OX40/OX40L與疾病

劉 純（綜述），王玉亮（審校）

（1.天津市第一中心醫(yī)院輸血科，天津 300192;2.衛(wèi)生部危重病急救醫(yī)學(xué)重點實驗室，天津 300192）

OX40以及OX40L屬于腫瘤壞死因子受體超家族成員/腫瘤壞死因子超家族成員，OX40/OX40L相互作用在炎性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤以及移植免疫的發(fā)生、發(fā)展中起非常重要的作用。近年來，此研究越來越受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注，現(xiàn)對其進展予以綜述。

1 OX40與炎性疾病

炎癥性腸病是以反復(fù)發(fā)作的慢性腸道炎癥為特點的一組疾病，T細(xì)胞的異常活化和功能紊亂是炎癥性腸病發(fā)生和持續(xù)的關(guān)鍵。王曉娣等［1］研究OX40分子在潰瘍性結(jié)腸炎患者病變部位中的表達，結(jié)果顯示潰瘍性結(jié)腸炎病變部位腸黏膜固有層CD4+T淋巴細(xì)胞OX40表達明顯高于潰瘍性結(jié)腸炎患者非病變部位CD4

+T淋巴細(xì)胞的表達，以及潰瘍性結(jié)腸炎患者外周血與健康對照者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞OX40的表達水平?？筄X40單抗可明顯增強病變部位腸黏膜固有層CD4+T淋巴細(xì)胞的增生反應(yīng)。相反，抗OX40L單抗則能明顯抑制病變部位腸黏膜固有層CD4

+T淋巴細(xì)胞的增生，可能是一種有效治療潰瘍性結(jié)腸炎的新方法。Obermeier等［2］在慢性腸炎鼠模型的實驗研究中指出，病變結(jié)腸炎癥部位CD4

+OX40+T細(xì)胞浸潤增加，而白細(xì)胞介素10 mRNA的表達水平明顯降低，共刺激分子OX40/OX40L的相互作用使慢性腸炎持續(xù)存在。Totsuka等［3］研究顯示，抗OX40L單抗能減少CD4+T細(xì)胞在鼠結(jié)腸的浸潤以及抑制腸黏膜固有層CD4+T細(xì)胞分泌Th1類細(xì)胞因子（干擾素γ、白細(xì)胞介素2、腫瘤壞死因子α）。上述研究表明，OX40/OX40L分子的相互作用在T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎中起著非常重要的作用。

Liu等［4］研究了40例穩(wěn)定型心絞痛患者、70例不穩(wěn)定型心絞痛患者和40例急性心肌梗死患者單核細(xì)胞OX40L表達水平以及血清可溶性O(shè)X40L水平，結(jié)果提示伴有急性冠狀動脈綜合征的患者其OX40L表達增加，可引起促炎性反應(yīng)以及促血栓形成，從而加重動脈粥樣硬化病情的發(fā)展及動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，提示OX40L對于預(yù)測急性冠狀動脈綜合征的嚴(yán)重程度是一個有價值的標(biāo)志物。

2 OX40與自身免疫性疾病

與自身免疫性疾病有關(guān)的許多模型顯示出自身免疫性疾病與OX40、OX40L共刺激分子相關(guān)。銀屑病是一種T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性皮膚病，自身反應(yīng)性T細(xì)胞是本病發(fā)生的關(guān)鍵。Matsumura等［5］在所有25例損傷性銀屑病皮膚標(biāo)本都檢測出OX40表達的陽性細(xì)胞，而在11例未損傷性銀屑病皮膚標(biāo)本未檢測出OX40表達的陽性細(xì)胞。OX40表達的陽性細(xì)胞主要分布于真皮乳頭內(nèi)膨脹扭曲的脈管周圍。在真皮乳頭下層也發(fā)現(xiàn)OX40表達的陽性細(xì)胞，但表達量較少，而OX40L表達量較少或不表達。深部真皮未發(fā)現(xiàn)OX40表達。OX40L主要表達于乳頭狀真皮血管。重癥肌無力是乙酰膽堿受體抗體介導(dǎo)的、細(xì)胞免疫依賴的以及補體參與的一種神經(jīng)-肌肉接頭處傳遞障礙的器官特異性自身免疫性疾病。在重癥肌無力的發(fā)病機制中，T、B細(xì)胞的異常活化及相互作用是疾病發(fā)生的關(guān)鍵，并參與重癥肌無力的發(fā)病過程。Zhao等［6］研究結(jié)果提示，OX40可能參與了重癥肌無力的發(fā)病和病情加重過程，CD4+T細(xì)胞OX40的高表達可能是伴胸腺增生的重癥肌無力發(fā)病機制之一，阻斷OX40/OX40L共刺激通路將成為人重癥肌無力的一個新的治療手段。

Patschan 等［7］研究顯示，CD4+T細(xì)胞上OX40的高表達與系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎病及疾病的活動性指數(shù)顯著相關(guān)，應(yīng)用抗OX40單克隆抗體可能是狼瘡腎病的一個新的治療手段［7-9］。周燕斌等［10］研究顯示，狼瘡樣BXSB小鼠模型脾組織存在CD4+OX40+、CD8+OX40+細(xì)胞百分比的高表達以及OX40/OX40L mRNA的高表達。中藥-狼瘡方可減輕狼瘡樣小鼠高丙種球蛋白血癥，減少體內(nèi)自身抗體產(chǎn)生，對OX40/OX40L存在下調(diào)作用，與潑尼松作用相同，抑制T、B細(xì)胞的異?；罨?，能有效地治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡。鄧佳等［11］研究顯示，不同亞型紅斑狼瘡的皮損及活動期系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)庵苎馨图?xì)胞中OX40及Bcl-2的表達水平均顯著增高，而不同亞型紅斑狼瘡組間無顯著性差異。OX40及Bcl-2在紅斑狼瘡發(fā)病中可能發(fā)揮重要作用，為尋找紅斑狼瘡診斷與治療的新靶點提供了新的思路。

3 OX40與腫瘤

Shi等［12］實驗研究顯示，OX40、OX40L 在乳腺癌中的陽性表達與腫瘤病理分級、瘤塊大小顯著相關(guān)。OX40表達隨著瘤塊的增大其陽性率增高，隨病理分級的升高而降低;OX40L陽性表達率隨著瘤塊的增大而遞減，隨病理分級的升高而增高，不利于激發(fā)T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺滅。Petty等［13］研究顯示，結(jié)腸癌患者的腫瘤組織和腸系膜淋巴結(jié)中均可檢測到OX40高表達，而正常結(jié)腸組織不表達OX40。高表達OX40的腫瘤患者平均存活時間（平均47個月）比低表達OX40的患者（平均35個月）明顯延長，但與腫瘤分期無關(guān)。體外用抗OX40單抗及OX40L免疫球蛋白融合蛋白可提高T細(xì)胞對腫瘤的殺傷能力。Sarff等［14］研究顯示，在前哨淋巴結(jié)內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞OX40的表達水平隨原發(fā)性黑素瘤晚期病程（腫瘤分期提高、潰瘍形成）而減少。與其他研究報道相似［15-16］，其結(jié)果建議晚期原發(fā)性黑素瘤在前哨淋巴結(jié)微環(huán)境中起免疫抑制作用，可由T細(xì)胞激活的標(biāo)志物OX40來評估腫瘤的惡性程度。So等［17］實驗研究顯示，OX40刺激能強烈對抗初始CD4+T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槠鹈庖咭种谱饔玫恼{(diào)節(jié)T細(xì)胞。實驗有望通過可溶性O(shè)X40L或抗OX40單克隆抗體治療來逆轉(zhuǎn)黑素瘤所形成的免疫抑制。對于有關(guān)OX40與年齡相關(guān)性免疫系統(tǒng)衰老的實驗研究中發(fā)現(xiàn)，抗OX40抗體可以加強腫瘤免疫，同時給予抗OX40抗體以及前炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素12，可以部分逆轉(zhuǎn)中年鼠效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量減少的趨勢，并部分恢復(fù)其抗腫瘤免疫反應(yīng)的能力［18］。

4 OX40與移植免疫

馮灑然等［19］在研究移植物免疫耐受體外實驗中顯示，甲氧基聚乙二醇衍生物可明顯遮蔽淋巴細(xì)胞表面抗原，且對抗原的遮蔽作用較持久;其與抗OX40L單抗聯(lián)合應(yīng)用能夠阻斷T細(xì)胞激活的抗原和共刺激雙信號通路，抑制T細(xì)胞的增殖活性，降低了Th1類細(xì)胞因子干擾素γ的分泌，而使Th2類細(xì)胞因子白細(xì)胞介素4的分泌增加，使Th0類細(xì)胞向Th2類細(xì)胞偏離。提示，通過對移植物進行化學(xué)修飾遮蔽淋巴細(xì)胞表面抗原及體外應(yīng)用抗OX40L單抗阻斷OX40/OX40L共刺激途徑的雙調(diào)節(jié)，誘導(dǎo)了供鼠T細(xì)胞對同種異體抗原的低反應(yīng)狀態(tài)，將為臨床異基因造血干細(xì)胞移植重度移植物抗宿主病的預(yù)防提供了一條新途徑。

在建立大鼠異位心臟移植模型實驗中，李敬來等［20］在術(shù)中靜脈應(yīng)用CD45單克隆抗體（CD45mAb）及供體脾細(xì)胞。術(shù)后切取移植心臟，檢測局部浸潤細(xì)胞OX40表達情況。結(jié)果顯示，在正常大鼠心臟，OX40陽性細(xì)胞很少;在CD45mAb及聯(lián)合應(yīng)用供體脾細(xì)胞組，OX40陽性細(xì)胞較單用脾細(xì)胞組和不用藥組均明顯減少。提示，在排斥反應(yīng)發(fā)生時，移植心臟局部浸潤淋巴細(xì)胞增多，OX40陽性細(xì)胞也增多;而在免疫低反應(yīng)時，OX40陽性細(xì)胞則較少，說明排斥反應(yīng)的發(fā)生和移植心臟局部的淋巴細(xì)胞浸潤及其活化呈正相關(guān)，結(jié)果為進一步尋找誘導(dǎo)免疫耐受及抗排斥反應(yīng)的方法提供了有益啟發(fā)。李慧等［21］探討了CD28-B7、CD134-CD134L共刺激信號通路阻斷以及雷帕霉素、供體特異性脾細(xì)胞輸注等聯(lián)合治療對大鼠心臟移植排斥反應(yīng)的影響，結(jié)果顯示，CD134-CD134L、CD28-B7共刺激信號通路單獨阻斷和雷帕霉素單獨治療后心臟存活時間分別為（7.6 ±0.5）、（12 ±3.5）和（19.1 ±6）d，CD134-CD134L、CD28-B7 共刺激信號通路阻斷與雷帕霉索聯(lián)合治療心臟存活時間分別為（25.2 ± 2.2）d 和（31.5 ± 4.6）d。CD134-CD134L、CD28-B7共刺激信號通路共同阻斷與雷帕霉素、地塞米松聯(lián)合治療心臟存活時間明顯延長為（59.1 ±10.4）d，另外有 2 例存活時間超過 120 d。雷帕霉素、地塞米松、CD134-CD134L、CD28-B7共刺激通路同時阻斷的聯(lián)合治療才能明顯抑制炎性細(xì)胞的浸潤及組織壞死。

［1］王曉娣，吳鐵鏞.OX40對潰瘍性結(jié)腸炎CD4+T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子功能的影響［J］.中華內(nèi)科雜志，2008，47（1）:15-18.

［2］Obermeier F，Schwarz H，Dunger N，et al.OX40/OX40L interactioninduces the exp ression of CXCR5 and contributes to chronic colitis induced by dextran sulfate sodium in mice［J］.Eur J Immunol，2003，33（12）:3265-32741.

［3］Totsuka T，Kanai T，Uraushihara K，et al.Therapeutic effect of anti-OX40L and anti-TNF-alpha MAbs in a murine model of chroniccolitis［J］.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2003，284（4）:G595-G6031.

［4］Liu DM，Yan JC，Wang CP，et al.The clinical implications of increased OX40 ligand expression in patients with acute coronary syndrome［J］.Clin Chim Acta，2008，397（1/2）:22-26.

［5］Matsumura Y，Hori T，Nishigori C，et al.Expression of CD134and CD134ligand n lesional and nonlesional psoriatic skin［J］.Arch Dermatol Res，2003，294（12）:563-566.

［6］Zhao XY，Pirskanen R，Malmstrom V，et al.Expression of OX40（CD134）on CD4+T-cells from patients with myasthenia gravis［J］.Clin Exp Immunol，2006，143（1）:110-116.

［7］Patschan S，Dolff S，Kribben A，et al.CD134expression on CD4+T cells is associated with nephritis and disease activity in patients with systemic lupus erythematosus［J］.Clin Exp Immunol，2006，145（2）:235-242.

［8］Li M，Yang Q，Zhang Y.Effects of CD134monoclonal antibody on hemolysis activities and expression of perforin in peripheral blood mononuclear cells of systemic lupus erythematosus patients［J］.Hybridoma，2007，26（4）:191-200.

［9］Harinder M，Deborah S，Cunninghame G，et al.Association of the co-stimulator OX40L with systemic lupus erythematosus［J］.J Mol Med，2009，87（3）:229-234.

［10］周燕斌，葉任高，李幼姬，等.中藥狼瘡方對狼瘡樣BXSB小鼠脾細(xì)胞CD134/CD134L表達的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2006，7（5）:254-257.

［11］鄧佳，于志湖，施巖，等.OX40及Bcl-2在紅斑狼瘡皮損及外周血淋巴細(xì)胞中的表達［J］.中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2008，24（8）:596-599.

［12］Shi Q，Wang Q，Chen YJ，et al.Construction of human breast carcinoma cell line transfected with OX40L and its costimulatory effect on T cells［J］.Ai Zheng，2006，25（2）:148-152.

［13］Petty JK，He K，Corless CL，et al.Survival in human colorectal cancer correlates with expression of the T-cell costimulatory molecule OX40（CD134）［J］.Am J Surg，2002，183（5）:512-518.

［14］Sarff M，Edwards D，Dhungel B，et al.OX40（CD134）expression in sentinel lymph nodes correlates with prognostic features of primary melanomas［J］.Am J Surg，2008，195（5）:621-625.

［15］Yvon E，Del Vecchio M，Savoldo B，et al.Immunotherapy of metastatic melanoma using genetically engineered GD2-specific T cells［J］.Clin Cancer Res，2009，15（18）:5852-5860.

［16］Hirschhorn-Cymerman D，Rizzuto GA，Merghoub T，et al.OX40 engagement and chemotherapy combination provides potent antitumor immunity with concomitant regulatory T cell apoptosis［J］.J Exp Med，2009，206（5）:1103-1116.

［17］So T，Croft M.Cutting edge:OX40 inhibits TGF-beta-and antigendriven conversion of naive CD4T cells into CD25+Foxp3+T cells［J］.J Immunol，2007，179（3）:1427-30.

［18］Ruby CE，Weinberg AD.OX40-enhanced tumor rejection and effector T cell differentiation decreases with age［J］.J Immunol，2009，182（3）:1481-1489.

［19］馮灑然，黃一虹，杜冰，等.甲氧基聚乙二醇衍生物與抗OX40L單抗雙誘導(dǎo)移植物免疫耐受［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2008，12（29）:5563-5567.

［20］李敬來，蕭明第.移植大鼠心臟局部CD134表達與急性排斥反應(yīng)的相關(guān)性研究［J］.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，7（7）:17-18.

［21］李慧，袁正偉，陳巖，等.CD28/B7和CD134/CD134L共刺激通路阻斷與免疫抑制劑聯(lián)合治療對移植心臟存活時間影響［J］.解剖科學(xué)進展，2009，15（2）:60-64.