間皮素、D2－40和Glypican3在卵巢腫瘤中的鑒別診斷意義

印永祥，趙 華，龔 華

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫市婦幼保健院 病理科，江蘇 無錫214002）

卵巢癌是第三大婦科惡性腫瘤，卵巢透明細(xì)胞癌臨床較少見，約占卵巢上皮性惡性腫瘤的5%－10%，但在婦科病理鑒別診斷中卻占有相當(dāng)比例。與卵巢透明細(xì)胞癌相關(guān)的鑒別診斷包括原始生殖細(xì)胞腫瘤（特別是卵黃囊瘤和無性細(xì)胞瘤）及卵巢漿液性囊腺癌，卵巢癌的分類不同與預(yù)后及臨床處理大不相同，需要更加客觀的指標(biāo)用來鑒別卵巢癌。本文的目的旨在 mesothelin、D2－40、Glypican3在卵巢癌診斷和鑒別診斷中的作用加以探討。

1 材料與方法

1.1材料選取無錫市婦幼保健醫(yī)院2003～2011年以國際FIGO診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷的卵巢漿液性囊腺癌12例，卵巢透明細(xì)胞癌10例，卵巢卵黃囊瘤10例和卵巢無性細(xì)胞瘤10例。所有病例均未行放、化療。

1.2方法鼠抗人間皮素mesothelin單克隆抗體購置epitomics公司（1：2000，克隆號EPR2685），即用型鼠抗人D2－40單克隆抗體（克隆號D2－40）、即用型鼠抗人磷脂酰肌醇聚糖Glypican3單克隆抗體（克隆號1G12）購置福州邁新生物技術(shù)有限公司。全部標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，行常規(guī)石蠟包埋，4微米連續(xù)切片，染色按MaxVisionTM2試劑盒說明書操作。以抗體稀釋液替代一抗作為陰性對照，以公司提供的陽性片作為陽性對照。

1.3結(jié)果判定在雙肓下進(jìn)行。間皮素和D2－40在細(xì)胞膜上著色，Glypican3在細(xì)胞質(zhì)上著色。

2 結(jié)果

間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中全都是彌漫陽性，透明細(xì)胞癌中陽性比例達(dá)90%，在卵黃囊瘤和無性細(xì)胞瘤呈陰性表達(dá)。D2－40在無性細(xì)胞瘤上彌漫陽性率90%，在卵巢漿液性囊腺癌中有20%的局灶陽性，在透明細(xì)胞癌和卵黃囊瘤呈陰性表達(dá)。Glypican3在卵黃囊瘤上90%呈彌漫表達(dá)，10%局灶表達(dá)，呈100%陽性；在透明細(xì)胞癌上50%的彌漫陽性，20%的局灶陽性；在卵巢漿液性囊腺癌和無性細(xì)胞瘤上呈陰性表達(dá)。見表1。

3 討論

卵巢透明細(xì)胞癌一種較常見的婦科腫瘤，具有早期轉(zhuǎn)移、早期復(fù)發(fā)、對化療藥物易耐藥、預(yù)后差的特點［1］。間皮素是卵巢上皮性癌的新的篩查標(biāo)記物和預(yù)后分子［2］。間皮素是一種細(xì)胞表面糖蛋白，通常僅表達(dá)在胸膜腔、腹膜腔和心包腔的間皮細(xì)胞。間皮素是一種分化抗原，近年來發(fā)現(xiàn)在惡性胸膜間皮瘤、胰腺癌和卵巢癌等惡性腫瘤中過表達(dá)，并可能參與腫瘤的黏附轉(zhuǎn)移，與卵巢癌細(xì)胞在腹腔內(nèi)的種植轉(zhuǎn)移有關(guān)［3］。間皮素表達(dá)與卵巢癌病理分期、分級相關(guān)，說明間皮素可能通過增強(qiáng)細(xì)胞黏附來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞種植在腹膜上，導(dǎo)致腫瘤擴(kuò)散。測定間皮素的量可以幫助判斷卵巢癌的預(yù)后［4］和指導(dǎo)進(jìn)行靶向治療。間皮素和人類附睪蛋白HE4作為卵巢癌的生物標(biāo)記，最近有人報道與間皮素相比，CA125和HE4結(jié)合具有更高的敏感性檢測卵巢癌和早期卵巢癌［5］。透明細(xì)胞癌需與漿液性癌進(jìn)行鑒別，我們的研究發(fā)現(xiàn)，間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中100%彌漫陽性；透明細(xì)胞癌顯示80%局灶陽性，10%彌漫陽性；在區(qū)別卵巢漿液性癌與透明細(xì)胞癌中有明顯的鑒別意義。最近研究發(fā)現(xiàn)在間皮素在14例卵巢漿液性囊腺癌全陽性，8例透明細(xì)胞癌中有6例陽性，3例子宮內(nèi)膜樣癌全陽性，4例移行細(xì)胞癌全陽性［6］，與本文研究相符。

表1 mesothelin、D2－40、Glypican3在卵巢癌上的表達(dá)

圖1 間皮素、Glypican3和D2－40在卵巢癌上的表達(dá)

卵巢透明細(xì)胞癌（CCCs）是最常與原發(fā)性生殖細(xì)胞腫瘤相混淆的卵巢表面上皮性腫瘤，其診斷有時較困難。無性細(xì)胞癌和卵黃囊瘤中可出現(xiàn)透明細(xì)胞成分，卵巢透明細(xì)胞癌還需與無性細(xì)胞癌和惡性卵黃囊瘤鑒別。D2－40表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，而不表達(dá)血管內(nèi)皮細(xì)胞，通常用于標(biāo)記組織中的淋巴管內(nèi)皮，有助于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞源性腫瘤診斷及判斷其他腫瘤組織是否發(fā)生淋巴道浸潤和轉(zhuǎn)移。D2－40是高敏感性無性細(xì)胞瘤免疫組化標(biāo)記物，在無性細(xì)胞瘤診斷和卵巢原始生殖細(xì)胞腫瘤的鑒別診斷［7］中很有幫助。我們的研究同樣發(fā)現(xiàn)，D2－40在無性細(xì)胞瘤中90%彌漫陽性，在卵黃囊瘤不表達(dá)；Glypican3在卵黃囊瘤90%彌漫陽性、10%局灶陽性。卵黃囊瘤最重要的IHC表達(dá)是AFP陽性表達(dá)，75%以上的腫瘤細(xì)胞質(zhì)陽性；透明細(xì)胞癌CD15陽性，AFP陰性，可與卵黃囊瘤相區(qū)別［8］。但我們在實際工作中發(fā)現(xiàn)AFP在卵黃囊中表達(dá)并不理想，卵黃囊瘤細(xì)胞能與Glypican3蛋白產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

Glypican3蛋白是一種硫酸肝素糖蛋白和癌胚抗原。我們的數(shù)據(jù)表明Glypican3在透明細(xì)胞癌上50%的彌漫陽性，20%的局灶陽性。同樣文獻(xiàn)報道，Stadlmannn等［9］對308名卵巢癌患者的腫瘤組織進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)其中18% 的腫瘤組織表達(dá)Glypican3，超過60% 的卵巢透明細(xì)胞癌表達(dá)Glypican3，以上結(jié)果提示，Glypican3可能成為卵巢透明細(xì)胞癌的腫瘤標(biāo)志物。但也有相反的報道，在大部分卵巢透明細(xì)胞癌中檢測發(fā)現(xiàn)Glypican3表達(dá)陰性［10］。最近報道Glypican3還與Ⅰ期透明細(xì)胞癌的預(yù)后密切相關(guān)，Glypican3表達(dá)陽性的患者預(yù)后差，且傾向于對紫杉類藥物耐藥［11］在手術(shù)病理學(xué)檢查中，區(qū)別卵黃囊瘤和卵巢透明細(xì)胞腺癌組織比較困難，發(fā)現(xiàn)Glypican 3在卵黃囊瘤中彌漫性陽性率為100%，而在卵巢透明細(xì)胞腺癌中彌漫性陽性率只有10%，有望成為有效的鑒別診斷標(biāo)志［12］。

過去認(rèn)為卵巢透明細(xì)胞癌和卵黃囊瘤均來自于中腎，SCULLY發(fā)現(xiàn)與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)，提示透明細(xì)胞癌來自于卵巢表面上皮。現(xiàn)其Mullerian性質(zhì)已經(jīng)被廣泛接受，但在某些病例中，仍存在鑒別診斷問題，因這些腫瘤組織組織學(xué)表現(xiàn)有一定程度的重疊。知曉患者年齡、臨床情況及血清AFP水平有助于鑒別。一般而言，P53在透明細(xì)胞癌中可陰性表達(dá)，也有偶有表達(dá)，其強(qiáng)度及范圍要比漿液性癌弱。WT1與P53相似。故P53和WT1胞核彌漫性強(qiáng)陽性可支持漿液性癌診斷［8］。除了免疫組化指標(biāo)有助于鑒別診斷，還可能通過臨床表現(xiàn)、年齡等指標(biāo)輔助診斷。無性細(xì)胞瘤一般發(fā)生于年輕人。而透明細(xì)胞癌一般發(fā)生于老年人。

我們首先發(fā)現(xiàn)間皮素免疫組化染色有助于卵巢腫瘤的診斷，間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中彌漫性高表達(dá)，在卵巢透明細(xì)胞癌中局灶表達(dá)，D2－40在無性細(xì)胞瘤中表達(dá)的敏感性高，Glypican3在卵黃囊瘤中高表達(dá)。當(dāng)卵巢腫瘤組織學(xué)難以區(qū)分時，在卵巢癌的疑難診斷上，通過這三種抗體能對卵巢漿液性囊腺癌、透明細(xì)胞癌、無性細(xì)胞瘤和卵黃囊瘤相鑒別。當(dāng)然，當(dāng)免疫標(biāo)記物與組織學(xué)相左時，還是以組織HE為主。

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