羧甲基化紅棗多糖制備及其活性

焦中高，劉杰超，王思新，楊公明*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊陵 712100；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所，河南 鄭州 450009 ；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院， 廣東 廣州 510642)

羧甲基化紅棗多糖制備及其活性

焦中高1,2，劉杰超2，王思新2，楊公明1,3,*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊陵 712100；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所，河南 鄭州 450009 ；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院， 廣東 廣州 510642)

利用紅棗多糖與單氯乙酸反應(yīng)制得7種紅棗多糖的羧甲基化修飾產(chǎn)物，并對其羧甲基取代度、溶解性、分子質(zhì)量及生物活性進(jìn)行分析測定。結(jié)果表明：制備得到的羧甲基化紅棗多糖的取代度分別為0.016～0.220，反應(yīng)液的pH值為12以上有利于羧甲基取代，但pH值的繼續(xù)升高使產(chǎn)物的得率大大降低；隨著羧甲基化過程中氫氧化鈉用量的增加，這7種羧甲基化紅棗多糖的分子質(zhì)量逐漸降低。紅外光譜分析結(jié)果顯示本方法在不改變紅棗多糖結(jié)構(gòu)的情況下，成功地完成了紅棗多糖的羧甲基化修飾；紅棗多糖的羧甲基化修飾可顯著增強(qiáng)其對α-葡萄糖苷酶的抑制活性，但卻顯著降低了紅棗多糖對α-淀粉酶的抑制活性；較低程度的羧甲基取代(DS=0.016～0.082)降低了紅棗多糖的透明質(zhì)酸酶抑制活性，而較高的羧甲基取代度(DS=0.200～0.220)可以增強(qiáng)紅棗多糖的透明質(zhì)酸酶抑制作用。

羧甲基化紅棗多糖；活性；α-淀粉酶；α-葡萄糖苷酶；透明質(zhì)酸酶

許多多糖如纖維素[1]、淀粉[2]、殼聚糖[3]等通過羧甲基化反應(yīng)制備了其衍生化產(chǎn)物，其中最熟知的羧甲基纖維素在20世紀(jì)20年代[4]首次被合成以后，如今已作為一種重要的工業(yè)原料廣泛應(yīng)用于清潔劑、石油開采、造紙、紡織等領(lǐng)域，作為增稠劑用于食品和藥劑配方中。多種多糖經(jīng)羧甲基化修飾后其水溶性提高，生物活性增強(qiáng)或增加了新的活性，并且羧甲基化反應(yīng)具有反應(yīng)過程易于控制、所用試劑價格低廉、反應(yīng)產(chǎn)物無毒性等優(yōu)點(diǎn)[5]，因此在多糖的結(jié)構(gòu)修飾研究中羧甲基化反應(yīng)得到廣泛的應(yīng)用。為探索紅棗多糖的構(gòu)效關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了紅棗多糖的羧甲基化修飾產(chǎn)物的制備研究，并對紅棗多糖的修飾產(chǎn)物的溶解性、分子質(zhì)量、生物活性等進(jìn)行研究，以期對羧甲基在紅棗多糖中的引入對其理化性質(zhì)和活性的影響有初步的了解，為以后紅棗多糖的進(jìn)一步開發(fā)利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紅棗多糖以文獻(xiàn)[6]方法制備。

酵母α-葡萄糖苷酶、豬胰α-淀粉酶、4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG) 美國Sigma 公司；透明質(zhì)酸酶、透明質(zhì)酸鈉 上海楷洋生物技術(shù)有限公司；其他試劑均為為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

Specord 50紫外-可見分光光度計 德國Analytic Jena公司；Waters高效液相色譜系統(tǒng)(1525二元泵、2414示差折光檢測器和Empower色譜工作站) 美國Waters公司；Milli-Q Academic超純水機(jī) 美國Millipore公司；BS214D電子分析天平 德國賽多利斯公司；6700紅外光譜儀 美國Thermo Fisher公司；JK 500 DV雙頻恒溫超聲波清洗器 合肥金尼克公司。

1.3 方法

1.3.1 羧甲基化紅棗多糖(CM-ZJP)的制備

CM-ZJP的制備依照文獻(xiàn)[7]方法略作變動。1g紅棗多糖溶于40mL 不同濃度的NaOH溶液 (0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5mol/L) 中，劇烈攪拌下緩慢加入6g單氯乙酸，混合物于60℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)3h，冷卻，用冰乙酸(或NaOH)中和至pH7.0，過濾，濾液于透析袋中對蒸餾水透析，透析袋內(nèi)溶液真空濃縮后冷凍干燥。得到的羧甲基化紅棗多糖分別記為CM-ZJP-1、CM- ZJP-2、CM-ZJP-3、CM-ZJP-4、CM-ZJP-5、CM-ZJP-6、CM- ZJP-7。

式中：m1為制備得到的羧甲基化紅棗多糖質(zhì)量；m2為使用的原紅棗多糖質(zhì)量。

1.3.2 羧甲基取代度測定

羧甲基化紅棗多糖的羧甲基取代度分析用分光光度法依照參考文獻(xiàn)[8]的方法測定。

1.3.3 羧甲基化紅棗多糖的溶解性

稱取一定數(shù)量的羧甲基化紅棗多糖置于小燒杯中，加入20mL蒸餾水，振蕩攪拌，觀察其在冷水、加熱或者超生輔助條件下的溶解情況。

1.3.4 分子質(zhì)量測定

色譜柱：SHODEX KS 804 柱(8mm×300mm，7μm)；柱溫60℃；流動相為超純水，流速1.0mL/min；進(jìn)樣量10μL；示差折光檢測器，內(nèi)溫3 0℃，靈敏度：4。

1.3.5 羧甲基化紅棗多糖的紅外光譜分析

干燥的羧甲基化紅棗多糖 6mg與100mg KBr混合研磨后壓片，于4000～400cm-1進(jìn)行掃描，DTGS檢測器。

1.3.6 羧甲基化紅棗多糖對α-淀粉酶抑制活性的測定

根據(jù)Udupa 等[9]的方法略作改動。100μL樣品溶液與100μLα-淀粉酶溶液在37℃預(yù)混合20min后，加入100μL 1%可溶性淀粉溶液起始反應(yīng)，反應(yīng)所用緩沖液為25mmol/L pH6.8的磷酸鹽緩沖液。反應(yīng)混合液于37℃反應(yīng)5min后，加入2mL DNS試劑，于100℃加熱5min，于冰水浴中冷卻并加入2mL蒸餾水稀釋，在波長540nm處測定吸光度(A1)，用緩沖液代替酶液作樣品溶液對照(AC1)，用緩沖液代替酶液和樣品溶液作空白對照(AC2)，用緩沖液代替樣品溶液測定的吸光度為A0。 用式(2)計算抑制率。

1.3.7 羧甲基化紅棗多糖對α-葡萄糖苷酶抑制活性的測定

根據(jù)Pierre等[10]的方法略作改動?？傮w積為3mL的樣品溶液與67mmol/L pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液和0.1mL 1U/mLα-葡萄糖苷酶于37℃預(yù)混合10min后，加入3mmol/L谷胱甘肽0.1mL，以0.25mL 10mmol/L對硝基苯-β-D-半乳糖吡喃糖苷(PNPG)起始反應(yīng)，37℃反應(yīng)20min 后，加入2mL 0.1mol/LNa2CO3溶液終止反應(yīng)，用分光光度計測定波長400nm 處的吸光度(A1)，用緩沖液代替酶液作樣品溶液對照(AC1)，用緩沖液代替酶液和樣品溶液作空白對照(AC2)，用緩沖液代替樣品溶液測定的吸光度記為A0。按式(3)計算抑制率。

1.3.8 羧甲基化紅棗多糖對透明質(zhì)酸酶抑制活性的測定

根據(jù)Eve 等[11]的方法略作改動。以pH6.0、0.2mol/L乙酸-乙酸鈉溶液為緩沖液，一定濃度的樣品溶液50μL與50μL 1mg/mL透明質(zhì)酸酶混合后，加入50μL 3.44mg/mL透明質(zhì)酸鈉溶液起始反應(yīng)，反應(yīng)液總體積為0.5mL。反應(yīng)于37℃進(jìn)行15min后，加入2mL 2.5% 十六烷基三甲基溴化銨 (CTAB)的2% NaOH溶液終止反應(yīng)，15min后測定反應(yīng)液在波長400nm處吸光度(A1)。用緩沖液代替酶液做樣品對照(AC1)，用緩沖液代替酶液和樣品溶液作空白對照(AC2)，用緩沖液代替樣品測定的吸光度記為A0。按式(4)計算抑制率。

2 結(jié)果與分析

2.1 羧甲基化紅棗多糖的制備

對不同pH值條件下制備的羧甲基化紅棗多糖的得率和取代度進(jìn)行測定。

表1 反應(yīng)液 pH值對羧甲基化紅棗多糖制備的影響Table 1 Effect of reaction pH on the production of CM-ZJPs

如表1所示，隨著反應(yīng)液中NaOH 濃度的增加即反應(yīng)液pH值的增加，產(chǎn)物的羧甲基取代度逐漸增加，特別是NaOH 濃度從2mol/L增加為2.5mol/L時，即反應(yīng)液的pH值從11.85增加到12.6時，此時取代度的增加更加明顯。但取代度增加的同時伴隨著產(chǎn)物得率的降低。

而在紅棗多糖用量不變、反應(yīng)溫度不變的條件下，NaOH溶液體積和單氯乙酸(MCA)用量同時加倍，也會增加羧甲基取代度，但產(chǎn)物的得率稍有降低(表2)。因此，在使反應(yīng)液的pH值保持在最適條件下的同時，適當(dāng)增加NaOH和單氯乙酸的用量，有利于羧甲基取代度的增加。

表2 試劑用量對羧甲基化紅棗多糖制備的影響Table 2 Effect of reagent amount on the production of CM-ZJPs

在改變反應(yīng)條件使產(chǎn)物羧甲基取代度增加的同時，都或多或少存在產(chǎn)物得率降低的現(xiàn)象(圖1)，這可能是由于在較強(qiáng)的反應(yīng)條件如高溫、高NaOH 和單氯乙酸濃度的條件下，發(fā)生了更多的高分子質(zhì)量物質(zhì)的降解，小分子降解產(chǎn)物在透析的過程中被損失掉，而被冷凍干燥回收到的羧甲基化大分子物質(zhì)減少而表現(xiàn)為產(chǎn)物得率的降低。在對某一物質(zhì)進(jìn)行羧甲基化修飾時，在關(guān)注產(chǎn)物取代度的同時，也必須考慮到得率的高低，因此，在羧甲基化修飾的過程中應(yīng)很好的控制反應(yīng)條件，以求在產(chǎn)物得率和羧甲基取代度之間尋求較好的平衡。

圖1 產(chǎn)物得率與取代度之間的關(guān)系Fig.1 Correlation between yield and DS of products

2.2 羧甲基化紅棗多糖的溶解性

紅棗多糖的羧甲基化修飾增加了其水溶性。在同樣濃度條件下，原紅棗多糖在冷水中溶解較慢，經(jīng)加熱或超聲輔助后能很好溶解，而經(jīng)羧甲基化修飾后溶解性顯著改善，在冷水中輕輕振搖后即能較快溶解。

2.3 羧甲基化紅棗多糖的分子質(zhì)量

利用排阻色譜測定了羧甲基化紅棗多糖的分子質(zhì)量，因樣品太多使圖中曲線太多，僅選取CM-ZJP-1、CM-ZJP-4、CM-ZJP-7的洗脫曲線(圖2)來表明羧甲基化過程中NaOH濃度對羧甲基化紅棗多糖分子質(zhì)量的影響。

圖2 羧甲基化紅棗多糖的洗脫曲線Fig.2 Elution curves of CM-ZJP and ZJPs

在羧甲基化過程中，如果沒有鏈的降解斷裂，由于羧甲基的靜電排斥而引起的鏈的剛性和寬度的變化，再加上羧甲基的引入，其在排阻色譜中的洗脫體積和原來的物質(zhì)相比應(yīng)該更小[5]。而由圖2可見，羧甲基化紅棗多糖的洗脫體積與原紅棗多糖相比反而稍有增加，并且隨著羧甲基化過程中所用NaOH濃度的增加，洗脫體積增加幅度更大，即重均分子質(zhì)量逐漸減小，低分子質(zhì)量多糖的含量逐漸增加。這也同時表明在羧甲基化過程中隨著NaOH用量的增加，紅棗多糖的降解程度相對增加，從而有更低分子質(zhì)量多糖的產(chǎn)生。

2.4 羧甲基化紅棗多糖的紅外光譜分析

羧甲基化紅棗多糖的紅外光譜圖(圖3)顯示，紅棗多糖的羧甲基化修飾產(chǎn)物除了仍具有多糖的特征紅外吸收峰：3441cm-1(O－H)、2921cm-1(C－H)、1260cm-1和1204cm-1(C－H變角振動)，1077cm-1(C－O－H)外，在1611cm-1羧基(－COOH)的C＝O非對稱振動吸收峰、1422cm-1處與羧基相連的甲基(－CH3)的C－H變角振動吸收、1328cm-1處C＝O的對稱伸縮吸收增強(qiáng)，并且隨著羧甲基取代度的增加吸收增強(qiáng)，充分表明了羧甲基化紅棗多糖中羧甲基(－OCH2－COOH)的存在。與原紅棗多糖的紅外光譜比較可知，本實(shí)驗(yàn)所用的羧甲基化方法在未改變原多糖的分子結(jié)構(gòu)的情況下成功地對其進(jìn)行了羧甲基化。

但從譜圖上可以看出，羧甲基化后紅棗多糖的羥基峰(3300cm-1)的強(qiáng)度僅稍有減小，說明紅棗多糖僅有部分羥基被羧甲基化且取代度較低。

圖3 羧甲基化紅棗多糖的紅外光譜Fig.3 IR spectra of ZJP and CM-ZJPs

2.5 羧甲基紅棗多糖的活性

2.5.1 羧甲基紅棗多糖對α-淀粉酶活性的影響

圖4 羧甲基化紅棗多糖對α-淀粉酶的抑制作用Fig.4 Inhibitory effect of CM-ZJPs againstα-amylase

由圖4可知，在實(shí)驗(yàn)條件下紅棗多糖對α-淀粉酶具有一定程度的抑制作用，但羧甲基的引入使其對α-淀粉酶的抑制作用大大減弱，甚至使其抑制作用幾乎完全喪失。因此推測羧甲基修飾部位可能是紅棗多糖與α-淀粉酶相互作用的結(jié)構(gòu)或相關(guān)結(jié)構(gòu)。

2.5.2 羧甲基紅棗多糖對α-葡萄糖苷酶活性的影響

由圖5可知，紅棗多糖的羧甲基化修飾后對α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用增強(qiáng)。即使是較低程度的羧甲基取代也會使紅棗多糖的α-葡萄糖苷酶抑制活性大幅增加。但取代度和α-葡萄糖苷酶抑制活性間沒有很好的量效關(guān)系。因此推測羧甲基可能對于多糖的高級結(jié)構(gòu)有重要影響，使多糖傾向于形成更有利于與酶結(jié)合的構(gòu)象。

圖5 羧甲基化紅棗多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制作用Fig.5 Inhibitory effect of CM-ZJPs againstα-glucosidase

2.5.3 羧甲基紅棗多糖對透明質(zhì)酸酶活性的影響

圖6 羧甲基化紅棗多糖對透明質(zhì)酸酶的抑制作用Fig.6 Inhibition effect of CM-ZJPs against hyaluronidase

由圖6可知，紅棗多糖的羧甲基化修飾對透明質(zhì)酸酶的抑制活性的影響比較復(fù)雜，產(chǎn)物的羧甲基取代度較低時(CM-ZJP-1～4)，其對透明質(zhì)酸酶的抑制活性降低，較高的羧甲基取代(CM-ZJP-5～7)會使紅棗多糖的透明質(zhì)酸酶抑制活性有所提高。因此推測羧甲基紅棗多糖對透明質(zhì)酸酶的抑制活性主要是由于多糖骨架的貢獻(xiàn)，和原有多糖相比，較小的多糖分子質(zhì)量、高羧甲基取代度更有利于增強(qiáng)其對透明質(zhì)酸酶的抑制活性。

3 討 論

在羧甲基紅棗多糖制備過程中反應(yīng)液的pH值對于羧甲基取代具有重要影響。在進(jìn)行紅棗多糖的羧甲基化修飾時，反應(yīng)液的pH值大約在12以上時更有利于羧甲基化取代的進(jìn)行。但隨著反應(yīng)液pH值的增加及產(chǎn)物取代度增加的同時，羧甲基化紅棗多糖的得率逐漸降低。NaOH濃度的增加對羧甲基化產(chǎn)物的取代度和得率的影響在腰果樹膠多糖[12]、淀粉[13]的羧甲基化修飾中也有類似的結(jié)果。產(chǎn)物得率降低的可能是由于隨著反應(yīng)液pH值的增加，在有利于羧甲基取代的同時伴隨著紅棗多糖的更嚴(yán)重的降解，降解產(chǎn)生的低分子片段在以后的透析中損失造成的。在對羧甲基紅棗多糖的分子質(zhì)量測定中也間接證實(shí)了這一點(diǎn)。

羧甲基化修飾能增加多糖水溶性，此特性在多種多糖中已有發(fā)現(xiàn)，如茯苓多糖的羧甲基化修飾使其水溶性提高才使其具有了生物應(yīng)用的基礎(chǔ)，幾乎不溶于水的虎奶多糖經(jīng)羧甲基化修飾后其溶解性可達(dá)30g/L以上[14]，Parvathy等[15]對半乳-甘露聚糖的羧甲基化修飾后使其溶解性提高。紅棗多糖的羧甲基化對其水溶性的影響的類似結(jié)果，可能是由于羧甲基的取代，改變了局部的空間位置情況，使羥基參與分子間氫鍵相對減少，多糖的親水性增加，從而使其水溶性提高。

葡萄糖苷酶抑制劑類藥物可與α-葡萄糖苷酶活性部位發(fā)生競爭性結(jié)合，阻滯消化過程中腸道的α-葡萄糖苷酶將雙糖分解為單糖，延緩碳水化合物的消化和吸收，從而可避免餐后血糖迅速上升，抑制餐后高血糖和胰島素過度分泌，減少患者血糖波動幅度，改善其血糖穩(wěn)定指數(shù)[16]。而從天然植物和藥物中尋找新的具有更低毒副作用、高效α-葡萄糖苷酶抑制劑則一直成為各國研究的熱點(diǎn)。除了分子質(zhì)量、多糖結(jié)構(gòu)對其α-葡萄糖苷酶的抑制作用具有重要影響外，紅棗多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制作用還可隨著羧甲基取代而大大增強(qiáng)，因此羧甲基化修飾可以作為提高紅棗多糖α-葡萄糖苷酶抑制活性的重要手段之一。以后還需對紅棗多糖結(jié)構(gòu)、多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制機(jī)理以及多糖的精確位點(diǎn)的羧甲基修飾等方面進(jìn)行深入研究，這些研究結(jié)果將對于有針對性地提高其α-葡萄糖苷酶抑制活性具有重要意義。

透明質(zhì)酸的合成和由透明質(zhì)酸酶催化的降解之間的平衡是正常組織的重要特征[17]。高羧甲基取代的紅棗多糖的較好的透明質(zhì)酸酶抑制活性對于調(diào)節(jié)透明質(zhì)酸代謝的慢性失衡，幫助組織動態(tài)平衡的重建有重要意義，但這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)還需要對紅棗多糖對透明質(zhì)酸酶的抑制機(jī)理、紅棗多糖的吸收與代謝等多方面的深入研究。

[1] TORUL H, ARSLAN N. Production of carboxymethyl cellulose from sugar beet pulp cellulose and rheological behaviour of carboxymethyl cellulose[J]. Carbohydrate Polymers, 2003, 54(1): 73-82.

[3] KURITA K. Controlled functionalization of the polysaccharide chitin[J].Progress in Polymer Science, 2001, 26(9): 1921-1971.

[4] 吳春, 劉祥萱, 王煊軍, 等. 羧甲基纖維素鈉及其金屬配合物的合成與表征[J]. 新技術(shù)新工藝, 2009, 10: 64-66.

[5] VERRAEST D L, PETERS J A, KUZEE H C, et al. Carboxymethylation of inulin[J]. Carbohydrate Research, 1995, 271(1): 101-112.

[6] 焦中高, 劉杰超, 周紅平, 等. 硫酸化修飾對紅棗多糖自由基和亞硝基清除活性的影響[J]. 中國食品學(xué)報, 2007, 7(2): 17-21.

[7] DURCILENE A S, REGINA C M, JUDITH P A, et al.Carboxymethylation of cashew tree exudate polysaccharide[J]. Carbohydrate Polymers, 2004, 58(2): 163-171.

[8] EYLER R W, KLUG E D, DIEPHUIS F. Determination of degree of substitution of sodium carboxymethylcellulose[J]. Analytical Chemistry,1947, 19(1): 24-27.

[9] UDUPA S L, PRABHAKAR A R, TANDON S.α-Amylase inhibitors in foodstuffs[J]. Food Chem, 1989, 34(2): 95-101.

[10] PIERRE C, ROLAND R, TREMBLEY D.P-Nitrophenol-αglucopyramoside as substrate for measurement of maltase activity in human semen[J]. J Clin Chem, 1978, 24(2): 208-211.

[11] EVE B, PHILLIP G, JAMES L H, et al. Inhibition of hyaluronidase activity by select sorghum brans[J]. J Med Food, 2008, 11(2): 307-312.

[12] SILVAA D A, PAULAA R C, FEITOSAA J P, et al. Carboxymethylation of cashew tree exudate polysaccharide[J]. Carbohydrate Polymers, 2004,58(2): 163-171.

[13] TIJSEN C J, KOLK H J, STAMHUIS E J, et al. An experimental study on the carboxymethylation of granular potato starch in non-aqueous media[J]. Carbohydrate Polymers, 2001, 45(3): 219-226.

[14] 王雁, 楊祥良, 鄧成華, 等. 羧甲基化虎奶多糖的制備及抗氧化性研究[J]. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展, 2000, 27(4): 411-414.

[15] PARVATHY K S, SUSHEELAMMA N S, THARANATHAN R N, et al. A simple non-aqueous method for carboxymethylation of galactomannans[J]. Carbohydrate Polymers, 2005, 62(2): 137-141.

[16] 小野順子.α-葡萄糖苷酶抑制劑[J]. 日本醫(yī)學(xué)介紹, 1999, 20(1): 22-24.

[17] SUQIMOTO K, IIZAWA T, HARADA H, et al. Cartilage degradation independent of MMP/aggrecanases[J]. Osteoarthritis Cartilage, 2004, 12(12): 1006-1014.

Carboxymethylation of Polysaccharide fromZizyphus jujubaFruits and Its Activity

JIAO Zhong-gao1,2， LIU Jie-chao2， WANG Si-xin2，YANG Gong-ming1,3,*
(1. College of Food Science and Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China；2. Zhengzhou Fruit Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450009, China；3. College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China)

Seven carboxymethylated derivatives of polysaccharide fromZizyphus jujubafruits (ZJP) were prepared by the reaction between ZJP and monochloroacetic acid. The degree of substitution (DS), solubility, molecular weight, and biological activity of each derivative were determined. Results showed that the DS of each derivative was 0.016－0.220. pH values higher than 12 were good for the substitution of carboxymethyl groups, but the yield of carboxymethylated products decreased sharply due to higher pH. The molecular weight of carboxymethyl ZJP (CM-ZJP) was reduced gradually with increasing NaOH amount during the carboxymethylation reaction. The infrared spectrum of CM-ZJP revealed that ZJP was successfully carboxymethylated without the change of ZJP structure during carboxymethylation. The carboxymethylation of ZJP exhibited an enhanced inhibitory effect againstα-glucosidase and a declined inhibitory effect againstα-amylase. Moreover, carboxymethyl substitution of ZJP at lower substitution degree (DS = 0.016－0.082) could decrease the inhibitory effect against hyaluronidase activity and increase the inhibitory effect against hyaluronidase activity at higher substitution degree (DS = 0.200－0.220).

carboxymethylZizyphus jujubapolysaccharide；activity；α-amylase;α-glucosidase；hyaluronidase

TS255

A

1002-6630(2011)17-0176-05

2011-06-30

河南省科技攻關(guān)計劃重點(diǎn)項目(82102140026)；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科研基金和中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項資助項目(0032007013)

焦中高(1972—)，男，副研究員，博士，主要從事果品營養(yǎng)與保鮮加工研究。E-mail：jchzz@sina.com

*通信作者：楊公明(1950—)，男，教授，博士，主要從事食品工程高新技術(shù)研究。E-mail：ygm@scau.edu.cn