百合地黃湯加甘麥大棗湯抗抑郁作用實驗研究*

張秋雨，于永軍，回景芳，楊桂染，王梅

(滄州醫(yī)學高等?？茖W校醫(yī)學系，河北滄州 061001)

抑郁癥屬中醫(yī)“郁證”范疇，中醫(yī)對郁證的認識和治療，幾千年來積累豐富的經(jīng)驗。本病病機關鍵在于氣陰兩虛、虛火內(nèi)擾，臟腑主要涉及心、肺、脾、腎。百合地黃湯和甘麥大棗湯均有用于抑郁癥的臨床報道［1-4］。根據(jù)“謹守病機，異病同治”的原則，本課題組臨床常用百合地黃湯合甘麥大棗湯(百合、地黃、甘草、小麥、大棗)治療此類病癥，常獲佳效。筆者在本研究以小鼠強迫游泳、懸尾應激及利血平拮抗等實驗，觀察百合地黃湯加甘麥大棗湯對小鼠抑郁模型的影響，為百合地黃合甘麥大棗湯臨床上用于治療抑郁癥提供藥效學依據(jù)，為臨床開發(fā)方便適用的有效劑型奠定藥效學基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 昆明種小鼠，河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供，雄性，體質(zhì)量(20±2)g。

1.1.2 藥品與試藥 百合地黃湯加甘麥大棗湯(BG)由經(jīng)方百合地黃湯與甘麥大棗湯組成(生地黃12 g，百合21 g，炙甘草、大棗各6 g，小麥30 g煎煮)，所用中藥飲片均購自河北天元藥業(yè)有限公司，并經(jīng)本校天然藥物鑒定教研室鑒定，均為正品，符合藥品標準。按常規(guī)方法水煎2次，合并2次水煎液，濃縮成含生藥1.50和0.75 g·mL-1的藥液，低溫保存?zhèn)溆?。鹽酸氯米帕明片由湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，每片含鹽酸氯米帕明25 mg，批號:061015，臨用時加溫純化水研磨均勻(含鹽酸氯米帕明2.0 mg·mL-1)。利血平注射液由廣東邦民制藥廠有限公司生產(chǎn)，批號:060103。

1.1.3 儀器 電熱恒溫水浴鍋為蘇州威爾實驗用品有限公司產(chǎn)品，秒表為山佳國際工貿(mào)有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 動物分組與給藥 昆明種小鼠40只，隨機分成4組，分別為模型組、高劑量藥物組、低劑量藥物組及陽性對照組，每組10只。陽性對照組灌胃給予鹽酸氯米帕明溶液0.04 g·kg-1，高、低劑量藥物組分別給予 BG 30，15 g·kg-1，均按 20 mL·kg-1灌胃給予相應藥物，模型組按給予同容量0.9%氯化鈉溶液，連續(xù)灌胃給藥7 d。

1.2.2 小鼠懸尾實驗 參照文獻［5］進行造模。末次給藥后30 min，將其尾部2 cm處的部分貼在一水平木棍上，使動物成倒掛狀態(tài)，其頭部離臺面約5 cm，懸掛兩側(cè)用板隔開動物視線，觀察記錄各組小鼠在6 min內(nèi)的不動時間。

1.2.3 小鼠強迫游泳實驗 參照文獻［5］進行造模。末次給藥30 min后，放入2 000 mL燒杯中(高20 cm，直徑14 cm，水深10 cm)，并置于水浴鍋內(nèi)，調(diào)節(jié)水溫23～25℃，每燒杯放入小鼠1只，置水中觀察6 min，記錄各組小鼠后4 min內(nèi)累計不動時間。

1.2.4 利血平拮抗實驗 參照文獻［5］進行造模。末次給藥30 min后，腹腔注射利血平4 mg·kg-1，觀察小鼠眼瞼下垂情況，準確記錄眼瞼開始下垂的時間，1 h時的眼瞼下垂度。按Rubin分級標準，判斷下垂度(完全開眼為0分，1/4閉眼為1分，1/2閉眼為2分，3/4閉眼為3分，完全閉眼為4分)。

1.2.5 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)資料用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行處理，均以均數(shù)±標準差(x±s)表示，數(shù)據(jù)處理組間比較采用單因素方差分析。

2 結果

2.1 BG對小鼠懸尾不動時間和游泳不動時間的影響結果見表1。從表1可以看到，BG和氯米帕明都能明顯縮短懸尾不動時間和游泳不動時間，高、低劑量藥物組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學意義(均P＜0.05)。

2.2 BG拮抗利血平作用 結果見表2。從表2可以看到，BG和氯米帕明都能明顯延長眼瞼下垂出現(xiàn)時間，減少眼瞼下垂度，高、低劑量藥物組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);高劑量藥物組與低劑量藥物組比較，眼瞼?開始下垂時間明顯延長，存在一定的量效關系，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

表1 4組小鼠懸尾不動時間和游泳不動時間比較Tab．1 The com parisons of the immobility time of m ice in tail suspension test and forced sw imm ing test in 4 groups s，±s

表1 4組小鼠懸尾不動時間和游泳不動時間比較Tab．1 The com parisons of the immobility time of m ice in tail suspension test and forced sw imm ing test in 4 groups s，±s

與模型組比較，*1 P＜0.05，*2 P＜0.01Compared with themodel group，*1 P ＜0.05，*2 P ＜0.01

組別 劑量/(g·kg-1)小鼠/只懸尾不動時間游泳不動時間百合地黃湯加甘麥大棗湯高劑量藥物組 30 10 49.80±39.52*1 78.00±37.92*1低劑量藥物組 15 10 49.20±33.10*1 81.70±34.59*1陽性對照組 0.04 10 24.90±28.71*2 32.60±36.82*2模型組 …10 79.40±25.17 113.90±19.81

表2 4組小鼠眼瞼開始下垂時間和眼瞼下垂評分比較Tab．2 Comparison of the initial time and scores of ptosis among the 4 groups ofm ice ±s

表2 4組小鼠眼瞼開始下垂時間和眼瞼下垂評分比較Tab．2 Comparison of the initial time and scores of ptosis among the 4 groups ofm ice ±s

與模型組比較，*1 P＜0.01;與低劑量藥物組比較，*2 P＜0.01Compared with the model group，*1 P ＜0.01;Compared with the low-dose group，*2 P ＜0.01

組別 劑量/(g·kg-1)小鼠/只眼瞼開始下垂時間/s眼瞼下垂評分/分百合地黃湯加甘麥大棗湯高劑量藥物組 30 10 18.00±6.25*1*2 2.30±1.34*1低劑量藥物組 15 10 10.30±2.87*1 2.50±1.08*1陽性對照組 0.04 10 12.40±4.67*1 2.50±1.65*1模型組 …10 6.20±3.00 4.00±0.00

3 討論

據(jù)臨床研究報道百合地黃湯加味治療抑郁癥療效顯著［3-4］。百合能清肺經(jīng)氣分熱邪，養(yǎng)肺中陰氣;地黃清心經(jīng)營分之熱，并益心腎之陰;甘草、小麥及大棗養(yǎng)心氣以寧神，補脾土以生血。本復方中所用藥物多為藥食兩用或保健食品可用藥品，安全性高，長期使用不容易產(chǎn)生不良反應，因此具有良好的應用優(yōu)勢和開發(fā)前景。甘麥大棗湯主治情志不舒，肝郁化火傷陰，或思慮過度，臨床報道具有抗抑郁療效［2］，本課題BG由百合地黃湯聯(lián)合甘麥大棗湯組成，通過研究該聯(lián)合方劑對抑郁小鼠模型的影響，為臨床用藥提供實驗依據(jù)。

強迫游泳實驗由PORSOLT于1977年首先提出，并在此基礎上提出了小鼠懸尾實驗，這兩個實驗各提供了一個無可回避的壓迫環(huán)境，實驗中小鼠所體現(xiàn)出來的不動狀態(tài)，被稱之為“行為絕望”［6］。這兩種行為絕望模型對抗抑郁藥敏感，操作簡單、快捷，被廣泛用于研究藥物的抗抑郁作用。實驗結果表明，陽性對照組和高、低劑量藥物組能縮短小鼠懸尾不動時間和游泳不動時間。

目前研究認為，抑郁癥的發(fā)生與腦中去甲腎上腺素(noradrenaline，NA)不足和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中NA含量下降密切相關［7］。利血平可耗竭中樞單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NA、多巴胺(dopamine，DA)等，引起抑郁?？挂钟羲幦鐔伟费趸敢种扑幒腿h(huán)類抗抑郁藥等均對抗利血平所引起的抑郁，能增加中樞NA的含量，提高NA神經(jīng)的功能作用。研究結果表明，鹽酸氯米帕明和高、低劑量BG能顯著拮抗利血平所致的小鼠眼瞼下垂度，延遲小鼠眼瞼開始下垂的時間。高劑量藥物組和鹽酸氯米帕明組比較眼瞼開始下垂的時間和眼瞼下垂度差異無統(tǒng)計學意義，高劑量藥物組與低劑量藥物組比較眼瞼開始下垂的時間差異有統(tǒng)計學意義，存在明顯的劑量依賴性，高劑量藥物組拮抗利血平所致的小鼠眼瞼下垂效果優(yōu)于低劑量藥物組。

本實驗結果表明，BG對小鼠行為絕望模型和利血平拮抗模型，表現(xiàn)出較好的抗抑郁作用，特別是利血平拮抗實驗，BG抗抑郁作用存在明顯的劑量依賴性。有關其抗抑郁機制，推測其可能與對抗中樞的NA減少，增強中樞NA神經(jīng)的功能有關。

［1］ 白國生.百合地黃湯加味治療更年期抑郁癥20例［J］.江蘇中醫(yī)，1995，16(8):13.

［2］ 李道儀.甘麥大棗湯治療抑郁癥［J］.南京中醫(yī)學院學報，1994，10(1)：21.

［3］ 張志亭，張彥平，李素水，等.甘麥大棗湯合百合地黃湯治療神志病舉隅［J］.河北中醫(yī)，2006，28(3):203.

［4］ 張景鳳，仝桂蘭，侯慶，等.加味百合地黃湯對中風后焦慮狀態(tài)的臨床療效觀察［J］.中草藥，2005，36(5):737.

［5］ 楊士友，黃世福，孫備，等.白芍解郁顆粒對小鼠抑郁模型的影響［J］.安徽醫(yī)藥，2004，8(2):87-88.

［6］ BORSINIF，VOLTERA G，MELIA.Does the behavioral despair testmeasure despair［J］.Physiology Behavior，1986，38(3):385-386.

［7］ VIOLETTA K，CRAIG S.Reduced levels of norepinephrine transporters in the locus coeruleus inmajor depression［J］.J Neuroscience，1997，17(21):8451-8458.