• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    HPLC法測定銀州柴胡中五種皂苷的含量

    2011-11-24 07:00:20朱占軍斯建勇魏建和潘瑞樂
    關(guān)鍵詞:柴胡皂苷皂苷柴胡

    符 穎,朱占軍,黃 帥,斯建勇,魏建和,潘瑞樂

    中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所,北京100193

    HPLC法測定銀州柴胡中五種皂苷的含量

    符 穎,朱占軍,黃 帥,斯建勇,魏建和,潘瑞樂*

    中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所,北京100193

    首次建立HPLC法同時(shí)測定銀州柴胡中柴胡皂苷a、c、d、e和f五種皂苷含量的方法。流動(dòng)相為乙腈-水梯度洗脫,柱子為Hibar·RT RP-18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流速1.0 mL/min,柱溫30℃,檢測波長210 nm。柴胡皂苷a、c、d、e和f的線性范圍及相關(guān)系數(shù)分別為:21.78~43.56 μg(r=0.9993),3.94~9.85 μg(r=0.9994),20.68~51.70 μg(r=0.9998),1.67~5.57 μg(r=0.9997),1.91~6.70 μg(r=0.9992);柴胡皂苷a、d的加樣回收率分別為101.5%和98.5%。該方法操作簡便,結(jié)果準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,為柴胡藥材多指標(biāo)質(zhì)量分析方法的建立和銀州柴胡藥用提供了參考依據(jù)。

    HPLC;銀州柴胡;柴胡皂苷a;柴胡皂苷c;柴胡皂苷d;柴胡皂苷e;柴胡皂苷f

    柴胡是一味療效顯著的常用中藥,具有疏肝解郁、升提中氣之功能,主治感冒發(fā)熱、寒熱往來、胸脅腹痛、黃疸肝炎及月經(jīng)不調(diào)等?!吨袊幍洹?2005年版一部)收載柴胡原植物為傘形科植物北柴胡Bupleurum chinense DC和狹葉柴胡B.scorzonerifolium Willd.的干燥根[1]。由于柴胡臨床用量大,而且主要依靠采挖野生資源,因此,隨著北柴胡和南柴胡資源的減少,該屬多種植物在產(chǎn)地當(dāng)柴胡藥用,造成商品來源十分混雜,質(zhì)量難以控制?,F(xiàn)代研究表明柴胡皂苷是柴胡的主要有效成分,具有解熱、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等多種作用,目前多以柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量作為柴胡質(zhì)量控制的指標(biāo),但不同品種柴胡所含的柴胡皂苷a、d有很大差別,有些甚至檢測不出[2-10]。因此,建立科學(xué)客觀反映柴胡質(zhì)量的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)已成為當(dāng)前柴胡研究的熱點(diǎn),其中多指標(biāo)分析方法是主要的研究模式。

    銀州柴胡B.yinchowense Shan et Y.Li廣泛分布于甘肅、青海等西北省區(qū),是當(dāng)?shù)夭窈闹髁髌贩N,但銀州柴胡的化學(xué)成分和質(zhì)量分析未見報(bào)道。本文采用從銀洲柴胡中分離得到的5個(gè)柴胡皂苷單體作為對照品,對甘肅產(chǎn)10批銀州柴胡含量進(jìn)行測定,為柴胡多指標(biāo)質(zhì)量分析方法的建立和銀州柴胡藥用提供了參考依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)方法

    1.1 儀器與試劑

    Waters系列高效液相色譜儀,Waters 600 controller,Waters 600 pump,Waters 2487 dual absorbance detector,Waters Empower工作站。電子分析天平(上海天平儀器廠),KQ5200B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司),乙睛、甲醇為色譜純(Fisher公司)。Wahaha純凈水(市售),提取用甲醇為分析純(北京化工廠)。

    柴胡皂苷a和柴胡皂苷d對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供(批號分別為:110777-200406和110778-200505),柴胡皂苷c、e和f為本實(shí)驗(yàn)室自制,經(jīng)IR、MS和NMR等光譜鑒定結(jié)構(gòu),HPLC純度檢測均大于98%。銀州柴胡樣品從甘肅不同產(chǎn)地收集,經(jīng)作者鑒定為植物銀州柴胡B.yinchowense的干燥根。

    1.2 色譜條件

    色譜柱:Hibar·RT RP-18(4.6 mm×250 mm,5 μm);保護(hù)柱:SecurityGuard(美國 Phenomenex公司);流動(dòng)相:乙腈-水梯度洗脫,洗脫程序見表1 (Table 1);流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:210 nm;進(jìn)樣量:20 μL。在此條件下,五種柴胡皂苷分離良好。

    表1 乙腈-水洗脫梯度表Table 1 Elution program

    1.3 對照品溶液制備

    精密稱定柴胡皂苷 a 21.78 mg、柴胡皂苷 c 10.37 mg、柴胡皂苷d 20.68 mg、柴胡皂苷e 5.99 mg和柴胡皂苷f 10.19 mg,分別置于2 mL容量瓶中,用色譜甲醇定容得對照品原液。分別吸取不同體積的對照品原液于1 mL容量瓶中,用色譜甲醇稀釋定容,即得系列混合對照品稀釋溶液,其中柴胡皂苷 a的濃度依次為 1.089,1.361,1.633,1.905,2.178 mg/mL,柴胡皂苷c為0.197,0.271,0.345,0.419,0.493 mg/mL,柴胡皂苷d為1.034,1.422,1.810,2.198,2.585 mg/mL,柴胡皂苷e為0.0835,0.132,0.181,0.230,0.279 mg/mL,柴胡皂苷f為0.0955,0.155,0.215,0.275,0.335 mg/mL。

    1.4 供試品溶液制備

    取柴胡藥材粉末(40目)約1 g,精密稱定,置100 mL三角瓶中,精確加入5%氨水甲醇溶液50 mL,密閉,于30℃水溫超聲提取0.5 h,過濾,濾渣用甲醇潤洗兩次,每次10 mL,合并濾液,回收至干,殘?jiān)蒙V甲醇定容于5 mL容量瓶,搖勻,微孔濾膜過濾(0.45 μm),棄初濾液,取續(xù)濾液,即得供試品溶液。

    1.5 測定方法

    分別精密吸取對照品稀釋溶液和供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,記錄90 min的色譜圖,外標(biāo)法定量。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 檢測波長選擇

    柴胡皂苷類成分無紫外吸收,僅在末端203 nm處有最大吸收波長,但在該波長基線噪音大,梯度洗脫時(shí)基線漂移嚴(yán)重,若選擇210 nm作為檢測波長,乙腈-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相,基線噪音和漂移均較小,且色譜圖與203 nm比較無顯著差別,因此,選擇210 nm為檢測波長。

    2.2 樣品制備方法的確定

    由于柴胡皂苷a、d在提取過程中受酚類或酸性成分的影響,易使環(huán)氧醚鍵開環(huán),轉(zhuǎn)化為柴胡皂苷b1、b2,因而通常采用弱堿性溶劑提取原生柴胡皂苷a、c、d。本研究考察了甲醇、30%甲醇、60%甲醇作為提取溶劑(三種提取溶劑中均加入5%氨水),HPLC測定結(jié)果表明五種皂苷含量無顯著性差異,但用30%甲醇和60%甲醇提取時(shí)雜質(zhì)過多,定容困難,并且對色譜柱損害大,故選5%氨水甲醇作為提取溶劑。

    以5%氨水甲醇為提取溶劑,考察了加熱回流提取1 h、30℃水溫超聲提取0.5 h和1 h三種提取方法,HPLC測定結(jié)果表明五種皂苷含量無明顯差異,故選用30℃水溫超聲提取0.5 h作為提取方法。

    2.3 方法學(xué)考察

    2.3.1 穩(wěn)定性考察

    精密吸取同一供試品溶液20 μL,分別于0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣,記錄HPLC色譜圖,柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、柴胡皂苷e和柴胡皂苷f的色譜峰的相對峰面積RSD值分別為1.24%、1.19%、1.05%、1.29%、1.34%,均小于2%,表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.3.2 精密度考察

    精密吸取同一供試品溶液20 μL,連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次,記錄五種柴胡皂苷的峰面積,其RSD值分別為0.82%、0.57%、0.71%、0.68%、0.92%,表明儀器的精密度良好。

    2.3.3 線性關(guān)系考察

    精密吸取對照品稀釋溶液20 μL注入HPLC儀,記錄峰面積,以對照品質(zhì)量為橫坐標(biāo),峰面積值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其回歸方程分別為:

    結(jié)果表明柴胡皂苷a在21.78~43.56 μg,柴胡皂苷c在3.94~9.85 μg,柴胡皂苷d在20.68~51.70 μg,柴胡皂苷e在1.67~5.57 μg,柴胡皂苷f在1.91~6.70 μg范圍內(nèi)對照品含量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

    2.3.4 重復(fù)性考察

    取同一樣品5份,按供試品溶液制備方法,處理樣品,記錄色譜圖,各主要色譜峰的相對峰面積RSD分別為:2.94%、2.89%、2.87%、3.51%、3.95%,方法重復(fù)性良好。

    2.3.5 回收率試驗(yàn)

    精密稱取已知含量的柴胡樣品共6份,每份0.25 g,分別加入柴胡皂苷a和柴胡皂苷d對照品原液各100 μL,按供試品溶液制備方法處理,測定柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量,計(jì)算二者平均回收率分別為101.5%(RSD為2.33%)和98.5% (RSD為2.56%)。由于柴胡皂苷c、e、f對照品量比較少,未進(jìn)行回收率試驗(yàn)研究。

    2.4 樣品測定

    根據(jù)測定方法對10批銀州柴胡進(jìn)行含量測定,對照品及樣品的色譜圖見附圖1及圖2,測定結(jié)果見Table 2(SSa、SSb、SSc、SSe及SSf分別為柴胡皂苷a、b、c、e和f)。

    表2 銀州柴胡中五種柴胡皂苷的含量(%)Table 2 The contents of five saponins in root of B.yinchowense

    3 結(jié)論

    首次建立了HPLC法同時(shí)測定五種柴胡皂苷含量的分析方法,并用該方法對10批銀州柴胡中五種皂苷的含量進(jìn)行了測定,結(jié)果表明銀州柴胡中柴胡皂苷a、c和d的含量較高,而柴胡皂苷e和f的含量較低。本研究為建立柴胡藥材多指標(biāo)質(zhì)量分析方法及銀州柴胡藥用提供了參考依據(jù)。

    從表2中可知銀州柴胡中柴胡皂苷a、c、和d的含量之和為1.40%~2.01%,與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的不同產(chǎn)地北柴胡中這三種皂苷的含量之和接近。從柴胡皂苷a、c和d含量這一指標(biāo),銀州柴胡與北柴胡相似,但銀州柴胡能否作為法定藥材,尚需對其藥效、毒性等多學(xué)科綜合研究。

    1 The Pharmacopoeia Committee of People’s Republic of China.Pharmacopoeia of People’s Republic China,Part I,Beijing:Chemical Industry Press(國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典,一部).Beijing:Chemical Industry Press,2005.198.

    2 Zhang HN(張宏娜),Zhao YY(趙玉英),Liang H(梁鴻),et al.Simultaneous HPLC-ELSD determination of saikosaponins a,c,d,f in Radix Bupleuri.Chin J Pharm Anal(藥物分析雜志),2007,27:1150.

    3 Xiong MX(熊夢曉),Huang BS(黃必勝),Bai Y(白楊),et al.Determination of Saikosaponin a,d in Bupleurum by RPHPLC.Res Pract Chin Med(現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐),2007, 22(2):42.

    4 Pan RL(潘瑞樂),Chen DH(陳迪華),Chen JM(陳建明),et al.Determination of saikosaponin a and d in Radix Buplerui by RP-HPLC.Central South Pharm(中南藥學(xué)),2004,2:199-200.

    5 Ma MC(麻明臣),Liu J(劉娟),Chen YF(陳宇峰),et al.Quantitative analysis of saikosaponin a in wild Bupleurum by HPLC,YaoWuYanJiu(藥物研究),2008,17(12):33.

    6 Yu J(余菁),Liang WQ(梁衛(wèi)青).Determination of saikosaponin a and d in radix Buplerui from different areas by HPLC.J Zhejiang Univ Tradit Chin Med(浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)),2007,31:374:375.

    7 Song HG(宋宏剛),Xu HH(許紅輝),Pei CY(裴彩云),et al.Determination of saikosaponin a and d in Radix Buplerui by HPLC-ELSD.Lishizhen Med Mater Med Res(時(shí)珍國醫(yī)國藥),2006,17:1964-1964.

    8Lin DH(林東昊),Mao RG(茅仁剛),Wang ZH(王智華),et al.Determination of Saikosaponin a,c,d in Bupleurum Chinese DC.from different areas by HPLC.Chin Tradit Patent Med(中成藥),2002,24:382-384.

    9Mao RG(茅仁剛),Lin DH(林東昊),Wang ZH(王智華),et al.Quantitative analysis of saikosaponin a,c,d in different species of Radix Buplerui by HPLC.Chin Tradit Herb Drugs(中草藥),2002,33:412-414.

    10 Wang GZ(王光忠),Li QY(李秋怡),Zhang LP(張蓮萍),et al.Determination of Saikosaponin a,d in Radix buplerui by HPLC-ELSD.Lishizhen Med Mater Med Res(時(shí)珍國醫(yī)國藥),2006,17:1721-1722.

    Determination of five saikosaponins in Bupleurum yinchowense by HPLC

    FU Ying,ZHU Zhan-jun,HUANG Shuai,SI Jian-yong,WEI Jian-he,PAN Rui-le*
    Institute of Medicinal Plant development,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100193,China

    A method was established for determining five saikosaponins simultaneously,including saikosaponins a,c,d,e and f in the root of Bupleurum yinchowense by HPLC for the first time.Separation was achieved by A Hibar·RT C18 column(250 mm×4.6 mm,5 μm)using acetonitrile and water as the mobile phase with gradient elution at the f1ow rate of 1.0 mL/min,column temperature at 30℃ and the wavelength of UV detection was 210 nm.There were good linear correlations between the studied concentrations of the five saikosaponins and their chromatographic peak areas,and the correlation coefficients were 0.9992-0.9998.The recoveries of saikosaponins a and d were 101.5 and 98.5%,respectively.The RSD of precision and accuracy was less than 3%.This method is simple,accurate and reproducible,and also provides a reference for establishing the multiple-value quality control method for Radix Buplerui and the use of B.yinchowense as a medicine.

    HPLC;Bupleurum yinchowense;saikosaponin a;saikosaponin c;saikosaponin d;saikosaponin e;saikosaponinf

    1001-6880(2011)03-0494-04

    2009-10-12 接受日期:2010-02-04

    創(chuàng)新藥物研究開發(fā)技術(shù)平臺建設(shè)(2009ZX09301-003)

    *通訊作者 Tel:86-10-57833286;E-mail:rlpan@implad.ac.cn

    R284.2

    A

    猜你喜歡
    柴胡皂苷皂苷柴胡
    柴胡總皂苷的大鼠體內(nèi)代謝特征譜研究
    核桃柴胡間作技術(shù)
    河北果樹(2020年4期)2020-11-26 06:05:18
    HPLC法同時(shí)測定柴胡桂枝湯中6種成分
    中成藥(2018年10期)2018-10-26 03:41:02
    HPLC-MS/MS法同時(shí)測定三七花總皂苷中2種成分
    中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:19:04
    HPLC-CAD法測定不同產(chǎn)地柴胡藥材中柴胡皂苷
    中成藥(2018年4期)2018-04-26 07:13:09
    HPLC法測定大鼠皮膚中三七皂苷R1和人參皂苷Rb1
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:40
    一測多評法同時(shí)測定消癥微丸中4種柴胡皂苷
    中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:18:49
    10 種中藥制劑中柴胡的定量測定
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    HPLC法同時(shí)測定熟三七散中13種皂苷
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:34
    柴胡治療豬感冒癥的臨床觀察
    99久久精品国产国产毛片| 精品亚洲成国产av| 久热这里只有精品99| tube8黄色片| 亚洲在久久综合| 高清视频免费观看一区二区| 在线看a的网站| 少妇丰满av| 欧美少妇被猛烈插入视频| 欧美成人a在线观看| 嘟嘟电影网在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲精品国产成人久久av| 男人爽女人下面视频在线观看| 高清毛片免费看| 99re6热这里在线精品视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 高清av免费在线| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 99视频精品全部免费 在线| 欧美精品一区二区免费开放| 街头女战士在线观看网站| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品.久久久| 人妻系列 视频| 毛片一级片免费看久久久久| 99精国产麻豆久久婷婷| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 少妇高潮的动态图| 男女免费视频国产| 国产精品无大码| 亚洲av福利一区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 一本一本综合久久| 国产淫语在线视频| 在线观看av片永久免费下载| 久久综合国产亚洲精品| 欧美3d第一页| 女人久久www免费人成看片| 亚洲天堂av无毛| 观看美女的网站| 色视频www国产| 91精品一卡2卡3卡4卡| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 老司机影院成人| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲三级黄色毛片| av在线老鸭窝| 久久久色成人| 国产亚洲一区二区精品| 国产久久久一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产成人一区二区在线| av天堂中文字幕网| 日韩av在线免费看完整版不卡| 我的老师免费观看完整版| 国产精品福利在线免费观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 日本-黄色视频高清免费观看| 一区二区三区免费毛片| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲国产最新在线播放| 青春草视频在线免费观看| 高清黄色对白视频在线免费看 | 97在线视频观看| 乱系列少妇在线播放| 免费人成在线观看视频色| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产男女内射视频| 日本黄色片子视频| 三级经典国产精品| 十分钟在线观看高清视频www | 最近2019中文字幕mv第一页| 高清视频免费观看一区二区| 国产成人91sexporn| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 最近的中文字幕免费完整| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产 一区精品| 一区二区三区四区激情视频| 国产乱人偷精品视频| 欧美区成人在线视频| 五月玫瑰六月丁香| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 尾随美女入室| 亚洲美女视频黄频| 97热精品久久久久久| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产有黄有色有爽视频| 国产视频首页在线观看| 99热这里只有精品一区| 高清黄色对白视频在线免费看 | 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 大片电影免费在线观看免费| 色视频www国产| 九草在线视频观看| 大码成人一级视频| 国产中年淑女户外野战色| 国产欧美日韩精品一区二区| av天堂中文字幕网| 日韩一区二区视频免费看| 乱系列少妇在线播放| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久精品免费免费高清| 波野结衣二区三区在线| 日日撸夜夜添| 亚洲精品日本国产第一区| 国产av一区二区精品久久 | 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 在线观看三级黄色| 最近的中文字幕免费完整| 高清视频免费观看一区二区| 七月丁香在线播放| 亚洲精品第二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 久久国产乱子免费精品| 国产亚洲精品久久久com| 男女无遮挡免费网站观看| 久久精品人妻少妇| 在线观看免费高清a一片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品免费大片| 国产精品蜜桃在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 搡老乐熟女国产| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲最大成人中文| 国产成人精品婷婷| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲欧美精品自产自拍| 99九九线精品视频在线观看视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 我的老师免费观看完整版| 成人漫画全彩无遮挡| 色婷婷久久久亚洲欧美| 青春草国产在线视频| 黑人猛操日本美女一级片| 久久国产亚洲av麻豆专区| 免费观看的影片在线观看| 国产91av在线免费观看| 久久久久久久久久成人| 免费高清在线观看视频在线观看| 天堂8中文在线网| 欧美高清性xxxxhd video| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲内射少妇av| 成年免费大片在线观看| 欧美三级亚洲精品| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产黄色免费在线视频| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 十分钟在线观看高清视频www | 女性被躁到高潮视频| 91精品一卡2卡3卡4卡| 视频区图区小说| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲无线观看免费| 日韩中文字幕视频在线看片 | 精品久久久久久电影网| a级毛色黄片| 黄色一级大片看看| 国国产精品蜜臀av免费| 国产乱人偷精品视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 成人无遮挡网站| 一级爰片在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 婷婷色综合www| 国产精品人妻久久久久久| av免费观看日本| 国产在视频线精品| 国产成人freesex在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久人人爽人人片av| 亚洲色图av天堂| 精品久久国产蜜桃| 老女人水多毛片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日韩免费高清中文字幕av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 26uuu在线亚洲综合色| 成人漫画全彩无遮挡| 国产深夜福利视频在线观看| xxx大片免费视频| 欧美人与善性xxx| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲欧洲国产日韩| 高清不卡的av网站| 亚洲成人一二三区av| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 乱系列少妇在线播放| 少妇高潮的动态图| 国产精品免费大片| 97在线人人人人妻| 欧美日韩在线观看h| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲性久久影院| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 成年免费大片在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产美女午夜福利| 欧美三级亚洲精品| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲美女黄色视频免费看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 搡老乐熟女国产| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲成人中文字幕在线播放| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产高清不卡午夜福利| av在线播放精品| 免费人成在线观看视频色| 少妇丰满av| 少妇人妻精品综合一区二区| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 深爱激情五月婷婷| 日韩视频在线欧美| 色婷婷av一区二区三区视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 嫩草影院入口| 黄色一级大片看看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜 | 亚洲综合色惰| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产永久视频网站| 嫩草影院入口| 国产一区有黄有色的免费视频| 能在线免费看毛片的网站| 国产片特级美女逼逼视频| 少妇的逼水好多| 久久久成人免费电影| 色视频www国产| 永久免费av网站大全| 美女福利国产在线 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 少妇熟女欧美另类| 女人久久www免费人成看片| 免费观看av网站的网址| 国产精品99久久99久久久不卡 | 中文字幕亚洲精品专区| 国产91av在线免费观看| 中文资源天堂在线| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 美女内射精品一级片tv| 久久久久国产网址| 色视频在线一区二区三区| 精品一区二区三卡| 成人国产av品久久久| 一级毛片我不卡| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 最近中文字幕高清免费大全6| 99久久精品一区二区三区| 亚洲伊人久久精品综合| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 超碰av人人做人人爽久久| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 黄色视频在线播放观看不卡| 新久久久久国产一级毛片| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产成人精品婷婷| 99热全是精品| 岛国毛片在线播放| 亚洲av.av天堂| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲av国产av综合av卡| 在线免费十八禁| 看免费成人av毛片| 久久青草综合色| 97超碰精品成人国产| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲真实伦在线观看| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲成色77777| 嫩草影院新地址| 亚洲人成网站在线观看播放| 色哟哟·www| 国产 一区 欧美 日韩| 五月伊人婷婷丁香| 国产精品久久久久久精品古装| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久国内精品自在自线图片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 青青草视频在线视频观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 夫妻午夜视频| 免费人成在线观看视频色| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产v大片淫在线免费观看| 久久99精品国语久久久| 色视频www国产| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 99久久精品国产国产毛片| 夫妻性生交免费视频一级片| videossex国产| 成人免费观看视频高清| 欧美zozozo另类| 久久久久久久久久成人| 精品少妇久久久久久888优播| 少妇的逼水好多| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 在线观看一区二区三区激情| 最近最新中文字幕免费大全7| 丝瓜视频免费看黄片| 最黄视频免费看| 日本黄色片子视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 极品教师在线视频| 国产男女内射视频| 色吧在线观看| 99久久精品热视频| 99久久综合免费| av黄色大香蕉| 久久久久久九九精品二区国产| 精品少妇久久久久久888优播| 免费黄频网站在线观看国产| 男女边摸边吃奶| 久久韩国三级中文字幕| 免费少妇av软件| 亚洲国产精品专区欧美| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 久久99热这里只有精品18| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲欧美一区二区三区国产| 午夜日本视频在线| 成年免费大片在线观看| 亚洲天堂av无毛| 一级av片app| 国产黄频视频在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一级黄片播放器| freevideosex欧美| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲精品第二区| 亚洲av中文av极速乱| 51国产日韩欧美| 久久热精品热| 青春草国产在线视频| 久久99精品国语久久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产91av在线免费观看| 国产成人91sexporn| 新久久久久国产一级毛片| 国产精品无大码| 亚洲色图综合在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 毛片女人毛片| 日韩欧美一区视频在线观看 | av专区在线播放| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 中文资源天堂在线| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美丝袜亚洲另类| 插逼视频在线观看| 美女内射精品一级片tv| 精品熟女少妇av免费看| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲av中文av极速乱| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 中文欧美无线码| 久久久久人妻精品一区果冻| 99久久中文字幕三级久久日本| 一本一本综合久久| 国产精品99久久久久久久久| 日韩中文字幕视频在线看片 | 国产爱豆传媒在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 伦精品一区二区三区| 一边亲一边摸免费视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 免费观看在线日韩| 成年人午夜在线观看视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 少妇人妻 视频| 久久久久久久久久久丰满| 色吧在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 综合色丁香网| 看十八女毛片水多多多| 午夜福利影视在线免费观看| 中文天堂在线官网| 麻豆乱淫一区二区| 日韩伦理黄色片| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品色激情综合| 精品一区二区三卡| 中国国产av一级| 国产一区二区三区综合在线观看 | 欧美精品一区二区大全| 国产精品一二三区在线看| 日本av免费视频播放| 欧美 日韩 精品 国产| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久a久久爽久久v久久| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲性久久影院| 欧美zozozo另类| 人体艺术视频欧美日本| 久久久久精品性色| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 九色成人免费人妻av| 欧美日本视频| 欧美zozozo另类| 国产av码专区亚洲av| 久久久久网色| freevideosex欧美| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 91久久精品国产一区二区三区| 国产精品一及| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产 一区精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产精品一区二区性色av| 亚洲精品国产av成人精品| 五月开心婷婷网| 天堂8中文在线网| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产在线免费精品| 国产亚洲精品久久久com| 男女啪啪激烈高潮av片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 一级毛片 在线播放| 秋霞伦理黄片| 91在线精品国自产拍蜜月| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品一区www在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 纯流量卡能插随身wifi吗| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产淫语在线视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产 精品1| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 久久久久久久精品精品| 国产精品一区二区在线观看99| 久久久色成人| 91aial.com中文字幕在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲av福利一区| 亚洲国产精品999| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产免费一级a男人的天堂| 日韩一区二区三区影片| 日韩制服骚丝袜av| 久久这里有精品视频免费| 日韩成人av中文字幕在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 97精品久久久久久久久久精品| 日本午夜av视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 舔av片在线| .国产精品久久| 精品人妻熟女av久视频| 免费观看a级毛片全部| 新久久久久国产一级毛片| 欧美少妇被猛烈插入视频| www.av在线官网国产| 在现免费观看毛片| 亚洲熟女精品中文字幕| 99热这里只有是精品50| 丰满迷人的少妇在线观看| av天堂中文字幕网| 免费黄色在线免费观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费少妇av软件| 天堂8中文在线网| 91久久精品国产一区二区成人| 97热精品久久久久久| 成人午夜精彩视频在线观看| av免费在线看不卡| 亚洲图色成人| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 香蕉精品网在线| 日本午夜av视频| 如何舔出高潮| 一区在线观看完整版| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 午夜精品国产一区二区电影| 在线观看免费视频网站a站| 欧美日韩精品成人综合77777| 99热全是精品| 久久人妻熟女aⅴ| 最后的刺客免费高清国语| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品女同一区二区软件| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品国产成人久久av| 久久毛片免费看一区二区三区| 激情 狠狠 欧美| 亚洲国产精品999| 观看美女的网站| 九草在线视频观看| 六月丁香七月| 九九在线视频观看精品| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品偷伦视频观看了| 在线观看人妻少妇| 国产综合精华液| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲自偷自拍三级| 看免费成人av毛片| 国产精品一区www在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 国产日韩欧美亚洲二区| 五月玫瑰六月丁香| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| av专区在线播放| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 一个人免费看片子| 亚洲自偷自拍三级| 一级毛片aaaaaa免费看小| 久久久精品94久久精品| 熟女av电影| 最近中文字幕高清免费大全6| 黄色一级大片看看| 亚洲,一卡二卡三卡| 色5月婷婷丁香| 激情 狠狠 欧美| 亚洲无线观看免费| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美+日韩+精品| 在线观看免费高清a一片| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 三级国产精品片| 日本午夜av视频| 精品亚洲成国产av| 有码 亚洲区| 十八禁网站网址无遮挡 | 如何舔出高潮| 黑人猛操日本美女一级片| 国产在线免费精品| 亚洲精品国产av成人精品| 国产精品人妻久久久久久| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产午夜精品一二区理论片| 成人漫画全彩无遮挡| 精品酒店卫生间| 婷婷色综合www| 亚洲精品亚洲一区二区| 最近最新中文字幕大全电影3| 色视频在线一区二区三区| 91久久精品电影网| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久ye,这里只有精品| 免费观看在线日韩| 国产91av在线免费观看| 激情 狠狠 欧美| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 欧美最新免费一区二区三区| 性色av一级| 欧美精品国产亚洲| 欧美最新免费一区二区三区| 婷婷色av中文字幕| 少妇的逼好多水| 久久久久久久久久人人人人人人| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品.久久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 成人美女网站在线观看视频| 五月玫瑰六月丁香| 国产免费视频播放在线视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲精品国产av成人精品| 国产高潮美女av| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲av中文av极速乱| 国产一级毛片在线| 国产精品国产三级国产av玫瑰|