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    Ki67、PTEN在卵巢漿液性腫瘤中的表達及臨床意義

    2011-11-15 07:38:12鄧秀娟吳海根
    實用癌癥雜志 2011年4期
    關(guān)鍵詞:性囊交界陽性細(xì)胞

    鄧秀娟 吳海根

    卵巢漿液性腫瘤中大約有9%~15%為交界性腫瘤,發(fā)病率有逐年上升的趨勢?;谀壳癒i67基因、PTEN基因與卵巢交界性漿液性囊腺瘤的確切關(guān)系尚不明了,本研究采用免疫組化法檢測Ki67和PTEN在正常卵巢組織、卵巢漿液性囊腺瘤、卵巢交界性漿液性囊腺瘤和卵巢漿液性囊腺癌組織中的表達情況,探討其與卵巢交界性漿液性囊腺瘤組織的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    選擇江西省婦幼保健醫(yī)院2004年1月~2009年l2月收治的、并經(jīng)手術(shù)病理檢查證實的32例卵巢交界性漿液性囊腺瘤患者,年齡17~58歲,中位年齡31歲。所選患者均為初發(fā)者,術(shù)前未接受過放化療﹑激素及免疫治療。11例正常卵巢組織來源于同期功能失調(diào)性子宮出血行全宮加雙附件手術(shù)者。標(biāo)本均經(jīng)術(shù)后病理檢查確診,所有組織術(shù)后用10%福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片。依據(jù)2000年FIGO卵巢惡性腫瘤臨床分期標(biāo)準(zhǔn)進行分期:Ⅰ~Ⅱ期22例,Ⅲ ~Ⅳ期10例,組織學(xué)類型:卵巢交界性漿液性囊腺瘤﹑卵巢漿液性囊腺瘤和卵巢漿液性囊腺癌。

    1.2 實驗試劑

    鼠抗人Ki67、鼠抗人PTEN單克隆抗體和SP試劑盒,均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。染色步驟按試劑盒說明書進行,DAB顯色。以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

    1.3 染色結(jié)果判定

    PTEN以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒狀物質(zhì)為陽性表達。根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)占腫瘤細(xì)胞總數(shù)比例進行分級。以高倍鏡下每個視野計數(shù)100個細(xì)胞中陽性細(xì)胞數(shù)作為判斷標(biāo)準(zhǔn):陽性細(xì)胞數(shù) <5%為陰性“-”,5% ~25%為弱陽性“+”,26% ~50%為中度陽性“++”,>50%為強陽性“+++”。Ki67抗原以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒狀物質(zhì)為陽性染色。陰性(-):無著色細(xì)胞;陽性(+):陽性細(xì)胞數(shù)<30%;中度陽性(++):陽性細(xì)胞數(shù)30% ~50%;強陽性(+++):陽性細(xì)胞數(shù)>50%。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

    采用統(tǒng)計學(xué)軟件包SPSS13進行統(tǒng)計學(xué)分析,應(yīng)用卡方檢驗(Fisher精確檢驗)和統(tǒng)計圖。

    2 結(jié)果

    2.1 Ki67和PTEN在不同卵巢組織中的表達(表1)

    Ki67與PTEN表達卵巢交界性漿液性囊腺瘤與卵巢漿液性囊腺癌組織比較,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),而卵巢交界性漿液性囊腺瘤組織與卵巢漿液性囊腺瘤組織比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。

    表1 不同卵巢組織中Ki67和PTEN表達情況(例)

    2.2 Ki67和PTEN表達與卵巢交界性漿液性囊腺瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系

    PTEN表達與卵巢交界性漿液性囊腺瘤臨床分期顯著相關(guān)(P=0.03),而Ki67表達與其臨床分期無明顯相關(guān)性(P>0.05)。PTEN和Ki67表達均與患者年齡無關(guān)(P >0.05),見表2。

    表2 PTEN和Ki67表達與卵巢交界性漿液性囊腺瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例)

    2.3 Ki67與PTEN表達的關(guān)系

    在正常卵巢﹑卵巢漿液性囊腺瘤和卵巢交界性漿液性囊腺瘤組織中,PTEN表達率明顯高于Ki67表達率,但在卵巢漿液性癌組織中Ki67表達率明顯高于PTEN表達率,兩者表達呈負(fù)相關(guān)性(圖1)。

    3 討論

    PTEN定位于人的染色體10q23,是1種腫瘤抑制基因,具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂的雙重功能,且具有控制生長或負(fù)調(diào)控、抑制轉(zhuǎn)化細(xì)胞的惡性表達的基因。當(dāng)PTEN基因發(fā)生缺失或突變時,將會導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。大量的實驗研究已經(jīng)證實,PTEN基因在腫瘤的胚胎期以及與腫瘤的血管形成、局部浸潤及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤的分化程度、腫瘤的大小有密切關(guān)聯(lián),有證據(jù)顯示PTEN基因與人類多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān),目前國內(nèi)外在卵巢交界性漿液性囊腺瘤中PTEN基因研究相對較少。本組研究發(fā)現(xiàn):在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN蛋白陽性表達率明顯降低,說明卵巢漿液性囊腺癌中存在著PTEN蛋白的缺失,PTEN基因的失活可能在卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)病中起一定的作用。PTEN蛋白的表達在卵巢漿液性囊腺癌中顯著減少,提示PTEN基因在卵巢漿液性囊腺癌發(fā)生中作為早期分子事件發(fā)揮重要作用。本組研究表明在卵巢交界性漿液性囊腺瘤中臨床分期越晚PTEN陽性表達率就越低,結(jié)果與國外報道的一致[1,2],提示PTEN與卵巢交界性漿液性囊腺瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),其異常表達可能是構(gòu)成卵巢交界性漿液性囊腺瘤進一步分化的分子基礎(chǔ),并可能成為反映卵巢交界性漿液性囊腺瘤進展程度及預(yù)后的指標(biāo)之一。

    圖1 Ki67和PTEN在各卵巢組織中的表達

    Ki67為目前較為肯定的核增殖標(biāo)志基因,出現(xiàn)在除G0期和G1早期所有細(xì)胞周期的特異性非組蛋白。在M期達到最大表達峰,與細(xì)胞的合成代謝有關(guān),是確定良性和惡性組織生長狀態(tài)的1種標(biāo)記。本研究為了探索PTEN在卵巢交界性漿液性囊腺瘤中是否可以抑制癌細(xì)胞的增殖,而選用了Ki67反映不同組類卵巢漿液性細(xì)胞的增殖狀態(tài),結(jié)果顯示在卵巢交界性漿液性囊腺瘤中,PTEN表達強度與臨床分期有關(guān),與患者年齡無關(guān)。PTEN與Ki67的表達呈負(fù)相關(guān),Ki67的陽性表達率從正常卵巢到癌組織呈現(xiàn)遞增的趨勢,提示在卵巢交界性漿液性囊腺瘤的發(fā)生和進展中,PTEN蛋白表達的缺失和減少可能增加了腫瘤細(xì)胞的增殖活性,從而使Ki67的表達增強。Hrushesky等[3]提出Ki67可作為乳腺癌術(shù)前內(nèi)分泌治療評估其預(yù)后的一項重要指標(biāo),Khouja等[4]通過多因素分析顯示Ki67高表達與患者較短的生存率有關(guān),Ki67可能成為卵巢癌Ⅲ期患者獨立的預(yù)后標(biāo)記物。而本組研究顯示Ki67對卵巢交界性漿液性囊腺瘤患者的早期診斷和預(yù)后估計可能有一定的參考價值。

    癌癥的發(fā)生是1個長期的多步驟、多因素的變化過程。Ki67與PTEN均參與細(xì)胞周期調(diào)控和細(xì)胞凋亡,兩者作用環(huán)節(jié)一致,但生物學(xué)效應(yīng)相反。PIEN表達下調(diào)、Ki67表達上調(diào)提示卵巢交界性漿液性囊腺瘤的預(yù)后不良。Gomes等[5]提出PTEN的失活可能是導(dǎo)致Ⅰ期卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)生的早期表現(xiàn)。Kimura等[6]研究發(fā)現(xiàn),PTEN陽性表達率在子宮內(nèi)膜癌的分期比較中無統(tǒng)計學(xué)意義,而Ki67陽性表達率有統(tǒng)計學(xué)意義,提出PTEN表達的缺失發(fā)生在高分化的子宮內(nèi)膜樣腺癌的早期階段。本組研究顯示抑癌基因PTEN在卵巢漿液性囊腺癌中也有表達,但相對癌基因Ki67來講,其表達強度明顯降低,PTEN在卵巢交界性漿液性囊腺瘤組的分期比較中有統(tǒng)計學(xué)意義。有文獻報道卵巢交界性漿液性囊腺瘤可能與早期的卵巢漿液性癌有關(guān)[7].可對此進行深入研究,探討出卵巢交界性漿液性囊腺瘤的標(biāo)記物。促進對卵巢交界性漿液性囊腺瘤的預(yù)防和治療領(lǐng)域的探索。

    Shoman等[8]對100例雌激素陽性他莫西芬治療后的乳腺癌患者進行研究,結(jié)果顯示他莫西芬治療失敗的患者中PTEN表達缺失。P?lcher等[9]提出在晚期卵巢癌術(shù)前輔助治療中,Ki67表達增高可作為對化療表現(xiàn)耐藥的一項指標(biāo)。吳卉娟等[10]研究轉(zhuǎn)染野生型PTEN重組質(zhì)粒能有效提高卵巢癌A2780細(xì)胞內(nèi)PTEN的表達,顯著增強A2780細(xì)胞對紫杉醇?xì)拿舾行?。因而,PTEN作為卵巢交界性漿液性囊腺瘤基因治療的靶基因具有理論價值及實際意義,而本組研究顯示Ki67和PTEN在卵巢交界性漿液性囊腺瘤良惡性發(fā)展中有重要意義。

    綜上所述,Ki67和PTEN的表達可能在卵巢交界性漿液性囊腺瘤的發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用,可為不同人群中研究卵巢交界性漿液性囊腺瘤的病因、發(fā)病學(xué)環(huán)節(jié)提供有用的分子生物學(xué)檢測指標(biāo),同時也可為臨床診斷和輔助治療提供重要依據(jù),可能成為卵巢交界性漿液性囊腺瘤的標(biāo)記物和評價其預(yù)后的指標(biāo)。

    [1]Sui L,Dong Y,Watanabe Y,et al.Alteration and clinical relevance of PTEN expression and its correlation with survivin expression in epithelial ovarian tumors〔J〕.Oncol Rep,2006,15(4):773.

    [2]褚 艷 ,岳天孚.卵巢漿液性囊腺癌中PTEN、survivin和MMP-2的表達及臨床意義〔J〕.實用婦產(chǎn)科雜志,2009,25(9):535.

    [3]Hrushesky WJ,Retsky M,Baum M,et al.Prognostic value of Ki67 expression after short-term presurgical endocrine therapy for primary breast cancer〔J〕.J Natl Cancer Inst,2007,99(13):1053.

    [4]Khouja MH,Baekelandt M,Nesland JM,et al.The clinical importance of Ki67,p16,p14,and p57 expression in patients with advanced ovarian carcinoma〔J〕.Int J Gynecol Pathol,2007,26(4):418.

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    [7]Shao HL,Shen DH,Xue WC.et al.Clinicopathologic analysis and expression of cyclin D1 and p53 of ovarian borderline tumors and carcinomas〔J〕.Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi,2007,42(4):227.

    [8]Shoman N,Klassen S,McFadden A,et al.Reduced PTEN e xpression predicts relapse in patients with breast carcinoma treated by tamoxifen〔J〕.Mod Pathol,2005 ,18(2):250.

    [9]P?lcher M,F(xiàn)riedrichs N,Rudlowski C,et al.Changes in Ki-67 labeling indices during neoadjuvant chemotherapy for advanced ovarian cancer are associated with survival〔J〕.Int J Gynecol Cancer,2010,20(4):555.

    [10]吳卉娟,吳海濤,翁丹卉,等.PTEN基因增強卵巢癌A2-780細(xì)胞對紫杉醇敏感性的研究〔J〕.中國癌癥雜志,2007,17(9):669.

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