鐵皮石斛胚狀體對大鼠抗疲勞能力的影響

辛 甜, 儲智勇，欒 潔，湯佳靜，孫 倩，翟延君

(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600；2.海軍醫(yī)學(xué)研究所，上海 200433；3.上海湯振生物技術(shù)有限公司，上海 201900)

鐵皮石斛胚狀體對大鼠抗疲勞能力的影響

辛 甜1,2, 儲智勇2，欒 潔2，湯佳靜3，孫 倩1,2，翟延君1

(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600；2.海軍醫(yī)學(xué)研究所，上海 200433；3.上海湯振生物技術(shù)有限公司，上海 201900)

目的研究鐵皮石斛胚狀體對大鼠抗疲勞能力的影響。方法大鼠隨機分為低、中、高劑量組(鐵皮石斛胚狀體0.2、0.4、0.8 g/kg) ，空白對照組、跑步對照組及鐵皮楓斗組(鐵皮楓斗1.2 g/kg)，進行大鼠跑臺實驗。觀察大鼠運動前、運動后0 min及運動后30 min血糖含量、全血乳酸含量變化并檢測運動后肝糖元、肌糖元及血尿素氮的含量。結(jié)果與跑步對照組相比，鐵皮石斛胚狀體各劑量組可以在跑步30 min后提高血糖含量并降低全血乳酸含量，中、高劑量組可以降低運動后肝糖元及肌糖元的消耗，各劑量組均能明顯降低血尿素氮的含量。結(jié)論鐵皮石斛胚狀體具有提高大鼠抗疲勞能力的作用。

鐵皮石斛；胚狀體；大鼠；跑步；抗疲勞

鐵皮石斛為蘭科植物鐵皮石斛DendrobiumcandidumWal1．ex Lind1．(D．officinale)新鮮或干燥的莖，加工后稱“鐵皮楓斗”，是一種常用名貴中藥，為國家重點保護植物之一[1]。有“除痹下氣，補五臟虛勞羸瘦，強陰，久服厚腸胃輕身延年”之效[2]。鐵皮石斛主要含多糖、生物堿、微量元素和氨基酸等，在治療胃腸道疾病、抗衰老、抗腫瘤、降低血糖和緩解視疲勞等方面均有良好療效[3，4]。由于人為過度采挖使得鐵皮石斛的野生資源瀕臨滅絕，已被列入《中國植物紅皮書》。利用植物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得組織培養(yǎng)物，并以組織培養(yǎng)物代替其原植株成為藥源，是實現(xiàn)野生石斛資源可持續(xù)利用的有效方式之一。

筆者通過人工組織培養(yǎng)培育出鐵皮石斛胚狀體，為了解其抗疲勞功效，對其進行實驗研究。

1 材料和方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 SD大鼠65只，雄性，體重180～200 g，由上海市西普爾-必凱實驗動物有限公司提供，許可證號SCXK(滬)2008-0016。

1.1.2實驗藥品及儀器 鐵皮石斛胚狀體由上海湯振生物技術(shù)有限公司提供,市售鐵皮楓斗藥材(廣東鷹皇參茸制品有限公司),全血乳酸測試盒、肝(肌)糖元測試盒、葡萄糖測試盒及尿素氮測試盒(南京建成生物工程研究所),FT-200大鼠跑臺(成都泰盟科技有限公司),T6新世紀紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),HWS-24電熱恒溫水浴鍋(上海一恒科學(xué)儀器有限公司 )。

1.2實驗方法[5～7]

1.2.1動物分組 實驗前先進行動物運動適應(yīng)能力的篩選：SD大鼠65只，均在電動跑臺上以速度10 m/min無電刺激運動10 min，共3 d，淘汰無法適應(yīng)跑臺跑步的大鼠5只，剩余60只動物隨機分為空白對照組、跑步對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組、鐵皮楓斗組,每組10只。跑步組、低、中、高劑量組與鐵皮楓斗組大鼠在電動跑臺上電刺激強迫跑步10 d，速度從第1天11 m/min至第10天20 m/min逐天遞增，跑步時間20 min。第11天開始灌胃給藥半小時后保持每天以20 m/min的速度運動30 min，連續(xù)給藥7 d。

1.2.2給藥方法 給藥劑量：灌胃給予空白對照組與跑步對照組為蒸餾水；低、中、高劑量組為鐵皮石斛胚狀體水煎液，根據(jù)成人每日推薦劑量折算：分別為0.2、0.4、0.8 g/kg；鐵皮楓斗組給藥劑量為1.2 g/kg；給藥量：1 ml/100 g體重。

1.2.3血糖及全血乳酸含量 實驗動物于末次給藥半小時后各劑量組大鼠在電動跑臺上電刺激強迫跑步1 h，速度為25 m/min，各組大鼠跑前眼眶取血1 ml，跑后立即眼眶取血1 ml，休息30 min后腹主動脈取血，空白組平行取血3次。全血經(jīng)肝素抗凝, 3 000 r/min離心10 min，取血漿，按試劑盒步驟操作測定，于505 nm及530 nm處測 A 值。

1.2.4肝糖元含量、肌糖元含量及血尿素氮含量[8]實驗動物于末次給藥半小時后各劑量組大鼠在電動跑臺上電刺激強迫跑步1 h，速度為25 m/min，各組大鼠跑后休息30 min后腹主動脈取血，取肝臟、腿部肌肉。全血經(jīng)肝素抗凝， 3 000 r/min離心10 min，取血漿。按試劑盒步驟操作測定，于520 nm處測 A 值。

2 結(jié)果

2.1鐵皮石斛胚狀體對大鼠血糖含量的影響(見表1)。

表1 鐵皮石斛胚狀體對大鼠血糖含量的影響

1)P<0.05，2)P<0.01,與空白對照組比較；3)P<0.05，4)P<0.01與跑步對照組比較。

從表1可以看出，與空白組相比，跑步后各組大鼠的血糖含量均明顯降低，但都明顯高于跑步對照組。在休息30 min后，與跑步對照組相比，各組大鼠的血糖含量均明顯上升，鐵皮石斛胚狀體中、高劑量組效果更為明顯，基本恢復(fù)跑前血糖含量。提示鐵皮石斛胚狀體有利于運動后血糖的恢復(fù)。

2.2鐵皮石斛胚狀體對大鼠全血乳酸含量的影響(見表2)。

表2 鐵皮石斛胚狀體對大鼠全血乳酸含量的影響

1)P<0.05，2)P<0.01,與空白對照組比較；3)P<0.05，4)P<0.01與跑步對照組比較。

從表2可以看出，與空白對照組相比，跑步后各組大鼠全血乳酸含量均明顯上升。休息30 min后，與跑步對照組相比，鐵皮石斛胚狀體各劑量組均能明顯減少乳酸的含量，其中,中、高劑量組效果更加顯著。提示鐵皮石斛胚狀體有利于減少運動后體內(nèi)乳酸的含量，減少乳酸在體內(nèi)的蓄積。

2.3鐵皮石斛胚狀體對大鼠肝糖元、肌糖元及血尿素氮含量的影響[6](見表3)。

表3 鐵皮石斛胚狀體對大鼠肝糖元、肌糖元及血尿素氮含量的影響

1)P<0.05，2)P<0.01,與空白對照組比較；3)P<0.05，4)P<0.01與跑步對照組比較。

從表3中可以看出，與空白對照組相比，運動后高劑量組大鼠肝糖元含量無明顯變化，中、高劑量組大鼠的肝糖元與肌糖元含量均明顯高于跑步對照組，高劑量組效果優(yōu)于鐵皮楓斗組。與空白對照組相比，中劑量組大鼠血尿素氮含量無明顯變化。各劑量組大鼠血尿素氮含量均能明顯低于跑步對照組，其中，中、高劑量組效果更為顯著。提示鐵皮石斛胚狀體可以減少肝糖元與肌糖元的消耗，并有效減少血尿素氮的生成。

3 討論

疲勞是機體在一定環(huán)境條件下，因長時間過于繁重、緊張的勞動(包括腦力和體力)而引起的工作效率暫時性明顯降低的一種生理現(xiàn)象。長期疲勞引起的亞健康會嚴重影響人們的工作與生活，研究緩解疲勞的藥物有著重要實際意義。

糖是機體最重要的能源物質(zhì)。其中肌糖元是骨骼肌中可以隨時動用的貯備能源，其貯備量與運動的耐力呈正相關(guān)，肝糖元的主要作用是維持血糖的相對穩(wěn)定，隨著運動時間的延長，血糖水平開始下降，為了補償血糖的消耗，肝糖元分解和糖異生作用增強。一旦肝糖元耗竭會使運動肌供能不足導(dǎo)致外周疲勞。本實驗結(jié)果表明，鐵皮石斛胚狀體的抗疲勞作用可能與增加肝糖元、肌糖元及血糖的儲備有關(guān)。

當(dāng)機體長時間不能通過糖脂肪分解代謝得到足夠能量時，機體蛋白質(zhì)與氨基酸分解代謝隨之增強，產(chǎn)生大量的尿素氮。機體血尿素氮含量隨運動負荷增加而增加，而且機體對負荷的適應(yīng)性越差產(chǎn)生的尿素氮越多。本實驗結(jié)果表明，鐵皮石斛胚狀體可能通過抑制血尿素氮的產(chǎn)生起到抗疲勞的作用。

乳酸作為肌肉活動的主要代謝產(chǎn)物，是評價機體疲勞的重要標志物，其在體內(nèi)的積累可影響肌肉的收縮功能和運動能力，會刺激神經(jīng)末梢，從而引起肌肉的痙攣、疼痛和局部水腫等一系列延遲性肌肉酸痛的表現(xiàn)。因而，減少乳酸在肌肉中的積累，可以延緩疲勞的發(fā)生或加速疲勞的消除。本實驗結(jié)果表明，鐵皮石斛胚狀體可能通過減少乳酸在體內(nèi)的蓄積而產(chǎn)生抗疲勞的作用。

綜上所述，鐵皮石斛胚狀體具有抗疲勞的作用，這為鐵皮石斛替代品的開發(fā)提供了實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

[1] 中國藥典2010年版.一部[S]．2010：85.

[2] 魏·吳普等述，清·孫星衍等輯．神農(nóng)本草經(jīng)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：21．

[3] 郁美娟，孟慶華，黃德音，等．石斛屬植物有效成分及藥理作用研究[J] ．中成藥，2003，25(11)：918．

[4] 白世淼,戎曙欣,陳小華.石斛爽目顆粒治療視疲勞的療效觀察[J] ．河北中醫(yī)藥學(xué)報，2009，24(3)：23．

[5] 程志清，龔文波，姚 立，等．SD大鼠心氣虛證動物模型的研制[J] ．中國中醫(yī)藥科技，2003,10(6)：361．

[6] 趙 暉，李宗友．杜仲葉藥理作用研究(Ⅱ)-抗疲勞及愈傷作用[J] ．國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)·中藥分冊，2000,22(4)：211．

[7] 于文兵，嚴 政．核能補劑對小鼠游泳和大鼠跑臺運動能力的影響[J] ．南京體育學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版)，2004,3(1)：43．

[8] 劉詩瓊，秦曉群，李世勝．黃精多糖對小鼠抗疲勞作用的實驗研究[J] ．中國當(dāng)代醫(yī)藥，2009,16(10)：31．

2010-11-01

[修回日期] 2010-12-01

Theexperimentalstudyofanti-fatigueeffectoftheembryoidinDendrobiumcandidumWal1.ExLind.onrat

XIN Tian1,2, CHU Zhi-Yong2,LUAN Jie2, TANG Jia-Jing3, SUN Qian1,2,ZHAI Yan-Jun1

(1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China;2.Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China;3.Shanghai Tangzhen Biotechnology CO,LTD., Shanghai 201900, China)

ObjectiveTo study the anti-fatigue effect of the embryoid of D．officinale on rat.MethodsMale rat were randomly divided into 6 groups : 3 test groups were administered with the embryoid of D．officinale (0.2、0.4、0.8 g/kg, respectively),others were positive control group (D.officinale 1.2 g/kg), normal control group and running control group respectively. The changes of Glu, Lactic Acid LD were measured before, after and 30min after running respectively. The BUN and liver glycogen and muscle glycogen were measured after running.ResultsCompared with the running group, each dosage group of the embryoid of D.officinale could increase the Glu content as well as reduce Lactic Acid LD content after running 30 min in rat. Middle-dose group and high-dose group can obviously reduce the BUN content and retain the liver glycogen and muscle glycogen content.ConclusionThe embryoid of D．officinale had the effect of anti-fatigue on rat.

DendrobiumcandidumWal1．ExLind1.(D．officinale); embryoid; rat; running; anti-fatigue

辛 甜(1986-)，女，碩士研究生.Tel: (021)81883187,E-mail:todayenglish@sina.com.

翟延君.Tel：(0411)87586003，E-mail:lnzyzyj@sohu.com.儲智勇.Tel: (021)81883188,E-mail:zhiyongchu@tom.com.

R961

A

1006-0111(2010)01-0021-03