• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用快速測(cè)定大曲中的揮發(fā)性風(fēng)味成分

    2011-10-28 07:32:50張春林敖宗華炊偉強(qiáng)沈才洪陶文沂張宿義
    食品科學(xué) 2011年10期
    關(guān)鍵詞:吡嗪大曲揮發(fā)性

    張春林,敖宗華,炊偉強(qiáng),沈才洪,陶文沂,*,張宿義

    (1.江南大學(xué)生物工程學(xué)院,江蘇 無(wú)錫 214122;2.瀘州老窖股份有限公司,四川 瀘州 646000)

    頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用快速測(cè)定大曲中的揮發(fā)性風(fēng)味成分

    張春林1,敖宗華2,炊偉強(qiáng)1,沈才洪2,陶文沂1,*,張宿義2

    (1.江南大學(xué)生物工程學(xué)院,江蘇 無(wú)錫 214122;2.瀘州老窖股份有限公司,四川 瀘州 646000)

    為探討大曲中的揮發(fā)性風(fēng)味成分,采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法(HS-SPME-GC-MS)分析瀘州老窖中高溫大曲的揮發(fā)性成分,考察萃取頭、萃取時(shí)間、萃取溫度對(duì)大曲樣品中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)萃取的影響。結(jié)果表明:采用50/30μm碳分子篩/聚二乙烯基苯/聚二甲基硅氧烷(DVB/CAR on PDMS)纖維頭在50℃條件下對(duì)大曲樣品頂空吸附30min,萃取效果最好;大曲樣品的分析表明,其揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)中含量較高的是醇類、酯類和酮類化合物,另外還含有一些吡嗪類化合物。該方法對(duì)大曲中常見(jiàn)揮發(fā)性風(fēng)味成分的測(cè)定有良好的重復(fù)性和回收率,方便快速。

    頂空固相微萃取法;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用;瀘州老窖大曲;揮發(fā)性風(fēng)味化合物

    大曲是以單一小麥或小麥、大麥和豌豆混合物為原料,經(jīng)粗粉碎后加水壓成磚狀曲坯,人工控制在一定的溫度、濕度條件下培育而成的粗酶制劑[1]。它是釀酒發(fā)酵的動(dòng)力,用于蒸餾酒的釀造。目前許多名優(yōu)白酒就是利用大曲作為釀酒的原料。大曲微生物區(qū)系以霉菌占大多數(shù),酵母菌和細(xì)菌比較少[2]。在大曲制造過(guò)程中微生物的代謝產(chǎn)物和原料的分解產(chǎn)物直接或間接地構(gòu)成了白酒的風(fēng)味物質(zhì),使白酒具有各種不同的獨(dú)特的風(fēng)味[3]。因此,大曲還是生香劑。不少專家認(rèn)為,大曲中富含大量香味前驅(qū)物質(zhì),因此,大曲本身就是一種香味物質(zhì)的富集物,所謂的曲香正是一種表現(xiàn)[4]。然而目前對(duì)于大曲中的香味物質(zhì)研究較少。

    分析樣品中的香味物質(zhì),通常要對(duì)香氣成分進(jìn)行濃縮預(yù)處理。傳統(tǒng)的濃縮預(yù)處理方法有液-液萃取法、頂空法、吹掃捕集法、同時(shí)蒸餾萃取法和固相萃取法[5]。這些方法都不同程度地存在某些缺點(diǎn),或費(fèi)用太高,或樣品量過(guò)多、耗時(shí)過(guò)長(zhǎng),或使用的是對(duì)人體有害的昂貴的有機(jī)溶劑,對(duì)操作者造成潛在的危害,還可能在濃縮過(guò)程中丟失揮發(fā)性物質(zhì)。與傳統(tǒng)的風(fēng)味物質(zhì)抽提技術(shù)相比,固相微萃取(SPME)簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)安全、無(wú)溶劑、選擇性好且靈敏度高,可直接與氣相色譜-質(zhì)譜、高效液相色譜、毛細(xì)管電泳儀等聯(lián)用,集采樣、萃取、進(jìn)樣于一體,大大加快了分析檢測(cè)的速度[6-7],近年來(lái)該技術(shù)在食品風(fēng)味分析中應(yīng)用越來(lái)越廣泛[8-12]。

    本研究采用HS-SPME與氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用的方法,優(yōu)化頂空固相微萃取法參數(shù),探討HS-SPME用于分離大曲中香氣物質(zhì)的可行性,對(duì)大曲樣品的香氣物質(zhì)進(jìn)行定性定量測(cè)定。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    大曲樣品及其前處理:瀘州老窖中高溫大曲優(yōu)級(jí)曲;將采集的到的整塊大曲粉碎后并全部過(guò)40目篩,混合均勻后,取0.5g大曲樣品放入頂空瓶中再加入飽和NaCl溶液5mL蓋上瓶蓋。

    Trace MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó)Finnigan公司;DB-WAX彈性石英毛細(xì)管柱(30m×0.25mm,0.25 μm)、萃取裝置:SPME手動(dòng)進(jìn)樣手柄、萃取頭(85μm PA、100μm PDMS、75μm CAR/PDMS、50/30μm DVB/CAR on PDMS) 美國(guó)Supelco公司;Turbo Matrix TD熱脫附進(jìn)樣器 美國(guó)Perkin Elmer公司。頂空進(jìn)樣瓶(15mL)中國(guó)安譜公司;RCT-Basic加熱磁力攪拌器 日本島津公司。

    1.2 頂空固相微萃取條件

    萃取頭的老化:第一次使用時(shí)50/30μm DVB/CAR on PDMS萃取頭在氣相色譜進(jìn)樣口270℃老化1h,75μm CAR/PDMS萃取頭在氣相色譜進(jìn)樣口300℃老化1h,85 μm PA萃取頭在氣相色譜進(jìn)樣口280℃老化1h,100μm PDMS萃取頭在氣相色譜進(jìn)樣口250℃老化0.5h。

    萃取條件:50/30μm DVB/CAR on PDMS萃取纖維頭,于50℃插入加入飽和 NaCl 5mL的大曲樣品(0.5g)頂空吸附30min,于250℃解吸5min后進(jìn)行GC-MS分離鑒定。

    1.3 氣相色譜-質(zhì)譜分析條件

    氣相色譜條件:DB-WAX色譜柱(30m×0.25mm,0.25μm); 載氣為He,流速1mL /min; 程序升溫:起始溫度40℃,保持3min,以5℃/min 升溫速率升至80℃,最后以10℃/min升至230℃/min 保持7min;汽化室溫度250℃;不分流。

    質(zhì)譜條件:電子轟擊電離(E I)離子源,電子能70eV,發(fā)射電流200μA,電子倍增器電壓350V,離子源溫度200℃, 接口溫度250℃,質(zhì)量范圍33~450u。

    1.4 定性與定量分析

    定性:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理由Xcalibur軟件完成,未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索的同時(shí)與NIST譜庫(kù)(107000個(gè)化合物的數(shù)據(jù))和Wiley譜庫(kù)(320000個(gè)化合物的數(shù)據(jù))相匹配,只有當(dāng)正反匹配度均大于800(最大值為1000)的鑒定結(jié)果才予以確認(rèn)。

    定量:選擇2-辛醇為內(nèi)標(biāo)(終質(zhì)量濃度10ng/mL),大曲樣品中鑒定的化合物質(zhì)以與2-辛醇質(zhì)量濃度之比計(jì)算。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 固相微萃取纖維頭的篩選

    選用4種萃取頭在相同的吸附條件(50℃吸附30min)和解吸條件(250℃解吸5min)下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。從表1來(lái)看,50/30μm DVB/CAR on PDMS的總的峰面積為5.5×108,幾乎是85μm PA總峰面積的7.6倍,100μm PDMS的12.0倍和75 μ m CAR /PDMS的1.9倍,說(shuō)明50/30μ m DVB/CAR on PDMS的吸附能力比其他的萃取頭強(qiáng),這和文獻(xiàn)[13]報(bào)道一致。從檢出的有效化合物的個(gè)數(shù)來(lái)看,50/30μm DVB/CAR/PDMS檢出了55種化合物,而75μm CAR/PDMS檢出了47種化合物,比單一組分涂層的85 μm PA(35種化合物) 和100μm PDMS(38種化合物)要多。這主要是因?yàn)檩腿☆^涂層的極性不同的緣故[14]。萃取頭對(duì)所分析的化合物有選擇性,對(duì)大曲樣品而言,50/30 μm DVB/CAR on PDMS 復(fù)合涂層的萃取頭更加適合,不僅分離出的化合物比較全面,而且風(fēng)味強(qiáng)度也很大,色譜分析響應(yīng)值較高,因而選擇作為實(shí)驗(yàn)用萃取頭[10,15]。

    表1 不同萃取頭的萃取效果Table 1 Effect of fiber type on volatile extraction

    2.2 萃取時(shí)間的選擇

    選用50/30μm DVB/CAR on PDMS萃取頭,萃取溫度為50℃的條件下,比較5個(gè)不同吸附時(shí)間對(duì)吸附效果的影響。由圖1可知,萃取時(shí)間延長(zhǎng),萃取物總峰面積增加。吸附時(shí)間從10min增加到30min時(shí)峰面積增加較明顯;當(dāng)吸附時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)到50min時(shí),總峰面積變化幅度不大,趨于平衡,可能此時(shí)存在吸附-解吸附平衡。因此選擇吸附時(shí)間為30min,此時(shí)間正好與GCMS分析樣品所需的時(shí)間比較接近,從而提高了單位時(shí)間內(nèi)樣品分析的效率。

    圖1 萃取時(shí)間對(duì)萃取效果的影響Fig.1 Effect of time on volatile extraction

    2.3 萃取溫度的選擇

    萃取溫度對(duì)萃取效果的影響具有兩面性:一方面,溫度升高有利于吸附,尤其對(duì)頂空固相微萃?。涣硪环矫?,溫度升高又會(huì)增加萃取頭固有組分的解吸,從而降低萃取頭對(duì)被分析組分的吸附能力。選用50/30μm DVB/CAR on PDMS萃取頭,萃取時(shí)間為30min的條件下,由圖2可明顯看到,吸附溫度升高時(shí)吸附量有所增加,但是,萃取溫度由50℃提高到60℃時(shí)總峰面積增加幅度不大,而檢出的有效化合物數(shù)目在減少,所以選擇50℃作為吸附溫度,此時(shí)檢出的化合物最多,所吸附的樣品量足夠用于GC-MS分析。

    圖2 萃取溫度對(duì)萃取效果的影響Fig.2 Effect of temperature on volatile extraction

    2.4 萃取方法的有效性驗(yàn)證

    采用上述優(yōu)化的分析操作條件,重復(fù)3次實(shí)驗(yàn),考察頂空固相微萃取法在分析大曲樣品中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)時(shí)的重復(fù)性和回收率。結(jié)果見(jiàn)表2,經(jīng)計(jì)算,組分峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)最大為39.4%,最小為1.9%,平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為10.9%,說(shuō)明將頂空固相微萃取技術(shù)用于大曲風(fēng)味物質(zhì)的分析重復(fù)性良好。

    表2 大曲樣品中鑒定的揮發(fā)性風(fēng)味成分和含量(n=3)Table 2 Identified volatiles and their contents in Daqu sample(n= 3)

    在大曲樣品中加入幾種具有代表性的揮發(fā)性風(fēng)味成分,與不加入的大曲樣品同時(shí)測(cè)定,按照加標(biāo)回收率的方法計(jì)算,結(jié)果見(jiàn)表3。大曲樣品中幾種具有代表性的風(fēng)味組分回收率范圍在87.5%~114.0%,幾種代表性化合物的回收率都較高,說(shuō)明該法具有很好可靠性和準(zhǔn)確性。

    表3 大曲樣品中部分揮發(fā)性風(fēng)味成分的回收率Table 3 Recoveries of several of identified volatiles from spiked Daqu sample

    2.5 大曲樣品中揮發(fā)性風(fēng)味成分的分析

    圖3 大曲中揮發(fā)性成分的總離子流圖Fig.3 GC-MS total ion chromatograms of volatiles in Daqu sample

    從表2分析結(jié)果來(lái)看,大曲的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)主要為醇類(28.6%)、酯類(16.0%)、酮類(8.9%)、醛類(7.1%),另外吡嗪類(17.9%)在大曲中占有很高的含量。從單個(gè)化合物的含量上看,含量最高的化合物是2-戊醇,其次是苯乙醇,其他的重要微量揮發(fā)性化合物依次是乙酸乙酯、四甲基吡嗪、己醛、十六酸甲酯、3-甲基丁醇、正已醇、三甲基吡嗪、亞油酸甲酯、丁酸甲酯等。醇類可以產(chǎn)生使人愉快的氣味,3-甲基丁醇、苯乙醇本身還具有花草和水果的香氣;酯類物質(zhì)一般都具有水果香,乙酸乙酯在大曲中含量較高,可能對(duì)曲香形成有有較大貢獻(xiàn);吡嗪類物質(zhì)一般都具有烘焙和堅(jiān)果香,可能與大曲發(fā)酵過(guò)程中頂溫會(huì)超過(guò)50℃,由美拉德反應(yīng)產(chǎn)生;分析對(duì)曲香形成有較大貢獻(xiàn)的風(fēng)味物質(zhì),還需要利用GC-O法進(jìn)一步研究[16-17]。范文來(lái)等[15]曾研究過(guò)醬香型白酒生產(chǎn)大曲,由于大曲生產(chǎn)工藝的明顯不同,特別是生產(chǎn)工藝的溫度和時(shí)間不同,濃香型白酒大曲中檢測(cè)到的揮發(fā)性成分要顯著少于醬香型白酒大曲。圖3為瀘州老窖中高溫大曲在最佳條件下使用HSSPME檢測(cè)到的微量揮發(fā)性成分的GC-MS圖。

    3 結(jié) 論

    本實(shí)驗(yàn)建立了一種快速、簡(jiǎn)單、樣品用量少的測(cè)定大曲樣品中揮發(fā)性成分的頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法,用該法能較好地萃取大曲樣品中的醇類、酯類、醛類、酮類、吡嗪等揮發(fā)性風(fēng)味成分。對(duì)其中醇類、酯類和吡嗪類等具有代表性的揮發(fā)性成分測(cè)定的重復(fù)性良好,加標(biāo)回收率也較高。說(shuō)明該法可較準(zhǔn)確地用于大曲樣品中揮發(fā)性風(fēng)味成分的定量分析。為研究大曲風(fēng)味,提高其質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù),并為濃香型白酒香味成分的來(lái)源提供參考依據(jù)。

    [1] 沈怡方. 白酒生產(chǎn)技術(shù)全書[M]. 北京: 中國(guó)輕工業(yè)出版社, 1998.

    [2] 羅惠波, 黃治國(guó), 李浩, 等. 濃香型大曲微生物群落代謝多樣性研究[J]. 西南大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2009(7): 180-184.

    [3] FAN Wenlai, MICHAEL Q. Headspace solid phase microextraction and gas chromatography-olfactometry dilution analysis of young and aged Chinese "Yanghe Daqu" liquors[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2005, 53(20): 7931-7938.

    [4] 趙東, 李揚(yáng)華, 向雙全, 等. 頂空固相微萃取氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)定曲藥中的香味成分[J]. 釀酒科技, 2006(5): 92-94.

    [5] ZOCCOLILLO L, AMENDOLA L, CAFARO C, et al. Improved analysis of volatile halogenated hydrocarbons in water by purge-and-trap with gas chromatography and mass spectrometric detection[J]. Journal of Chromatography A, 2005, 1077(2): 181-187.

    [6] PROSEN H, ZUPAN L. Solid-phase microextraction[J]. TrAC Trends in Analytical Chemistry, 1999, 18(4): 272-282.

    [7] RISTICEVIC S, NIRI V H, VUCKOVIC D, et al. Recent developments in solid-phase microextraction[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry,2009, 393(3): 781-795.

    [8] 辛廣, 張博, 馮帆, 等. 軟棗獼猴桃果實(shí)香氣成分分析[J]. 食品科學(xué),2009, 30(4): 230-232.

    [9] BOSCH J, RIU M, GUADAYOL J, et al. Volatile profiles of sparkling wines obtained by three extraction methods and gas chromatographymass spectrometry (GC-MS) analysis[J]. Food Chemistry, 2007, 105(1): 428-435.

    [10] 郭方遒, 黃蘭芳, 周邵云. 頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法用于白術(shù)中揮發(fā)性成分的分析[J]. 色譜, 2007(1): 43-47.

    [11] UZI R, MEITAL E, CHENI Z, et al. Authenticity assessment of natural fruit flavour compounds in foods and beverages by auto-HS-SPME stereoselective GC-MS[J]. Flavor and Fragrance Journal, 2009, 25(1): 20-27.

    [12] 宋廷宇, 吳春燕, 侯喜林, 等. 薹菜風(fēng)味物質(zhì)的頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用分析[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(4): 185-188.

    [13] LUO Tao, FAN Wenlai, XU Yan. Characterization of volatile and semivolatile compounds in chinese rice wines by headspace solid phase microextraction followed by gas chromatography-mass spectrometry[J].Journal of the Institute of Brewing, 2008, 114(2): 172-179.

    [14] PETER P, PETRA K, MONIKA M, et al. Application of accelerated solvent extraction followed by gas chromatography, high-performance liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry for the determination of polycyclic aromatic hydrocarbons, chlorinated pesticides and polychlorinated dibenzo-p-dioxins and dibenzofurans in solid wastes[J]. Journal of Chromatography A, 1997, 774(1/2): 203-211.

    [15] 范文來(lái), 張艷紅, 徐巖. 應(yīng)用HS-SPME和GC-MS分析白酒大曲中微量揮發(fā)性成分[J]. 釀酒科技, 2007(12): 74-78.

    [16] 張青, 王錫昌, 劉源. GC-O法在食品風(fēng)味分析中的應(yīng)用[J]. 食品科學(xué), 2009, 30(3): 284-287.

    [17] BEATA P, WALDEMAR W. Application of gas chromatography-olfactometry (GC-O) in analysis and quality assessment of alcoholic beverages:a review[J]. Food Chemistry, 2008, 107(1): 449-463.

    Rapid Analysis of Volatile Compounds in Daqu by Headspace Solid-phase Microextraction Coupled to Gas Chromatography-Mass Spectrometry

    ZHANG Chun-lin1,AO Zong-hua2,CHUI Wei-qiang1,SHEN Cai-hong2,TAO Wen-yi1,*,ZHANG Su-yi2
    (1. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;2. Luzhou Laojiao Co. Ltd., Luzhou 646000, China)

    In order to analyze the composition of volatile compounds in the Luzhou Laojiao Daqu by headspace solid phase micro-extraction coupled with gas chromatography mass spectrometry detection (HS-SPME-GC-MS), the effects of SPME fiber type, adsorption time, and extraction temperature on volatile extraction were investigated. Using a 50/30 μm DVB/CAR on PDMS fiber for 30 min headspace adsorption at 50 ℃ provided optimum extraction for the Daqu. Then the fiber was introduced into the injection port of the GC-MS system (at 250 ℃ for 5 min). Fifty-five compounds were isolated and identified,among which alcohols, esters, and ketones were the prominent ones. In addition, some pyrazines were also found. In conclusion,the method is simple, fast and accurate with high reproducibility and sensitivity.

    headspace solid-phase microextraction (HS-SPME);gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS);Luzhou Laojiao Daqu;volatiles

    TS261.2

    A

    1002-6630(2011)10-0137-04

    2010-06-20

    四川省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2010SZ0032);釀酒生物技術(shù)及應(yīng)用四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室2008年度開放課題(NJ2009-01)

    張春林(1982—),男,博士研究生,主要從事發(fā)酵工程、風(fēng)味化學(xué)研究。E-mail:zcl818075@163.com

    *通信作者:陶文沂(1946—),男,教授,博士,主要從事發(fā)酵工程研究。E-mail:wytao1946@163.com

    猜你喜歡
    吡嗪大曲揮發(fā)性
    鈰基催化劑在揮發(fā)性有機(jī)物催化燃燒治理中的研究進(jìn)展
    分子催化(2022年1期)2022-11-02 07:11:20
    兩宋大曲異同考
    戲曲研究(2020年2期)2020-11-16 01:21:10
    揮發(fā)性有機(jī)物污染環(huán)保治理新思路的探討
    唐雅樂(lè)大曲存辭考略
    中華戲曲(2020年1期)2020-02-12 02:28:10
    貴州大曲
    遵義(2017年1期)2017-07-12 17:57:38
    貴州大曲
    遵義(2017年5期)2017-07-05 13:50:16
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水中18種揮發(fā)性有機(jī)物
    Water is Found in Moon Rocks
    濃香型“山莊老酒”中吡嗪類物質(zhì)的分析研究
    4H,8H-雙呋咱并[3,4-b:3',4'-e]吡嗪的合成及熱性能
    美国免费a级毛片| 十分钟在线观看高清视频www| 男人操女人黄网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 精华霜和精华液先用哪个| 国产成人av教育| 午夜视频精品福利| av有码第一页| 欧美性长视频在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 久久久久久国产a免费观看| 国产高清视频在线播放一区| 国产激情欧美一区二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 97碰自拍视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产精品爽爽va在线观看网站 | a级毛片a级免费在线| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品久久久人人做人人爽| 一本精品99久久精品77| 黑丝袜美女国产一区| 美女免费视频网站| www日本在线高清视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 好男人在线观看高清免费视频 | 国产高清videossex| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 免费在线观看日本一区| 日韩欧美三级三区| 男女那种视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 国产男靠女视频免费网站| 免费观看精品视频网站| 久久九九热精品免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品野战在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 嫩草影院精品99| 国产高清激情床上av| 国语自产精品视频在线第100页| 最新在线观看一区二区三区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 黄色成人免费大全| av福利片在线| 欧美性猛交黑人性爽| 2021天堂中文幕一二区在线观 | 男女视频在线观看网站免费 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 在线观看午夜福利视频| 精品免费久久久久久久清纯| 美女免费视频网站| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品一区二区免费欧美| 99在线视频只有这里精品首页| 国产黄色小视频在线观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 午夜福利高清视频| 高清在线国产一区| 欧美日韩乱码在线| 黑丝袜美女国产一区| 国产免费男女视频| www.熟女人妻精品国产| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 国产伦在线观看视频一区| 很黄的视频免费| av在线播放免费不卡| 久久人妻av系列| 国产极品粉嫩免费观看在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 精品日产1卡2卡| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产一级毛片七仙女欲春2 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产在线观看jvid| 搞女人的毛片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 成人午夜高清在线视频 | 国产午夜福利久久久久久| 午夜免费鲁丝| 欧美成狂野欧美在线观看| videosex国产| 国产精品久久久av美女十八| 一级a爱视频在线免费观看| 日日爽夜夜爽网站| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产成年人精品一区二区| 婷婷亚洲欧美| 高潮久久久久久久久久久不卡| 免费在线观看成人毛片| 久久亚洲真实| 日本 av在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 青草久久国产| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲三区欧美一区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久精品91蜜桃| 91在线观看av| √禁漫天堂资源中文www| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久久久久久午夜电影| 免费在线观看完整版高清| 手机成人av网站| 亚洲成人久久爱视频| 国产成人精品无人区| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 男人舔奶头视频| 亚洲精品在线美女| www日本在线高清视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 免费看日本二区| 18禁美女被吸乳视频| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精品久久久av美女十八| 欧美又色又爽又黄视频| 曰老女人黄片| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产激情久久老熟女| 黄片大片在线免费观看| 深夜精品福利| 99热这里只有精品一区 | АⅤ资源中文在线天堂| 午夜福利高清视频| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲第一电影网av| 日韩欧美免费精品| 免费在线观看完整版高清| 亚洲五月色婷婷综合| 丁香六月欧美| 黑人操中国人逼视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 狂野欧美激情性xxxx| 国产色视频综合| 国产伦人伦偷精品视频| 精品国产美女av久久久久小说| 日韩欧美三级三区| 天天添夜夜摸| 日韩av在线大香蕉| 亚洲一区二区三区色噜噜| 日韩欧美在线二视频| 国产精品久久视频播放| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美又色又爽又黄视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 特大巨黑吊av在线直播 | 一级片免费观看大全| 宅男免费午夜| 日韩欧美三级三区| 久久中文看片网| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 欧美精品亚洲一区二区| 精品国产国语对白av| 午夜久久久在线观看| 1024手机看黄色片| 夜夜爽天天搞| videosex国产| 黄色视频不卡| 黑丝袜美女国产一区| АⅤ资源中文在线天堂| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品久久视频播放| 亚洲第一青青草原| 国产免费av片在线观看野外av| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产一卡二卡三卡精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 老司机靠b影院| av电影中文网址| 一级毛片高清免费大全| 最新美女视频免费是黄的| 夜夜夜夜夜久久久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久久水蜜桃国产精品网| 一进一出好大好爽视频| 午夜福利一区二区在线看| 国产又爽黄色视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国内精品久久久久精免费| svipshipincom国产片| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲第一电影网av| 性欧美人与动物交配| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品一区二区三区四区五区乱码| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 在线看三级毛片| 久久久国产成人精品二区| 精品久久蜜臀av无| 热99re8久久精品国产| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 在线观看日韩欧美| 国产精品 国内视频| 1024视频免费在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产欧美日韩精品亚洲av| 宅男免费午夜| 亚洲av电影在线进入| 亚洲精华国产精华精| 成在线人永久免费视频| 99在线人妻在线中文字幕| 日韩精品免费视频一区二区三区| 在线视频色国产色| 最好的美女福利视频网| 999久久久国产精品视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 88av欧美| 免费在线观看影片大全网站| 午夜两性在线视频| 亚洲五月色婷婷综合| 少妇 在线观看| 午夜两性在线视频| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 十分钟在线观看高清视频www| 精品熟女少妇八av免费久了| 青草久久国产| 亚洲成av人片免费观看| 在线观看午夜福利视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 麻豆av在线久日| 一区二区三区精品91| 欧美日韩乱码在线| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 一二三四在线观看免费中文在| 色尼玛亚洲综合影院| 久久久久国产一级毛片高清牌| 又大又爽又粗| cao死你这个sao货| 夜夜爽天天搞| 日韩高清综合在线| 免费在线观看黄色视频的| 两性夫妻黄色片| 久9热在线精品视频| av福利片在线| 夜夜夜夜夜久久久久| 婷婷丁香在线五月| 亚洲国产中文字幕在线视频| 精品第一国产精品| 欧美最黄视频在线播放免费| 一级毛片女人18水好多| 窝窝影院91人妻| 日韩欧美国产在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 成人一区二区视频在线观看| 麻豆一二三区av精品| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美最黄视频在线播放免费| 色播亚洲综合网| 欧美成狂野欧美在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 欧美在线一区亚洲| 久久精品成人免费网站| 99久久国产精品久久久| 99久久综合精品五月天人人| 怎么达到女性高潮| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 嫩草影视91久久| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 正在播放国产对白刺激| 久久国产精品人妻蜜桃| 91麻豆av在线| 一级毛片精品| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 免费无遮挡裸体视频| 欧美日韩黄片免| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久精品影院6| 亚洲久久久国产精品| 90打野战视频偷拍视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产单亲对白刺激| 久久久久九九精品影院| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲成av人片免费观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 最好的美女福利视频网| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 俺也久久电影网| 亚洲第一电影网av| 亚洲一区中文字幕在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 99riav亚洲国产免费| 欧美一级毛片孕妇| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日本黄色视频三级网站网址| 国产一卡二卡三卡精品| 99久久无色码亚洲精品果冻| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久 成人 亚洲| 免费在线观看影片大全网站| 男女床上黄色一级片免费看| 久久性视频一级片| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产真人三级小视频在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 操出白浆在线播放| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲中文字幕日韩| 18禁国产床啪视频网站| 老鸭窝网址在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久国产乱子伦精品免费另类| 丝袜美腿诱惑在线| 国产视频内射| 久久久久久久久中文| www.自偷自拍.com| videosex国产| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 一级毛片精品| 男人舔女人的私密视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久久久久久久中文| 久久精品人妻少妇| 女性生殖器流出的白浆| 欧美黄色淫秽网站| 韩国av一区二区三区四区| 免费看a级黄色片| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲一区高清亚洲精品| 美女国产高潮福利片在线看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 日本 欧美在线| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲人成电影免费在线| 看片在线看免费视频| 亚洲真实伦在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲第一av免费看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 色av中文字幕| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 日韩欧美三级三区| tocl精华| 搡老岳熟女国产| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久九九热精品免费| 免费一级毛片在线播放高清视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 男人操女人黄网站| 亚洲av片天天在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 国产精品av久久久久免费| 老司机午夜福利在线观看视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 日本 av在线| 日韩大码丰满熟妇| 午夜免费鲁丝| 午夜视频精品福利| а√天堂www在线а√下载| 久久国产精品人妻蜜桃| 日韩免费av在线播放| 香蕉丝袜av| 精品久久久久久久久久久久久 | 一边摸一边做爽爽视频免费| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美一级毛片孕妇| 日本黄色视频三级网站网址| 久久中文字幕人妻熟女| 婷婷丁香在线五月| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲熟妇熟女久久| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产黄片美女视频| 久热这里只有精品99| avwww免费| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久国产精品影院| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 少妇粗大呻吟视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲av电影不卡..在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 91国产中文字幕| 99国产精品一区二区三区| 欧美午夜高清在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 精品无人区乱码1区二区| 韩国av一区二区三区四区| 精品国产美女av久久久久小说| 久久午夜亚洲精品久久| 一区二区三区国产精品乱码| 丁香欧美五月| 久久久久九九精品影院| 久久青草综合色| 亚洲国产精品sss在线观看| 后天国语完整版免费观看| 91九色精品人成在线观看| 亚洲美女黄片视频| 啦啦啦免费观看视频1| 久久精品91无色码中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 搡老岳熟女国产| 久9热在线精品视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 欧美黑人欧美精品刺激| 俺也久久电影网| 国产成+人综合+亚洲专区| 99热只有精品国产| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩中文字幕欧美一区二区| 天天添夜夜摸| 一本精品99久久精品77| av中文乱码字幕在线| 中国美女看黄片| 中文字幕高清在线视频| 久久狼人影院| 国产真实乱freesex| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品国产亚洲在线| 国产精品精品国产色婷婷| 黑人欧美特级aaaaaa片| 无遮挡黄片免费观看| 一本一本综合久久| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产黄a三级三级三级人| 欧美另类亚洲清纯唯美| 午夜福利高清视频| 久久中文字幕一级| xxxwww97欧美| 亚洲中文字幕日韩| 天天添夜夜摸| 国产片内射在线| 亚洲专区国产一区二区| 99re在线观看精品视频| 一级作爱视频免费观看| 超碰成人久久| 亚洲自拍偷在线| 99在线视频只有这里精品首页| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲精品美女久久av网站| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产男靠女视频免费网站| 久久久国产成人免费| www日本在线高清视频| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲第一电影网av| 国产野战对白在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 色老头精品视频在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 日韩欧美在线二视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产色视频综合| av免费在线观看网站| 大型av网站在线播放| 超碰成人久久| 99国产综合亚洲精品| 成人欧美大片| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 嫩草影视91久久| 1024手机看黄色片| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 黄片播放在线免费| 日本三级黄在线观看| netflix在线观看网站| 露出奶头的视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 夜夜夜夜夜久久久久| av欧美777| 我的亚洲天堂| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲色图av天堂| 久久九九热精品免费| 日韩欧美国产一区二区入口| 中出人妻视频一区二区| 1024香蕉在线观看| 精品高清国产在线一区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 国产精品永久免费网站| 一二三四社区在线视频社区8| 精品国产国语对白av| 国产成人精品无人区| 欧美三级亚洲精品| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产野战对白在线观看| 国产高清videossex| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 又黄又粗又硬又大视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 午夜视频精品福利| 精品午夜福利视频在线观看一区| 99热只有精品国产| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 午夜两性在线视频| 美女 人体艺术 gogo| avwww免费| 国产99久久九九免费精品| 丝袜美腿诱惑在线| 国产视频一区二区在线看| 女警被强在线播放| 午夜a级毛片| 国产99久久九九免费精品| 黄频高清免费视频| 欧美三级亚洲精品| 在线av久久热| 午夜免费观看网址| 亚洲av成人一区二区三| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲全国av大片| 欧美另类亚洲清纯唯美| 在线天堂中文资源库| 一区二区三区国产精品乱码| 男女视频在线观看网站免费 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 超碰成人久久| 一本一本综合久久| 成人三级黄色视频| 精品第一国产精品| 欧美激情高清一区二区三区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产日本99.免费观看| 国产精品久久久久久精品电影 | 人成视频在线观看免费观看| 久久香蕉精品热| 桃色一区二区三区在线观看| 久久天堂一区二区三区四区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 九色国产91popny在线| 成在线人永久免费视频| 在线观看免费视频日本深夜| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 一进一出好大好爽视频| 国产亚洲精品av在线| 日韩大码丰满熟妇| 最好的美女福利视频网| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 黄色视频,在线免费观看| 91在线观看av| 一区二区三区精品91| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日本一本二区三区精品| 18禁美女被吸乳视频| 999精品在线视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久久水蜜桃国产精品网| 曰老女人黄片| bbb黄色大片| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲国产欧美网| 两个人视频免费观看高清| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产单亲对白刺激| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美不卡视频在线免费观看 | 成人精品一区二区免费| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产亚洲欧美98| 男女床上黄色一级片免费看| 天天一区二区日本电影三级| 在线观看日韩欧美| 在线观看一区二区三区| 成人精品一区二区免费| 亚洲精品久久国产高清桃花| 成人av一区二区三区在线看| 久久草成人影院| avwww免费| 成人三级做爰电影| 国产一卡二卡三卡精品| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| avwww免费| 9191精品国产免费久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 免费一级毛片在线播放高清视频| 中国美女看黄片| 波多野结衣av一区二区av| 看免费av毛片| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产国语露脸激情在线看|