate(HMPCP)so as to improve the cancer targeting ability and selectivity of antineoplastic agent 5-fluorouracil(5-Fu).Into the drug release carrier(HPMCP/SBA-15)was loaded 5-Fu by adsorption in the mixed solution of water and methanol(volume ratio 1:1).The releasing behavior of loaded 5-Fu in two kinds of release fluids with different pH environment,simulated intestinal fluid(SIF,pH=7.4)and simulated gastric fluid(SGF,pH =1.2),was examined.Results indicate that in SGF the coating carrier can effectively delay the release rate of 5-Fu,with release rate being only 15%after 4hof drug release.However,in SIF it has no obvious effect on the drug delivery rate,possibly due to the dissolution of HPMCP in SIF;and in this case the release rate reaches 80%after 4hof drug release.Moreover,the release behavior of 5-Fu is also dependent on the temperature for drying HPMCP,and higher drying temperature corresponds to better drug release performance of loaded 5-Fu in SGF.

    5-fluorouracil;hydroxypropyl methylcellulose;phthalate;pH-sensitive mesoporous molecular sieves;drug release behavior

    O 629.9

    A

    1008-1011(2012)01-0024-05

    2011-08-07.

    廣東省衛(wèi)生廳項目(B2009190),東莞市高等院校科研機構(gòu)項目(200910815254),2010年廣東省教育廳育苗工程,2010年廣東省大學(xué)生創(chuàng)新項目(KY1031).

    吳都督 (1981-),男,講師,博士.從事材料化學(xué)和藥劑學(xué)方面的研究.*

    ,E-mail:wududucz@126.com.

    猜你喜歡
    腸液胃液介孔
    功能介孔碳納米球的合成與應(yīng)用研究進展
    藏藥佐太在模擬胃液、腸液中的汞溶出差異
    中成藥(2018年10期)2018-10-26 03:41:28
    新型介孔碳對DMF吸脫附性能的研究
    早產(chǎn)兒胃液培養(yǎng)在早發(fā)性感染診斷中的價值
    瘤胃液在牛羊疾病中的臨床應(yīng)用
    有序介孔材料HMS的合成改性及應(yīng)用新發(fā)展
    生長豬空腸液中主要消化酶活性與飼糧養(yǎng)分消化率的相關(guān)性研究
    介孔二氧化硅制備自修復(fù)的疏水棉織物
    三種檢測方法在胃液隱血試驗中的臨床應(yīng)用評價
    口服洗腸液在結(jié)腸鏡檢查前腸道準備中的應(yīng)用及護理進展
    国产三级在线视频| 欧美性猛交黑人性爽| 中文字幕最新亚洲高清| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲一区二区三区不卡视频| 热99re8久久精品国产| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲 国产 在线| 国产高清三级在线| 视频区欧美日本亚洲| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产精品亚洲美女久久久| 国产免费男女视频| 真实男女啪啪啪动态图| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产爱豆传媒在线观看| 成年版毛片免费区| 欧美高清成人免费视频www| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 999久久久精品免费观看国产| 国产69精品久久久久777片 | 一进一出抽搐动态| 久久久久久大精品| 又粗又爽又猛毛片免费看| 成人精品一区二区免费| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 老司机午夜福利在线观看视频| 一个人免费在线观看电影 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 日本一二三区视频观看| 色在线成人网| www.精华液| 神马国产精品三级电影在线观看| 久久人妻av系列| 久久草成人影院| 香蕉国产在线看| 日韩精品青青久久久久久| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产高清视频在线观看网站| 欧美日本视频| 成年人黄色毛片网站| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 精品久久久久久,| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲国产精品999在线| 99国产精品一区二区三区| 久久久久精品国产欧美久久久| 禁无遮挡网站| 国产三级黄色录像| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 日韩精品青青久久久久久| 日韩免费av在线播放| 18禁观看日本| 色哟哟哟哟哟哟| 波多野结衣巨乳人妻| 熟女人妻精品中文字幕| 99riav亚洲国产免费| cao死你这个sao货| 国产精品久久久av美女十八| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲中文日韩欧美视频| 毛片女人毛片| 国产成年人精品一区二区| 在线免费观看的www视频| 国产欧美日韩一区二区三| 久久99热这里只有精品18| 美女大奶头视频| 在线看三级毛片| 亚洲国产欧美人成| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产免费男女视频| 制服人妻中文乱码| 两性夫妻黄色片| 国产午夜精品久久久久久| 村上凉子中文字幕在线| 网址你懂的国产日韩在线| 精品久久蜜臀av无| 草草在线视频免费看| 一本精品99久久精品77| 88av欧美| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 不卡av一区二区三区| 精品国产三级普通话版| 制服人妻中文乱码| 天天添夜夜摸| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美黑人巨大hd| 国产精品九九99| www.999成人在线观看| 一进一出好大好爽视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 观看免费一级毛片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 精华霜和精华液先用哪个| 日韩中文字幕欧美一区二区| xxx96com| 老司机午夜十八禁免费视频| 91在线精品国自产拍蜜月 | 亚洲中文字幕日韩| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲专区字幕在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 99国产综合亚洲精品| 日韩欧美一区二区三区在线观看| www.自偷自拍.com| 麻豆成人av在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 久久人妻av系列| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久久色成人| 色播亚洲综合网| 国产三级在线视频| 久久久精品大字幕| 精品久久久久久成人av| 欧美中文综合在线视频| 日本三级黄在线观看| 69av精品久久久久久| 久久精品人妻少妇| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 又紧又爽又黄一区二区| 一区二区三区激情视频| 亚洲电影在线观看av| av在线蜜桃| 免费观看精品视频网站| 特大巨黑吊av在线直播| 高清在线国产一区| tocl精华| 成人午夜高清在线视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 999久久久国产精品视频| 91字幕亚洲| 男人舔奶头视频| 最好的美女福利视频网| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 97碰自拍视频| 无限看片的www在线观看| 日日夜夜操网爽| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品久久蜜臀av无| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲国产欧美一区二区综合| 听说在线观看完整版免费高清| 99精品欧美一区二区三区四区| 在线视频色国产色| 午夜免费成人在线视频| 久久久久久九九精品二区国产| 99视频精品全部免费 在线 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 99久久精品热视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 成人av一区二区三区在线看| 久久热在线av| 特大巨黑吊av在线直播| 国产成人啪精品午夜网站| 国产久久久一区二区三区| xxx96com| 亚洲国产色片| 欧美成人性av电影在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 后天国语完整版免费观看| a级毛片a级免费在线| 深夜精品福利| 少妇丰满av| 国产又色又爽无遮挡免费看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国内精品久久久久久久电影| 免费看十八禁软件| 一个人免费在线观看电影 | 婷婷丁香在线五月| 欧美中文综合在线视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 99国产精品一区二区三区| 国产人伦9x9x在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 女人被狂操c到高潮| 黄色丝袜av网址大全| 看黄色毛片网站| 国产成人av激情在线播放| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 老司机福利观看| 少妇的丰满在线观看| 免费在线观看成人毛片| 午夜激情福利司机影院| 熟女人妻精品中文字幕| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲五月婷婷丁香| 久久九九热精品免费| 嫩草影院入口| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 丝袜人妻中文字幕| 精品国产乱码久久久久久男人| 淫秽高清视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 国产三级黄色录像| 亚洲av电影在线进入| 天天添夜夜摸| a级毛片a级免费在线| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 一二三四社区在线视频社区8| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久久久久久久久黄片| 国产精品一区二区三区四区久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久精品综合一区二区三区| 国产成年人精品一区二区| 国产av不卡久久| 国产一区二区在线av高清观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 两性夫妻黄色片| 亚洲精品456在线播放app | 久久精品综合一区二区三区| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美性猛交黑人性爽| 日本a在线网址| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久性视频一级片| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩有码中文字幕| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线免费观看不下载黄p国产 | www.www免费av| 1024手机看黄色片| 精品久久蜜臀av无| 国产综合懂色| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 男人舔女人的私密视频| 岛国视频午夜一区免费看| 91久久精品国产一区二区成人 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲午夜理论影院| 一区二区三区国产精品乱码| 一本综合久久免费| 日韩精品中文字幕看吧| 在线观看66精品国产| 三级国产精品欧美在线观看 | 嫩草影院入口| 黄片大片在线免费观看| av女优亚洲男人天堂 | 成人特级黄色片久久久久久久| 国产精品久久久久久久电影 | 老熟妇乱子伦视频在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 三级国产精品欧美在线观看 | 桃红色精品国产亚洲av| a在线观看视频网站| 香蕉国产在线看| x7x7x7水蜜桃| 午夜激情福利司机影院| 在线观看日韩欧美| 国产v大片淫在线免费观看| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美激情久久久久久爽电影| 女同久久另类99精品国产91| 在线国产一区二区在线| 婷婷六月久久综合丁香| 成人三级黄色视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 两个人视频免费观看高清| 日日干狠狠操夜夜爽| 桃红色精品国产亚洲av| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲精品456在线播放app | 99热只有精品国产| 亚洲熟妇熟女久久| cao死你这个sao货| av女优亚洲男人天堂 | 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 中文字幕最新亚洲高清| 国产97色在线日韩免费| 婷婷丁香在线五月| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 色综合欧美亚洲国产小说| 淫妇啪啪啪对白视频| 一本综合久久免费| 三级国产精品欧美在线观看 | 久久久久九九精品影院| www.精华液| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一个人看的www免费观看视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 中文字幕熟女人妻在线| 午夜激情福利司机影院| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲成av人片在线播放无| 国产亚洲av高清不卡| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲七黄色美女视频| 高清毛片免费观看视频网站| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产一区二区三区视频了| 日本与韩国留学比较| 久久久水蜜桃国产精品网| 又大又爽又粗| 精品久久久久久成人av| 日本熟妇午夜| 丁香欧美五月| av在线天堂中文字幕| 亚洲国产欧美一区二区综合| 黄频高清免费视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| tocl精华| 中出人妻视频一区二区| 99热精品在线国产| 久久久久免费精品人妻一区二区| av福利片在线观看| 嫩草影视91久久| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久精品影院6| 欧美黑人巨大hd| 久久这里只有精品19| 日本三级黄在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 免费看a级黄色片| 国产精品免费一区二区三区在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 成人无遮挡网站| 精品一区二区三区四区五区乱码| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产午夜精品论理片| 国产午夜福利久久久久久| av国产免费在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 一夜夜www| 国产真实乱freesex| 国产成人啪精品午夜网站| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲国产精品合色在线| 成人国产一区最新在线观看| 在线永久观看黄色视频| 免费看美女性在线毛片视频| 成年免费大片在线观看| 午夜日韩欧美国产| 午夜福利在线在线| 国产成年人精品一区二区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| a级毛片在线看网站| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲国产看品久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 男插女下体视频免费在线播放| 人妻久久中文字幕网| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久欧美精品欧美久久欧美| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 在线a可以看的网站| 麻豆久久精品国产亚洲av| 精品久久久久久,| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产午夜精品论理片| 亚洲自拍偷在线| 亚洲五月天丁香| 国产精品久久久av美女十八| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| tocl精华| 国产成人欧美在线观看| 日韩精品中文字幕看吧| 搡老岳熟女国产| 色综合站精品国产| 国产成人aa在线观看| 中文字幕高清在线视频| 久久久国产欧美日韩av| 国产精品爽爽va在线观看网站| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产真实乱freesex| 看黄色毛片网站| www日本黄色视频网| 51午夜福利影视在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产亚洲av高清不卡| 一a级毛片在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 国产日本99.免费观看| 麻豆一二三区av精品| 日韩欧美 国产精品| 波多野结衣高清作品| 午夜精品在线福利| 国产成人av激情在线播放| 亚洲熟女毛片儿| 日韩欧美三级三区| 免费搜索国产男女视频| 免费在线观看日本一区| 国产野战对白在线观看| 国产av不卡久久| 国产真实乱freesex| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲精品在线美女| 欧美午夜高清在线| www.www免费av| 中文字幕最新亚洲高清| 精品不卡国产一区二区三区| 香蕉av资源在线| 99riav亚洲国产免费| 天堂影院成人在线观看| 在线a可以看的网站| 久久中文看片网| 这个男人来自地球电影免费观看| 午夜成年电影在线免费观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 精品国产乱码久久久久久男人| 国内精品久久久久久久电影| 日日夜夜操网爽| 午夜福利在线在线| 香蕉丝袜av| 欧美国产日韩亚洲一区| 久久久久久人人人人人| 两个人视频免费观看高清| 久久国产精品人妻蜜桃| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品,欧美在线| 色精品久久人妻99蜜桃| 可以在线观看毛片的网站| av黄色大香蕉| 99国产精品一区二区三区| 久久亚洲精品不卡| 嫩草影院入口| 久久午夜综合久久蜜桃| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产久久久一区二区三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲,欧美精品.| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲午夜理论影院| 成人三级黄色视频| 91久久精品国产一区二区成人 | 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲avbb在线观看| 男人舔女人的私密视频| 亚洲国产精品成人综合色| 真人做人爱边吃奶动态| 美女午夜性视频免费| 欧美乱妇无乱码| 色老头精品视频在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 少妇的丰满在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 日本精品一区二区三区蜜桃| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲一区二区三区不卡视频| avwww免费| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产毛片a区久久久久| 哪里可以看免费的av片| 很黄的视频免费| 手机成人av网站| 天堂动漫精品| 夜夜夜夜夜久久久久| 黄色日韩在线| 一二三四社区在线视频社区8| 精品无人区乱码1区二区| 757午夜福利合集在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆 | 国产真实乱freesex| 亚洲一区二区三区不卡视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 一级a爱片免费观看的视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日本 欧美在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美日韩乱码在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线视频色国产色| 欧美色视频一区免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲中文av在线| 高清在线国产一区| 国产三级中文精品| 国产精品 国内视频| 看片在线看免费视频| 欧美在线黄色| 亚洲人成电影免费在线| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 女人被狂操c到高潮| 人妻夜夜爽99麻豆av| 岛国在线免费视频观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 国内揄拍国产精品人妻在线| 麻豆成人午夜福利视频| 老司机在亚洲福利影院| 中文字幕熟女人妻在线| 日本一本二区三区精品| 日本与韩国留学比较| 免费人成视频x8x8入口观看| 两个人看的免费小视频| 五月伊人婷婷丁香| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲国产高清在线一区二区三| 日韩欧美三级三区| 久9热在线精品视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 两个人的视频大全免费| 一夜夜www| 中文字幕高清在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜福利在线在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 又大又爽又粗| 免费无遮挡裸体视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲国产精品sss在线观看| 午夜激情欧美在线| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产一区二区激情短视频| 日本在线视频免费播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99riav亚洲国产免费| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲国产中文字幕在线视频| 午夜福利在线在线| 欧美色视频一区免费| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 偷拍熟女少妇极品色| 成人精品一区二区免费| 99精品欧美一区二区三区四区| 色尼玛亚洲综合影院| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 欧美中文日本在线观看视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 好男人在线观看高清免费视频| 国产精品1区2区在线观看.| 天天添夜夜摸| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 在线看三级毛片| 色哟哟哟哟哟哟| 又大又爽又粗| 精品福利观看| 色播亚洲综合网| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产精品女同一区二区软件 | 国产淫片久久久久久久久 | 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久性视频一级片| 网址你懂的国产日韩在线| 免费看美女性在线毛片视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品久久电影中文字幕| 日本与韩国留学比较| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 91久久精品国产一区二区成人 | 日本一二三区视频观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 丁香六月欧美| АⅤ资源中文在线天堂| 九色国产91popny在线| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲精品456在线播放app | h日本视频在线播放| 观看美女的网站| 欧美日韩国产亚洲二区| 色综合站精品国产| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 波多野结衣高清作品| 中文在线观看免费www的网站| 日本 av在线| 欧美中文综合在线视频| 精品国产三级普通话版| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲国产精品999在线| 久久草成人影院| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 少妇的丰满在线观看| 男女午夜视频在线观看| 99热6这里只有精品| 男人舔女人的私密视频| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 久久久久久人人人人人| 99在线视频只有这里精品首页| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日本一二三区视频观看| 中文亚洲av片在线观看爽|