氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)抑制冷害作用的影響

王艷穎，胡文忠*，田密霞，劉程惠，姜愛麗

(大連民族學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，生物化學(xué)工程國(guó)家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116600)

氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)抑制冷害作用的影響

王艷穎，胡文忠*，田密霞，劉程惠，姜愛麗

(大連民族學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，生物化學(xué)工程國(guó)家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116600)

為探索減輕李果實(shí)冷害的新途徑，以串紅李子為試材，對(duì)李果實(shí)經(jīng)不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理后冷害與酶促褐變機(jī)理進(jìn)行研究。結(jié)果表明，對(duì)照果在冷藏12d后，多酚含量和PPO活性都呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，MDA含量和冷害指數(shù)開始逐漸增加，說明此時(shí)冷害已經(jīng)開始啟動(dòng)。而氯化鈣處理則延緩多酚含量的上升趨勢(shì)，提高PPO、POD、CAT的活性，外觀冷害指數(shù)明顯降低，內(nèi)部冷害指數(shù)和MDA含量只有2%氯化鈣處理的明顯低于對(duì)照，SOD活性變化不大，只2%氯化鈣處理明顯高于其他處理果，說明氯化鈣處理從外觀上明顯地抑制了李果實(shí)冷害的發(fā)生，綜合分析比較內(nèi)外兩種冷害指數(shù)，只有2%氯化鈣處理抑制冷害的效果最好，貯藏期末多酚含量是對(duì)照果的1.16倍，POD活性是對(duì)照果的3.7倍，貯藏72d時(shí)內(nèi)部冷害指數(shù)只有42%，而對(duì)照果達(dá)57%，所以，李果實(shí)經(jīng)2%氯化鈣處理后貯藏品質(zhì)最好。

氯化鈣；李；冷害；酶促褐變

李子為薔薇科植物李的果實(shí)，我國(guó)大部分地區(qū)均產(chǎn)，7～8月間采收成熟果實(shí)。李子是屬于喜溫性果實(shí)，采后溫度高，果實(shí)內(nèi)部各種酶活性增強(qiáng)，引起呼吸作用增大，乙烯釋放加快，果膠質(zhì)分解加速，果實(shí)轉(zhuǎn)色及軟化加快，所以果實(shí)極易受損傷或病原菌侵染而腐爛變質(zhì)[1]。通常采用冷藏方法以延長(zhǎng)李果的貯藏期，但李果對(duì)低溫比較敏感，據(jù)報(bào)道，李果實(shí)貯藏在7℃以下會(huì)發(fā)生冷害[2]，冷害導(dǎo)致膜透性增加，酚類物質(zhì)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase，PPO)接觸氧化而導(dǎo)致果實(shí)發(fā)生酶促褐變[3]，同時(shí)，自由基平衡系統(tǒng)受到破壞，膜脂過氧化加劇，造成果實(shí)衰老加速，腐爛增加。據(jù)報(bào)道，Ca2+處理可減輕園藝作物采后的冷害，其機(jī)理一般認(rèn)為與其保護(hù)細(xì)胞中膠層結(jié)構(gòu)，減少細(xì)胞壁分解和穩(wěn)定膜結(jié)構(gòu)有關(guān)[4]。也有人提出Ca2+是傳遞低溫信息的胞內(nèi)第2信使的假說，認(rèn)為低溫首先引起胞質(zhì)中Ca2+濃度變化，從而引起細(xì)胞內(nèi)的各種生理反應(yīng)[5]。

目前，國(guó)內(nèi)有關(guān)Ca2+處理在減輕果蔬冷害方面的研究較少，為探索Ca2+處理抑制果蔬采后冷害的效果及生理代謝機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)通過氯化鈣處理采后的李果實(shí)，研究其在冷藏狀態(tài)下冷害與酶促褐變的關(guān)系，從而在生產(chǎn)實(shí)踐中為冷敏型果蔬的科學(xué)貯運(yùn)保鮮提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及處理

供試材料為李子，采自遼寧大連市瓦房店市松樹鎮(zhèn)朝陽村果園，選用色澤一致8～9成熟、大小均勻(單果質(zhì)量約170g)、無病蟲害和機(jī)械損傷的果實(shí)進(jìn)行以下3個(gè)處理：分別用(1)0.5% CaCl2、(2)1% CaCl2、(3)2% CaCl2浸果20min，晾干后置于0℃恒低溫條件下貯藏，未浸泡果在0℃恒低溫貯藏作為對(duì)照。每處理取30個(gè)果實(shí)進(jìn)行測(cè)試分析，每12d取樣測(cè)定各種生理指標(biāo)。每個(gè)處理按相同條件單獨(dú)貯藏一定數(shù)量的果實(shí)作為貯藏期間果實(shí)冷害的觀察。

1.2 試劑與儀器

鄰苯二酚(分析純)、聚乙烯吡咯烷酮(分析純)、愈創(chuàng)木酚(分析純)、硫代巴比妥酸(生化試劑)、氯化硝基四唑氮藍(lán)(生化試劑) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；三氯乙酸(分析純) 天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心；L-甲硫氨基酸(純度＞99%) 美國(guó)Sigma公司；核黃素(生化試劑) 北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司；其他試劑均為分析純。

電子天平 梅特勒-托利多儀器上海有限公司；DHG-9053A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；BR4i型高速冷凍離心機(jī) 法國(guó)Jouan公司；T-25型勻漿機(jī) 德國(guó)IKA公司；UV-2100型紫外-可見分光光度計(jì) 尤尼柯上海儀器有限公司；SiM-F140型制冰機(jī) 日本三洋公司；Lambda 25型紫外-可見分光光度計(jì) 美國(guó)Perkin Elmer公司；組合式氣調(diào)庫 大連冷凍機(jī)股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 多酚含量的測(cè)定

參照Pirie法[6]并修改：5g果肉組織與預(yù)冷的25mL 1% HCl-甲醇溶液充分研磨提取，然后于4℃、12000r/min離心10min，上清液直接用于比色，樣品重復(fù)測(cè)定3次。酚類含量以O(shè)D280/g表示。

1.3.2 PPO、POD活性及MDA含量的測(cè)定

1.3.2.1 提取液的制備

取10g去皮果肉，加1g PVP于20mL 0.2mol/L磷酸緩沖液pH6.4中，冰浴中研磨，4℃、13000r/min離心30min，取上清液測(cè)定酶活性和MDA含量。

1.3.2.2 PPO活性測(cè)定

參照Galeazzi等[7]的方法并加以改進(jìn)，將0.5mL粗酶提取液加入3mL 0.5mol/L鄰苯二酚溶液中。反應(yīng)溫度為25℃，加酶液后5s開始掃描10s內(nèi)398nm處光密度值的變化。酶活性以ΔOD398/(min·g)表示。

1.3.2.3 POD活性的測(cè)定

按照Putter的方法[8]并稍作修改，將0.5mL粗酶提取液加入2mL 0.2%愈創(chuàng)木酚中，在30℃水浴中平衡5min，然后加入1mL 0.3% H2O2，混勻，1min 后掃描1min內(nèi)460nm處光密度值變化。酶活性以ΔOD460/(min·g)表示。

1.3.2.4 MDA含量的測(cè)定

參照Heath等的方法[9]，將1.5mL粗酶提取液加入2.5mL 0.5%硫代巴比妥酸(TBA，用15%三氯乙酸配成)溶液中，混勻后在沸水浴中煮沸18min，迅速用自來水冷卻，并在10000r/min離心機(jī)中離心10min。取上清液在 532nm和600nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定光密度值。

1.3.3 SOD活性的測(cè)定

采用NBT方法[10]，以50%抑制的酶液量(μL)為1個(gè)酶活單位(U)。

1.3.4 CAT活性的測(cè)定

參照Acbi法[11]并修改，取5g果肉，加入10mL預(yù)冷的pH7.5 0.05mol/L磷酸緩沖液(內(nèi)含50mmol/L二硫蘇糖醇和1% PVP)，在冰浴中研磨成勻漿，12000r/min、4℃離心20min，收集上清液立即用于CAT酶活測(cè)定。CAT反應(yīng)體系包括粗酶液200μL和3mL 20mmol/L H2O2，以蒸餾水作參比。在240nm處測(cè)定2min內(nèi)的樣品吸光度變化。

1.3.5 冷害指數(shù)

0級(jí)：無冷害；1級(jí)：冷害斑面積小于果實(shí)的1/10；2級(jí)：冷害斑面積占果面的1/10～1/3；3級(jí)：冷害斑面積占果面的1/3～2/3；4級(jí)：冷害斑面積＞果面的2/3。

2 結(jié)果與分析

2.1 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)多酚含量的影響

圖1 氯化鈣對(duì)李果實(shí)多酚含量的影響Fig.1 Effect of calcium chloride on polyphenol content of plum fruits

酚類物質(zhì)的存在是果實(shí)發(fā)生酶促褐變的一個(gè)前提條件，它在多酚氧化酶的作用下氧化成醌而導(dǎo)致果實(shí)褐變。圖1所示，對(duì)照果的多酚含量從12d開始上升，后期又快速下降，可能是果實(shí)從12d開始出現(xiàn)冷害，引起細(xì)胞膜破裂導(dǎo)致酚類物質(zhì)外滲，然后外滲的酚類物質(zhì)又與組織中存在的PPO接觸氧化導(dǎo)致果實(shí)褐變，貯藏后期冷害加劇，酚類物質(zhì)大量消耗而減少。而氯化鈣處理延緩了多酚含量的上升，而且2%氯化鈣處理的效果最好，貯藏48d時(shí)達(dá)到峰值，比對(duì)照果延長(zhǎng)了1倍的時(shí)間。結(jié)果表明，各種濃度的氯化鈣處理均不同程度地延緩了李果實(shí)冷害的發(fā)生，尤其2%氯化鈣處理抑制李果實(shí)冷害的效果最好，貯藏后期酚類物質(zhì)仍保持較高的含量，果肉褐變程度較輕。

2.2 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)PPO活性的影響

圖2 氯化鈣對(duì)李果實(shí)PPO活性的影響Fig.2 Effect of calcium chloride on PPO activity of plum fruits

多酚氧化酶(PPO)能把酚類物質(zhì)氧化為醌而使果實(shí)發(fā)生褐變。如圖2所示，對(duì)照和處理果的PPO活性都呈現(xiàn)前期上升、后期下降的趨勢(shì)。對(duì)照果從12d開始呈明顯上升趨勢(shì)，24d又逐漸下降，與酚類物質(zhì)的變化趨勢(shì)相同，這說明李果實(shí)可能從12d開始啟動(dòng)冷害，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞，游離PPO活性提高，把酚類物質(zhì)氧化為醌后活性降低。與對(duì)照相比，處理果的PPO活性都明顯提高，36d時(shí)達(dá)到峰值，尤其0.5%氯化鈣處理的峰值比對(duì)照提高89%，而2%氯化鈣處理的PPO活性前期保持較低、后期保持較高的水平。說明氯化鈣處理促進(jìn)了果實(shí)的后熟，提高了PPO活性，減輕了李果實(shí)褐變的程度，延緩了李果實(shí)冷害的發(fā)生，尤其2%氯化鈣處理的效果更好，貯藏后期李果實(shí)的PPO活性維持在較高的水平。

2.3 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)POD活性的影響

圖3 氯化鈣對(duì)李果實(shí)POD活性的影響Fig.3 Effect of calcium chloride on POD activity of plum fruits

催化酶促褐變反應(yīng)的酶類除了多酚氧化酶(PPO)外，過氧化物酶(POD)在H2O2存在條件下也能迅速氧化多酚類物質(zhì)，與PPO協(xié)同作用引起果蔬的酶促褐變[12]。如圖3所示，對(duì)照和處理果的POD活性呈逐漸上升然后下降的趨勢(shì)，對(duì)照果POD活性在貯藏24d時(shí)開始上升，而處理果的POD活性明顯高于對(duì)照，但2%氯化鈣處理卻低于其他兩種處理。結(jié)果表明，對(duì)照果可能在24d之前就已經(jīng)產(chǎn)生冷害，冷害導(dǎo)致了H2O2的積累，從而誘導(dǎo)POD活性的上升，以提高果實(shí)抗冷害的能力。而氯化鈣處理提高了POD的活性，緩解李果實(shí)冷害的發(fā)生，尤其高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理清除自由基能力較強(qiáng)，有效地減輕了李果實(shí)冷害和褐變的程度。但低質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣使果實(shí)更易老化，造成貯藏后期李果實(shí)冷害加劇、果肉褐變較嚴(yán)重，其中具體原因有待進(jìn)一步研究。

2.4 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)MDA含量的影響

圖4 氯化鈣對(duì)李果實(shí)MDA含量的影響Fig.4 Effect of calcium chloride on MDA contents of plum fruits

MDA是膜脂過氧化的產(chǎn)物，其累積量的多少反映膜脂過氧化程度的高低。如圖4所示，對(duì)照和處理果的MDA含量都呈緩慢上升的趨勢(shì)，對(duì)照從12d開始MDA含量逐漸上升，以后快速增加，可能此時(shí)果實(shí)冷害已開始啟動(dòng)，貯藏期末明顯高于其他果。而處理果的MDA含量上升趨勢(shì)較緩慢，0.5%和1%氯化鈣處理的MDA含量前期明顯高于對(duì)照，而2%氯化鈣處理的MDA含量貯期一直明顯低于對(duì)照。結(jié)果表明，氯化鈣處理一方面促進(jìn)了果實(shí)的成熟老化，另一方面也抑制了膜脂過氧化，減輕了李果實(shí)冷害的程度，尤其高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理抑制李果實(shí)冷害效果更好，同時(shí)也減慢了果實(shí)老化的進(jìn)程，貯藏期末李果實(shí)仍然保持良好的貯藏品質(zhì)。

2.5 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)SOD活性的影響

圖5 氯化鈣對(duì)李果實(shí)SOD活性的影響Fig.5 Effect of calcium chloride on SOD activity of plum fruits

超氧化物歧化酶(SOD)作為植物抗氧化系統(tǒng)的第一道防線，主要功能是清除細(xì)胞中多余的超氧陰離子自由基，防止其對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)造成傷害[13]。如圖5所示，對(duì)照果和處理果的SOD活性都呈現(xiàn)相同的變化趨勢(shì)，對(duì)照果的SOD活性從24d 開始異常上升，48d時(shí)達(dá)到最大值是采后的1.8倍，且明顯高于處理果。說明對(duì)照果24d之前冷害已經(jīng)產(chǎn)生，導(dǎo)致超氧陰離子自由基增加，從而激發(fā)了SOD的活性，48d時(shí)冷害癥狀明顯，SOD清除超氧陰離子自由基的能力最強(qiáng)。隨著貯期的延長(zhǎng)，果實(shí)冷害加劇，SOD清除超氧陰離子自由基的能力下降。經(jīng)過氯化鈣處理的李果實(shí)SOD活性呈緩慢的變化趨勢(shì)，尤其2%氯化鈣處理的SOD活性明顯高于其他處理果。說明氯化鈣處理不同程度地抑制了超氧陰離子自由基的產(chǎn)生，維持活性氧代謝平衡，從而抑制了冷害的發(fā)生。但0.5%氯化鈣處理前期SOD活性較低，清除超氧陰離子自由基的能力較弱，后期冷害加劇誘導(dǎo)SOD活性的上升，同時(shí)果實(shí)褐變程度加劇。而高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理在貯期一直保持較高的活性，清除超氧陰離子自由基的能力較強(qiáng)，所以抑制冷害的效果更明顯。

2.6 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)CAT活性的影響

如圖6所示，對(duì)照和處理果的CAT活性均呈相同的變化趨勢(shì)，24d以前呈下降趨勢(shì)，24d以后開始上升，貯藏后期CAT活性下降。說明24d時(shí)李果實(shí)已發(fā)生冷害，產(chǎn)生了H2O2，從而誘導(dǎo)CAT活性的上升以清除過剩自由基，它與SOD相互協(xié)調(diào)配合對(duì)受冷害的細(xì)胞起到保護(hù)作用。這一結(jié)果與高慧[14]關(guān)于油桃果實(shí)發(fā)生冷害后CAT活性下降不同。處理果的CAT活性變化幅度較大，而且基本上高于對(duì)照果，尤其2%氯化鈣處理的CAT活性明顯高于其他果。結(jié)果表明，氯化鈣處理促進(jìn)了果實(shí)的成熟，提高了清除自由基的能力，從而提高了CAT的活性，緩解了李果實(shí)冷害的發(fā)生，尤其高濃度的氯化鈣處理清除自由基能力最強(qiáng)，抑制李果實(shí)冷害效果更好，貯藏后期保持了李果實(shí)良好的貯藏品質(zhì)。

圖6 氯化鈣對(duì)李果實(shí)CAT活性的影響Fig.6 Effect of calcium chloride on CAT activity of plum fruits

2.7 氯化鈣處理對(duì)李果實(shí)冷害指數(shù)的影響

圖7 氯化鈣對(duì)李果實(shí)外觀冷害指數(shù)的影響Fig.7 Effect of calcium chloride on external chilling injury index of plum fruits

圖8 氯化鈣對(duì)李果實(shí)內(nèi)部冷害指數(shù)的影響Fig.8 Effect of calcium chloride on internal chilling injury index of plum fruits

冷害指數(shù)反映了果實(shí)受冷害的程度，在0℃恒低溫貯藏條件下不同處理的李果實(shí)受冷害的程度不同，冷害癥狀也表現(xiàn)各異，這主要通過李果實(shí)的外觀和內(nèi)部冷害指數(shù)來綜合反映。

從圖7、8可以看出，李果實(shí)的外觀冷害指數(shù)和內(nèi)部冷害指數(shù)是不同的，圖7顯示出對(duì)照果在貯藏24d時(shí)已出現(xiàn)明顯的冷害癥狀，表現(xiàn)為：個(gè)別果實(shí)表皮呈現(xiàn)出大小不同的褐色斑點(diǎn)，果皮由采摘后鮮亮的黃紅色逐漸轉(zhuǎn)為暗紅色，這一冷害癥狀與香蕉李的明顯不同[15]。而此時(shí)處理果卻出現(xiàn)輕微的冷害癥狀，24d以后對(duì)照果的冷害指數(shù)顯著上升，其冷害癥狀表現(xiàn)為褐色斑點(diǎn)面積越來越大，果皮顏色變化不是太明顯，說明李果實(shí)不適合在低溫下長(zhǎng)期貯藏。而經(jīng)過氯化鈣處理的李果實(shí)外觀狀態(tài)明顯地減輕了李果實(shí)的冷害程度，表現(xiàn)為冷害斑點(diǎn)面積沒有明顯擴(kuò)大，果皮鮮亮程度變化也不明顯，但果實(shí)有輕微的軟化現(xiàn)象，而3種處理果相比較抑制果實(shí)冷害的效果差別不是很大，只是處理3抑制果實(shí)冷害效果略好一些。

圖8顯示的是果實(shí)內(nèi)部受冷害的程度，0.5%和1%氯化鈣處理的果實(shí)內(nèi)部冷害指數(shù)都明顯高于對(duì)照果，只有2%氯化鈣處理的內(nèi)部冷害指數(shù)明顯低于對(duì)照而抑制果實(shí)冷害的效果較好，其表現(xiàn)為0.5%和1%氯化鈣處理的果實(shí)內(nèi)部果肉褐變面積由內(nèi)到外逐漸擴(kuò)大明顯大于對(duì)照，只有2%氯化鈣處理果實(shí)內(nèi)部果肉褐變面積較小而低于對(duì)照果，所以，綜合果實(shí)內(nèi)部和外部?jī)煞N冷害指數(shù)可以得出，果實(shí)經(jīng)過較高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理果皮顏色較鮮亮，沒有明顯的褐色斑塊，而且果肉內(nèi)部褐變程度也較對(duì)照明顯減輕，說明高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氯化鈣處理抑制果實(shí)冷害的效果較顯著，能使果實(shí)保持良好的貯藏品質(zhì)。

3 結(jié)論與討論

冷害是指果實(shí)在組織冰點(diǎn)以上低溫脅迫下出現(xiàn)的生理機(jī)能障礙，是果實(shí)細(xì)胞代謝失調(diào)與紊亂的結(jié)果[14]。褐變是植物組織普遍存在的一種生理現(xiàn)象，通常認(rèn)為是酚類物質(zhì)在氧的作用下，被PPO氧化成醌所致[16]。在正常發(fā)育的果實(shí)中，酚類物質(zhì)、氧和PPO通過一系列膜系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)區(qū)域性分布使果實(shí)不發(fā)生褐變，當(dāng)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)被破壞后，酚類物質(zhì)和多酚氧化酶的區(qū)域化分布被打破，酚類物質(zhì)不斷滲出與游離態(tài)的PPO接觸，從而引起果肉的酶促褐變[17]。本研究認(rèn)為，冷害破壞李果實(shí)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，使區(qū)域化分隔狀態(tài)的酚類物質(zhì)大量外溢，結(jié)合態(tài)的PPO向游離態(tài)轉(zhuǎn)化，PPO活性增加，導(dǎo)致果實(shí)酶促褐變。所以，對(duì)照果在貯藏12d時(shí)已開始啟動(dòng)冷害，酚類物質(zhì)和PPO活性保持相同的上升下降趨勢(shì)，冷害又破壞了自由基代謝的平衡，果肉組織中的保護(hù)酶(SOD、POD、CAT)不能及時(shí)清除代謝產(chǎn)生的H2O2等活性氧，引起膜脂過氧化，MDA含量逐漸增加，冷害指數(shù)也顯著上升，隨著果實(shí)冷害的加劇，誘導(dǎo)了細(xì)胞保護(hù)酶活性的增強(qiáng)，從而提高了果實(shí)清除自由基的能力。而果實(shí)經(jīng)過氯化鈣處理后，酚類物質(zhì)的外滲受到抑制，各種酶活性都逐漸增加，外觀冷害指數(shù)明顯降低，MDA含量和內(nèi)部冷害指數(shù)中只有2%氯化鈣處理才低于對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，氯化鈣處理從外觀上明顯地抑制了冷害的發(fā)生，表現(xiàn)為果皮褐斑面積較小，果皮顏色較鮮亮；但從果實(shí)內(nèi)部品質(zhì)上看，0.5%和1%氯化鈣處理的果實(shí)果肉褐變較嚴(yán)重，軟化較明顯。所以，綜合以上情況表明，2%氯化鈣處理對(duì)冷害有很好的抑制效果，表現(xiàn)為果皮顏色較鮮亮，果肉褐變較輕，風(fēng)味良好，貯藏期末多酚含量是對(duì)照果的1.16倍，POD活性是對(duì)照果的3.7倍，貯藏72d時(shí)內(nèi)部冷害指數(shù)只有42%，而對(duì)照果達(dá)57%. 所以，2%氯化鈣處理的李果實(shí)貯藏品質(zhì)保持最好。

[1] 張廣燕, 王莉, 楊建民, 等. 影響李果實(shí)貯藏保鮮的因素及貯藏技術(shù)[J]. 保鮮與加工, 2004(6): 11-13.

[2] 都鳳華, 于偉, 李柏, 等. 間歇加溫對(duì)減少李子冷藏中低溫傷害的作用[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 1993, 15(4): 91-93.

[3] 孫秀蘭, 劉興華, 張華云, 等. 變溫貯藏對(duì)黑琥珀李品質(zhì)及生理特性的影響[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 2001, 29(2):109-113.

[4] 余挺, 席玙芳. CaCl2、AsA和GSH對(duì)冷害低溫下茄子果實(shí)氧化脅迫的抑制作用[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 1997, 19(4): 75-76.

[5] MINORSKY P V. Anheuristic hypothesis of chilling in plants: a role for calcium in temperature sensing by roots of cucumber seedlings[J]. Plant Cell Environ, 1986, 12 :137-143.

[6] PIRIE A, MULLINS M G. Changes in anthocyanin and phenolic content of grapevine leaf and fruit tissue treated with sucrose,nitrate and abscisic acid[J]. Plant Physiol, 1976, 58(4): 486-472.

[7] GALEAZZI M A M, SGARBIERI N. Purifilation and physiochemicl characterization of phenol oxidase from dwarf variety of banana (Musa cavendishii)[J]. J Food Sci, 1981, 46: 150-155.

[8] PEROXIDASE P J . Methods of enzymatic analysis[M]. New York:Academy Press, 1974: 685-689.

[9] HEATH R T, PACONTROLER L. Photoperoxidation in isolated chloroplasts.I.Kinetics and stoichiometry of fatty acid peroxidation[J].Archives of Biochemistry and Biophysics, 1968, 125(1): 189-198.

[10] CONSTANTINE N G, STANLEY K R. Superoxide dismutases[J].Plant Physio, 1977, 59: 309-314.

[11] ACBI H. Catalase in vitro[J].Methods Enzymol, 1984, 105: 121-126.

[12] TOMAS-BARBERAN F A. Phenolic compounds and related enzymes as determinants of quality in fruits and vegetable[J]. J Sci Food Agric,2001, 81(9): 853-870.

[13] BOWLER C, MONTAGU M V, INZE D. Superoxide dismutase and stress tolerance[J]. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology, 1992, 43: 83-116.

[14] 高慧, 饒景萍, 張少穎. 不同貯藏溫度下油桃果實(shí)的冷害生理研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2007, 35(10): 61-64.

[15] 王艷穎, 胡文忠, 李婷婷, 等. 間歇升溫對(duì)香蕉李貯藏中營(yíng)養(yǎng)成分的影響[J].食品工業(yè)科技, 2009, 30(6): 275-277.

[16] ROBARDS K, PRENZLER P D, TUCKER G, et al. Phenolic compounds and their role in oxidatibe processes in fruits[J].Food Chemistry,1999, 66(4): 401-436.

[17] TOMAS-BARBERAN F A, ESPIN J C. Phenolic compounds and related enzymes as determinants of quality in fruit and vegetables[J]. J Scvi Food Agric, 2001, 81(9): 853-876.

Inhibitory Effect of Calcium Chloride Treatment on Chilling Injury in Plum Fruits

WANG Yan-ying，HU Wen-zhong*，TIAN Mi-xia，LIU Cheng-hui，JIANG Ai-li
(Key Laboratory of Biochemistry Engineering, The State Ethnic Affairs Commission-Ministry of Education,College of Life Science, Dalian Nationalities University, Dalian 116600, China)

Plum (Chuanhong cultivar) fruits were treated with varying concentrations of calcium chloride before storage at 0 ℃to explore the effect and related mechanisms of calcium chloride treatment on chilling injury and enzymatic browning in plum fruits with the objective of discovering a new method to reduce chilling injury. The contents of polyphenols and malondialdehyde(MDA), the activity of PPO and chilling injury index in plum fruits from the control group were increased after storage at 0 ℃for 12d, which suggests the start of chilling injury. Calcium chloride treatment delayed the increase of polyphenol content,activated PPO, POD and CAT, and dramatically decreased external chilling injury index. However, only the 2% calcium chloride treated group had significantly lower internal chilling injury index and MDA content than the control group, and the activity of superoxide dismutase (SOD) had no obvious difference between both groups, but the SOD level in the 2% calcium chloride treated group was significantly higher than those in other groups. It showed that calcium chloride treatment inhibited chilling injury in plum fruits obviously in appearance. Based on a comprehensive comparison between the internal and external chilling injury indices, calcium chloride treatment at 2% concentration could inhibit chilling injury most effectively. At the end of storage,the content of polyphenol and POD activity in the 2% calcium chloride group was 1.16 and 3.7 times higher than those in the control group, and the internal chilling injury index was only 42% and that in the control group was as high as 57% after 72 d storage. In conclusion, 2% calcium chloride treatment could prevent chilling injury in plum fruits.

calcium chloride；plum；chilling injury；enzymatic browning

S662.3

A

1002-6630(2011)08-0286-05

2010-07-23

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30771508；30972038)；“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAD22B02)

王艷穎(1968—)，女，高級(jí)工程師，工程碩士，研究方向?yàn)楣呒庸けｕr工藝。E-mail：wyy@dlnu.edu.cn*通信作者：胡文忠(1959—)，男，教授，博士，研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)。E-mail：hwz@dlnu.edu.cn