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    阿德呋啉對人工感染雞球蟲病的療效試驗

    2011-11-14 08:02:36吳麗君曾明華江善祥阮祥春萬榮峰
    中國獸藥雜志 2011年9期
    關(guān)鍵詞:艾美耳阿德卵囊

    吳麗君,曾明華,江善祥,阮祥春,萬榮峰

    (1.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,合肥 230036;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué),南京 210095)

    雞球蟲病(Coccidiosis)是由艾美耳屬(Eimeria)的多種球蟲引起的嚴(yán)重危害家禽生長發(fā)育和造成嚴(yán)重環(huán)境污染的疾?。?]。其發(fā)病率為50% ~70%,死亡率20% ~80%[2]。據(jù)報道,全世界每年因球蟲病造成的經(jīng)濟損失多達(dá)20億美元,抗球蟲藥的年消費為3億多美元[3-4]。目前,防治雞球蟲病的主要手段仍是用藥[5],自從 Levine[6]發(fā)現(xiàn)磺胺類藥物具有抗球蟲作用以來,至今用于防治球蟲病的藥物有50余種。但前人的研究證明,球蟲幾乎對所有使用過的抗球蟲藥都有耐藥蟲株的出現(xiàn),只是產(chǎn)生耐藥性所需的時間和耐藥性強弱不同而已[7-8]。球蟲耐藥性的產(chǎn)生導(dǎo)致抗球蟲藥物使用年限縮短,防治效果不佳,甚至失敗,引起臨床或亞臨床雞球蟲病,造成經(jīng)濟損失。為解決耐藥性問題,常采用綜合防治措施,而開發(fā)新藥則是根本解決辦法。

    本試驗在長期篩選的基礎(chǔ)上,研制出核苷類化合物阿德呋啉。該藥通過干擾球蟲的嘌呤代謝而發(fā)揮抗球蟲作用。抗球蟲活性主要集中在球蟲的無性生殖期,對卵囊的孢子化也有一定的抑制作用。它是一種新型廣譜抗球蟲藥物,與其他抗球蟲藥無交叉耐藥性,從而有效治療耐藥蟲株的感染。本試驗?zāi)康氖窃u價這種新型抗球蟲藥對人工感染雞球蟲病的治療效果,探索其使用濃度,為臨床合理用藥提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗動物 1日齡羅曼雄性雛雞購于合肥長豐雞場,出殼后即運至實驗室,飼喂不含任何藥物的飼料,自由飲水,無球蟲飼養(yǎng)至20日齡,經(jīng)糞檢確認(rèn)無球蟲卵囊后供試驗用。

    1.2 試驗藥物 阿德呋啉,批號200909025,粉劑,含量75%,安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)藥理室與南京農(nóng)業(yè)大學(xué)共同研制;磺胺喹噁啉,批號20100226,粉劑,含量≥95%,安徽華澳動物藥業(yè)有限公司提供。

    1.3 方法

    1.3.1 試驗分組 將19日齡健康雞稱重,剔除精神狀態(tài)不佳、生長發(fā)育不良、體重過大或過小的雞只,共120只,隨機分為6組,每組20只,各感染及給藥分組情況如表1所示。

    表1 試驗分組及藥物添加情況

    1.3.2 人工感染 供試卵囊:從肥西某雞場按常規(guī)方法采集混合卵囊,其中主要為柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和布氏艾美耳球蟲,經(jīng)孢子化后保存在本實驗室備用。給藥24 h后,除不感染不給藥組外,各組每只雞經(jīng)口接種5萬個孢子化卵囊。

    1.3.3 給藥方法 除陽性對照組和陰性對照組外,在接種卵囊前24 h,給各試驗組拌料混飼給藥,連續(xù)用藥7 d。

    1.3.4 試驗期限及臨床觀察 試驗期為7 d,每日觀察雞的發(fā)病情況,記錄血便和死亡數(shù)等。人工感染后第7天,收集每組雞的糞便進(jìn)行糞便卵囊計數(shù);至第8天,將各組雞分別稱重并全部撲殺,觀察并記錄試驗雞的增重及盲腸和小腸病變情況。

    1.3.5 藥效判定標(biāo)準(zhǔn)

    1.3.5.1 相對增重率 試驗開始及結(jié)束時分別稱雞只體重,計算平均增重和相對增重率。以不感染不給藥組在試驗期間相對增重率為100%,計算其他各組的相對增重率,相對增重率×100即為相對增重率得分。

    1.3.5.2 存活率 記錄各組死亡雞數(shù),算出死亡率及存活率。

    1.3.5.3 病變值 感染后第8天宰殺各組全部雞只,參照J(rèn)ohnson和Reid[4]設(shè)計的病變記分法,記錄每只雞的病變記分,將每組各雞的病變記分相加得病變值總分。腸道正常、無肉眼可見病變記0分,有少量散在病變記1分,較多稀疏病變記2分,有融合性大面積病變記3分,病變廣泛融合、腸壁增厚記4分。

    1.3.5.4 卵囊值 根據(jù)卵囊比數(shù)計算卵囊值(表2)。卵囊比數(shù)(%)=(各試驗組卵囊數(shù)/感染不給藥組卵囊數(shù))×100。

    表2 卵囊值計算方法

    1.3.5.5 抗球蟲指數(shù)(ACI)ACI=(存活率 +相對增重率)-(病變值+卵囊值)。ACI<120,為無效;ACI在120~160范圍內(nèi),為低效;ACI在160~180之間,為中效;ACI>180,為高效。

    2 結(jié)果

    2.1 臨床觀察 感染不給藥組雞感染卵囊后,逐漸出現(xiàn)采食減少、羽毛蓬亂、精神差、昏睡等反應(yīng),第5天起,有血便出現(xiàn),第6~7天開始死亡。死亡雞經(jīng)剖檢發(fā)現(xiàn),盲腸腫大,有血水郁積,盲腸和小腸上有出血點;磺胺喹噁啉組及30 mg/kg阿德呋啉組的雞精神稍差,第5、6天出現(xiàn)少量血便,有少量雞只死亡;60 mg/kg阿德呋啉組、90 mg/kg阿德呋啉組、陰性對照組無臨床癥狀和死亡。

    2.2 抗球蟲療效 試驗結(jié)果如表3所示。

    表3 阿德呋啉對人工感染雞球蟲病的防治效果

    從表3可以看出,各給藥組雞增重差異顯著較大。阿德呋啉90 mg/kg組相對增重率為83.2%,其結(jié)果經(jīng)F檢驗,與不感染不給藥組差異不顯著(P>0.05);阿德呋啉60 mg/kg組相對增重率與不感染不給藥組相比,差異顯著(P<0.05);而其他各給藥組及陽性對照組的相對增重率與不感染不給藥組比較,均差異極顯著(P<0.01)。從 ACI來看,阿德呋啉 90 mg/kg組為183.2,為高效抗球蟲藥。其余各給藥組ACI均小于120,無抗球蟲效果。

    3 討論

    本試驗采用雞球蟲野外分離株混合人工感染發(fā)病。其感染不給藥組,血便嚴(yán)重,卵囊值、病變值和死亡率較高,其他各給藥組均有不同程度的病理變化,但90 mg/kg阿德呋啉組除外,其中30 mg/kg阿德呋啉組有死亡。阿德呋啉是目前核苷類化合物中作為抗球蟲藥物的唯一品種[9]。它通過干擾球蟲的嘌呤代謝而發(fā)揮抗球蟲作用。其抗球蟲作用峰期為球蟲的無性生殖期,即在球蟲感染后1~3 d作用最強。同時它對球蟲卵囊形成階段也有效,可使卵囊的毒力降低,減少感染力。因此,適用于治療及預(yù)防各種雞球蟲病,阿德呋啉屬廣譜抗球蟲藥,對柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和毒害艾美耳球蟲都有效。本試驗采用混合蟲種感染,阿德呋啉90 mg/kg組獲得良好的治療效果,其抗球蟲指數(shù)ACI為183.2,屬高效抗球蟲藥;30、60 mg/kg組則效果不好,說明該藥在發(fā)揮治療作用時應(yīng)使用較高濃度。從表3可見,阿德呋啉90 mg/kg組具有較好的平均增重率,其卵囊值和病變值為零,存活率為100%。而該藥的低濃度(30 mg/kg)組的存活率較低,與感染不給藥對照組差異不顯著(P>0.05)?;前粪瓏f啉藥物對照組ACI僅為71.9,說明感染蟲株對該藥已產(chǎn)生耐藥性[10]。

    綜合本次試驗結(jié)果,阿德呋啉可完全控制球蟲混合感染,有效對抗盲腸和小腸球蟲。該藥廣譜高效,抗球蟲機制獨特,與其他抗球蟲藥不產(chǎn)生交叉耐藥性,可用于耐藥蟲株的感染,是一種新型的抗球蟲劑。該藥首次進(jìn)入臨床,在我國尚無生產(chǎn),開發(fā)該藥有助于雞球蟲病的臨床治療,特別適用于換藥方案給藥。

    [1]孔繁瑤.家畜寄生蟲學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1997:328-334.

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