田皂角水提物藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究

　　摘要：目的：觀察田皂角水提物的藥理作用。方法：采用試管法抗菌、耳廓腫脹法、扭體法、皮膚過敏試驗(yàn)和急性毒性試驗(yàn)，進(jìn)行抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗過敏試驗(yàn)。結(jié)果：田皂角水提物可抗菌；減輕小鼠耳廓腫脹；減少小鼠扭體次數(shù)；降低皮膚過敏反應(yīng)。急性毒性試驗(yàn)表明，田皂角水提物的最大給藥量為150 g生藥/kg。結(jié)論：田皂角水提物具有一定的抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛和抗過敏作用。
　　關(guān)鍵詞：田皂角水提物；藥理試驗(yàn)；抗菌；抗炎；鎮(zhèn)痛；抗過敏
　　中圖分類號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007-2349（2011）12-0063-02
　　
　　田皂角（Aeschynornene indicaL.）別名合萌、水皂角。為蝶形花科植物田皂角，分布于華北、華東、中南、西南等地。味甘、苦，性微寒?？汕鍩崂麧?，祛風(fēng)明目，通乳。主治熱淋、血淋、水腫、泄瀉、痢疾、目赤腫痛等癥［1］。關(guān)于其化學(xué)成分和藥理研究未見報(bào)道。本文根據(jù)其民間功用，對(duì)田皂角水提物進(jìn)行相關(guān)藥理試驗(yàn)，以期發(fā)現(xiàn)新的藥用途徑，為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。現(xiàn)將研究報(bào)告如下。
　　1實(shí)驗(yàn)材料
　　1.1受試藥物田皂角水提物（5.19 g生藥/g膏），由本院中藥化學(xué)研究所提供。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水研磨配制成藥液備用。阿司匹林腸溶片為武漢遠(yuǎn)大制藥集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：081101。地塞米松為天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：090611。息斯敏，西安楊森制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)090218967。
　　1.2動(dòng)物昆明種小鼠，清潔級(jí)，體重18~22 g，雌雄各半。由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK桂2003—0003。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調(diào)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，室溫：（22±2）℃，相對(duì)濕度：（60±2）％，喂顆粒標(biāo)準(zhǔn)飼料，自由飲水和攝食。
　　1.3儀器722型光柵分光光度計(jì)，上海分析儀器三廠產(chǎn)品。FA1004-型萬(wàn)分之一電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。
　　1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用PEMS 3.1統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s ）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。
　　2方法與結(jié)果
　　2.1抗菌試驗(yàn)取田皂角水提物用水配制成試驗(yàn)藥液，115 ℃高壓滅菌20 min，備用。采用液體試管二倍稀釋法，用營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基將供試液作系列稀釋，使藥液濃度為1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024，分裝試管，每管1.0 mL，第11管作為陽(yáng)性對(duì)照，第12管作為陰性對(duì)照。除陰性對(duì)照管外，每管接種100，000CFU/mL相應(yīng)菌液0.1 mL，分別接種大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌。細(xì)菌置35 ℃~37 ℃培養(yǎng)24 h，真菌置25 ℃~28 ℃培養(yǎng)24~48 h，將各管培養(yǎng)物分別接種于相應(yīng)的不含藥物的瓊脂培養(yǎng)基平板上，細(xì)菌置35 ℃~37 ℃培養(yǎng)24 h，真菌置25 ℃~28 ℃培養(yǎng)24~48 h，以生長(zhǎng)菌落不超過5個(gè)者為田皂角水提物的最小抑菌濃度（MIC）。結(jié)果見表1。
　　表1田皂角水提物體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果
　　試驗(yàn)菌種菌號(hào)藥物最低抑菌濃度（MIC）稀釋度藥物濃度/mg?mL-1金黃色葡萄球菌260031∶3211.71表皮葡萄球菌260691∶1623.43大腸埃希桿菌441021∶1623.43乙型副傷寒沙門菌500941∶493.75福氏志賀氏菌515721∶846.87銅綠假單胞菌101041∶846.87枯草芽孢桿菌635011∶3211.71白色念珠菌101041∶1623.43結(jié)果表明，田皂角水提物對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌有較強(qiáng)抗菌作用；對(duì)白色念珠菌、大腸桿菌、表皮葡萄球菌具有中度的抗菌作用；對(duì)乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀氏菌、銅綠假單胞菌具有低度抗菌作用。
　　2.2對(duì)醋酸所致小鼠扭體次數(shù)的影響［2］取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，田皂角水提物高、中、低劑量（15.0、7.5、5.0 g/kg）組和陽(yáng)性藥阿斯匹林（0.2 g/kg）組，每組10只。每天灌胃給藥1次，空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水，連續(xù)給予5 d。于末次給藥后1 h，每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，立即觀察并記錄20 min內(nèi)各小鼠的扭體次數(shù)。比較給藥組與對(duì)照組之間的差異，評(píng)價(jià)受試藥物的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果見表2。
　　表2田皂角水提物對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響（ ±s ，n=10）
　　組別劑量/g?kg-1扭體次數(shù)空白對(duì)照組—19.8±13.9阿司匹林0.27.8±5.3*田皂角水提物15.08.8±6.1*田皂角水提物7.58.2±4.5*田皂角水提物5.012.9±10.3與空白對(duì)照組比較，*P<0.05
　　結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，田皂角水提物大、中劑量組及阿司匹林組均明顯減少小鼠扭體次數(shù)，提示田皂角水提物具有一定鎮(zhèn)痛作用。
　　2.3對(duì)巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的抑制作用［3］取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，田皂角水提物高、中、低劑量（15.0、7.5、5.0 g/kg）組和陽(yáng)性藥地塞米松（0.0045 g/kg）組，每組10只。用藥各組每天灌胃給藥1次，空白對(duì)照組給予等體積蒸餾水，連續(xù)給予7 d。于末次給藥0.5 h后，用微量注射器取（0.05 mL 2%）巴豆油溶液涂于小鼠右耳，待4 h后處死小鼠。立即用口徑為8 mm的打孔器，沿著小鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后在電子天平上分別稱重，以兩耳片重量（mg）的差值作為腫脹程度指標(biāo)，并求出百分抑制率（%）。結(jié)果見表3。
　　表3田皂角水提物對(duì)巴豆油引起小鼠耳廓腫脹的影響（ ±s ，n=10）
　　組別劑量/g?kg-1腫脹度/mg抑制率（%）空白對(duì)照組—17.09±4.39—地塞米松0.004511.62±4.14*32.0田皂角水提物15.013.25±2.55*22.5田皂角水提物7.512.98±3.11*24.0田皂角水提物5.013.90±5.6318.7與空白對(duì)照組比較，*P<0.05
　　結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，田皂角水提物大、中劑量組及地塞米松組均可明顯降低小鼠耳廓腫脹度，提示田皂角水提物具有抗炎作用。
　　2.4小鼠被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)［4］抗原：醫(yī)用天花粉。佐劑：4%氫氧化鋁凝膠。臨用時(shí)以3.75 mg天花粉溶于1.5 mL氫氧化鋁凝膠中。致敏：健康小鼠10只，體重18~22 g，將上述天花粉氫氧化鋁凝膠混懸液腳掌注射，兩只后腳掌各注入0.05 mL，共注射0.1 mL。15 d后，斷頭取血，離心取抗血清備用。
　　被動(dòng)皮膚致敏：另取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，田皂角水提物高、中、低劑量（15.0、7.5、5.0 g/kg）組和陽(yáng)<strong style="position:abs