• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草的生理影響

    2011-10-20 02:04:44姜錦林耿金菊高士祥王曉蓉南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院污染控制與資源化研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江蘇南京210046
    中國(guó)環(huán)境科學(xué) 2011年3期

    宋 睿,姜錦林,耿金菊,高士祥,王曉蓉(南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院,污染控制與資源化研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇南京 210046)

    不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草的生理影響

    宋 睿,姜錦林,耿金菊,高士祥*,王曉蓉**(南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院,污染控制與資源化研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇南京 210046)

    研究了苦草在不同濃度(0.02,0.05,0.10,0.30,0.60,1.00,3.00mg/L)銨態(tài)氮中暴露14d后,其生物量的變化、葉片游離氨基酸態(tài)氮、葉綠素、可溶性蛋白含量以及 O2-?信號(hào)強(qiáng)度、抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量的響應(yīng).結(jié)果表明,各濃度組苦草的生物量無(wú)顯著變化,但是各生理指標(biāo)變化顯著.當(dāng)銨態(tài)氮濃度為0.30mg/L時(shí),苦草葉片中游離氨基酸態(tài)氮的含量即開(kāi)始顯著升高.當(dāng)銨態(tài)氮濃度達(dá)到0.60mg/L時(shí),超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著升高,表明苦草誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激但未受到氧化損傷.當(dāng)銨態(tài)氮濃度高于1.00mg/L時(shí),SOD和過(guò)氧化物酶(POD)活性顯著升高,O2-?信號(hào)強(qiáng)度顯著增強(qiáng),葉綠素、可溶性蛋白含量顯著降低.當(dāng)銨態(tài)氮濃度為0.02mg/L時(shí),O2-?信號(hào)強(qiáng)度顯著增強(qiáng).綜上,銨態(tài)氮濃度低于0.60mg/L苦草生長(zhǎng)良好,濃度≥1.00mg/L苦草光合能力受到抑制、代謝受到干擾.苦草對(duì)銨態(tài)氮最敏感的生理生化指標(biāo)是葉片中游離氨基酸態(tài)氮含量.銨態(tài)氮作為沉水植物的一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),當(dāng)其含量較低時(shí),植物由于營(yíng)養(yǎng)缺乏誘導(dǎo)產(chǎn)生自由基.

    銨態(tài)氮;苦草;氨基酸態(tài)氮;葉綠素;可溶性蛋白;自由基;抗氧化酶

    藍(lán)藻水華生態(tài)災(zāi)害頻發(fā),嚴(yán)重威脅了區(qū)域水環(huán)境生態(tài)安全以及人民的健康[1].銨態(tài)氮是藍(lán)藻水華成災(zāi)過(guò)程中產(chǎn)生的重要代謝衍生物,尤其在藍(lán)藻水華暴發(fā)后期,大量的銨態(tài)氮釋放到水環(huán)境中,對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)中重要的初級(jí)生產(chǎn)者——沉水植物產(chǎn)生極大的影響.已有研究表明[2],銨態(tài)氮是沉水植物生長(zhǎng)所需要的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),但是高濃度的銨態(tài)氮對(duì)沉水植物的生長(zhǎng)有抑制作用,甚至?xí)苯訉?dǎo)致其消亡.高濃度的銨態(tài)氮抑制沉水植物的光合作用、誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激并且導(dǎo)致植物體內(nèi)碳氮代謝的不平衡[3-6].目前關(guān)于銨態(tài)氮對(duì)沉水植物生理影響的研究[3-5]大多集中于高濃度,其實(shí)驗(yàn)濃度高達(dá) 2~30mg/L.較低濃度銨態(tài)氮對(duì)沉水植物生理影響的研究鮮為報(bào)道.湖泊流域水質(zhì)通報(bào)的監(jiān)測(cè)結(jié)果表明,我國(guó)湖泊銨態(tài)氮的平均濃度≤1mg/L.因此,研究較低濃度銨態(tài)氮對(duì)沉水植物生理活動(dòng)的影響,尋找銨態(tài)氮對(duì)沉水植物的安全濃度,進(jìn)一步認(rèn)識(shí)銨態(tài)氮導(dǎo)致沉水植物衰退的機(jī)理,更具有實(shí)際意義.

    苦草(Vallisneria natans L.)是我國(guó)河流湖泊中分布最為廣泛的一種沉水植物,其常被作為富營(yíng)養(yǎng)化湖泊中沉水植物恢復(fù)重建的先鋒種[7].本實(shí)驗(yàn)研究了在實(shí)驗(yàn)室模擬條件下,不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草生物量、葉片游離氨基酸態(tài)氮、葉綠素、可溶性蛋白含量以及O2-?信號(hào)強(qiáng)度、抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量的影響,為銨態(tài)氮對(duì)沉水植物的影響提供更多理論依據(jù).

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    本實(shí)驗(yàn)所用苦草采自太湖胥口灣,挑選生長(zhǎng)良好、株高(20±2)cm、重(6.5±0.5)g的植株移栽到 24個(gè)無(wú)色玻璃缸(長(zhǎng) 15cm、寬 15cm、高25cm)中,每缸4株,玻璃缸底層鋪有厚度5cm的石英砂,加入10%的Hoagland′s營(yíng)養(yǎng)液預(yù)培養(yǎng)7d.

    2-(環(huán)己胺)-1-乙磺酸(CHES)GR 級(jí);1,2-二羥基-3,5-苯二磺酸二鈉(Tiron)AR級(jí);吐溫-20AR級(jí);氯化銨AR級(jí).

    1.2 實(shí)驗(yàn)處理

    預(yù)培養(yǎng)結(jié)束后,將24缸苦草分為8組,設(shè)置 7組不同銨態(tài)氮(NH4Cl配置)濃度的營(yíng)養(yǎng)液:0.02,0.05,0.10,0.30,0.60,1.00,3.00mg/L,同時(shí)設(shè)置一組無(wú)氮的對(duì)照組(CK).每組3個(gè)平行,每缸營(yíng)養(yǎng)液定容至5L.所用營(yíng)養(yǎng)液為Hoagland′s營(yíng)養(yǎng)液去除含氮的部分,均用曝氣 2d的自來(lái)水配制.將各組苦草放置于培養(yǎng)室中,控制培養(yǎng)室的溫度(25±1)℃,模擬自然光照強(qiáng)度,光暗時(shí)間比為 12h∶12h.每天換水一次,并測(cè)定水中銨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、硝態(tài)氮的濃度.控制營(yíng)養(yǎng)液的pH值7.8±0.2,DO≥4mg/L.14d后,取各組苦草葉片樣品先用自來(lái)水沖洗干凈、再用去離子水沖洗3次,用濾紙將苦草葉片表面的水吸干.稱(chēng)取部分樣品用于自由基捕獲,剩余樣品保存于-80 ℃冰箱進(jìn)行其余生理生化指標(biāo)的測(cè)定.

    1.3 測(cè)試指標(biāo)與方法

    1.3.1 O2-?的捕獲與信號(hào)強(qiáng)度測(cè)定 O2-?的捕獲與強(qiáng)度測(cè)定方法參考Lynch等[8]的方法略有修改.分別稱(chēng)取新鮮苦草葉片 0.1g,置于研缽中,加入適量液氮冷凍后,迅速置于充滿(mǎn)氮?dú)獾拿芊庀渲醒心コ煞勰?立即加入捕獲劑1mL制成勻漿液,轉(zhuǎn)移至離心管中.勻漿液在 4℃下,以 10000×g離心15min,轉(zhuǎn)移上清液于離心管中,迅速于液氮中保存用于電子順磁共振(EPR)測(cè)定.上述操作均在無(wú)氧條件下進(jìn)行,并避免水分進(jìn)入干擾測(cè)定.捕獲劑pH 值為 8.6,其中含有0.05m?l/L CHES、0.01m?l/L Tir?n和0.5%吐溫-20.EPR測(cè)定在常溫(25℃)下進(jìn)行,吸取 200μL上清液注入石英扁平槽中,采用Bruker EMX 10/12型EPR儀檢測(cè).檢測(cè)條件為中心磁場(chǎng):3480G;掃瞄寬度:200G;微波功率:20mW;調(diào)制頻率:100kHz;調(diào)制幅度:1.0G;掃瞄次數(shù):1次.

    表1 銨態(tài)氮濃度對(duì)生物量、抗氧化酶活性和MDA含量的影響Table 1 Effect of NH4+-N concentrations on the biomass, activities of antioxidant defenses and contents of MDA

    1.3.2 可溶性蛋白含量、酶活性和丙二醛含量測(cè)定 粗酶液的提取參照 García-Lim?nes 等[9]的方法略有修改.可溶性蛋白含量測(cè)定參照考馬斯亮藍(lán)染色法[10],以小牛血清蛋白(BSA)作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白.超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法[11];過(guò)氧化物酶(POD)活性的測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚氧化法[12-13],過(guò)氧化氫酶(CAT)活性的測(cè)定采用紫外法[14].丙二醛含量的測(cè)定采用TBA比色法[15].

    1.3.3 葉綠素和游離氨基酸態(tài)氮含量測(cè)定 葉綠素測(cè)定采用丙酮提取法[16].游離氨基酸態(tài)氮測(cè)定采用茚三酮法[17].

    1.3.4 銨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、硝態(tài)氮濃度測(cè)定 銨態(tài)氮的測(cè)定根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)《水質(zhì)銨的測(cè)定水楊酸分光光度法》(GB7481-1987).亞硝態(tài)氮的測(cè)定根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測(cè)定分光光度法》(GB7493-1987).硝態(tài)氮的測(cè)定根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)《水質(zhì)硝態(tài)氮的測(cè)定分二磺酸分光光度法》(GB7480-1987).

    1.3.5 統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差(Mean±SD).使用 SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件和ANOVA法將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異分析,使用Origin8.0統(tǒng)計(jì)軟件處理自由基數(shù)據(jù).

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草生物量的影響

    由表 1可見(jiàn),銨態(tài)氮濃度≥1.00mg/L時(shí),14d后,苦草的生物量(鮮重)開(kāi)始下降,但未出現(xiàn)顯著性差異.當(dāng)銨態(tài)氮濃度為 3.00mg/L時(shí),苦草的生物量下降至對(duì)照組生物量的90%左右.

    2.2 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草葉片游離氨基酸態(tài)氮含量的影響

    由圖1可見(jiàn),隨著銨態(tài)氮濃度的升高,苦草葉片中游離氨基酸態(tài)氮的含量先略有下降后又顯著升高.當(dāng)銨態(tài)氮濃度達(dá)到 0.30mg/L時(shí),其含量已經(jīng)接近對(duì)照組含量的 3倍,出現(xiàn)了顯著性差異(P<0.05).隨著銨態(tài)氮濃度進(jìn)一步升高,其含量顯著上升,出現(xiàn)極顯著性差異(P<0.01).

    2.3 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草葉片葉綠素含量的影響

    由圖2可見(jiàn),隨著銨態(tài)氮濃度升高,苦草葉片中葉綠素a和b的含量先升高后又顯著下降.當(dāng)銨態(tài)氮濃度為3.00mg/L時(shí),葉綠素a和b的含量均下降到對(duì)照組含量的 60%左右,與對(duì)照組相比葉綠素a出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05);葉綠素b出現(xiàn)極顯著性差異(P<0.01).

    圖1 銨態(tài)氮濃度對(duì)游離氨基酸態(tài)氮含量的影響Fig.1 Effect of NH4+-N concentrations on contents of amino acid-nitrogen

    圖2 銨態(tài)氮濃度對(duì)葉綠素含量的影響Fig.2 Effect of NH4+-N concentrations on contents of chlorophyll

    2.4 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草葉片可溶性蛋白含量的影響

    由圖3可見(jiàn),隨著銨態(tài)氮濃度的升高,苦草葉片中可溶性蛋白含量先升高后又顯著下降的趨勢(shì).當(dāng)銨態(tài)氮濃度為1.00、3.00mg/L時(shí),苦草葉片可溶性蛋白含量顯著下降,與對(duì)照組相比出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05).

    圖3 銨態(tài)氮濃度對(duì)可溶性蛋白含量的影響Fig.3 Effect of NH4+-N concentrations on contents of soluble protein* P<0.05

    2.5 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草葉片 O2-?信號(hào)強(qiáng)度的影響

    圖4 EPR捕獲不同濃度組O2-?的譜線(xiàn)Fig.4 The EPR spectrum of O2-? of different concentrations

    EPR捕獲O2-?譜線(xiàn)如圖 4所示,O2-?信號(hào)強(qiáng)度分析結(jié)果如圖5所示.由圖5可見(jiàn),當(dāng)銨態(tài)氮濃度為0.02mg/L時(shí),苦草葉片中O2-?信號(hào)強(qiáng)度較對(duì)照組顯著增強(qiáng)(P<0.05).隨著銨態(tài)氮濃度升高,葉片O2-?信號(hào)強(qiáng)度呈先減弱后增強(qiáng)的趨勢(shì),銨態(tài)氮濃度0.60mg/L處理組,葉片O2-?信號(hào)強(qiáng)度下降到對(duì)照組的 40%左右,出現(xiàn)極顯著性差異(P<0.01);隨著銨態(tài)氮濃度的升高,其信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)一步增強(qiáng),銨態(tài)氮濃度為3.00mg/L處理組,其信號(hào)強(qiáng)度是對(duì)照組的1.5倍,出現(xiàn)極顯著性差異(P<0.01).

    圖5 銨態(tài)氮濃度對(duì)O2-?自由基信號(hào)強(qiáng)度的影響Fig.5 Effect of NH4+-N concentration on O2-? freeradical signal intensity* P<0.05

    2.6 不同濃度銨態(tài)氮對(duì)苦草葉片抗氧化酶活性以及MDA含量的影響

    由表 1可見(jiàn),當(dāng)銨態(tài)氮濃度為 0.02mg/L時(shí),SOD和 POD活性均略有升高但未出現(xiàn)顯著性差異.隨著銨態(tài)氮濃度的升高,苦草葉片中SOD和POD的活性均呈現(xiàn)先下降后升高的趨勢(shì).當(dāng)銨態(tài)氮濃度為0.60mg/L時(shí),與對(duì)照組相比SOD活性已出現(xiàn)極顯著性差異.隨著銨態(tài)氮濃度進(jìn)一步升高至3.00mg/L時(shí),SOD活性升高至對(duì)照組活性的 2倍左右,出現(xiàn)了極顯著性差異(P<0.01).當(dāng)銨態(tài)氮濃度為1.00mg/L時(shí),POD的活性已升高至對(duì)照組活性的 2倍左右,出現(xiàn)了顯著性差異(P<0.05).同時(shí)還觀(guān)察到,銨態(tài)氮濃度為 0.05~0.60mg/L時(shí),苦草葉片中CAT活性一直受到顯著性抑制(P<0.05).各實(shí)驗(yàn)組的MDA含量均低于對(duì)照組,并出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05).

    3 討論

    銨態(tài)氮是沉水植物正常生長(zhǎng)發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì).研究表明[18],當(dāng)沉水植物缺少氮素營(yíng)養(yǎng)時(shí),蛋白質(zhì)合成減少、細(xì)胞分裂減慢;而當(dāng)?shù)貭I(yíng)養(yǎng)過(guò)剩時(shí),也會(huì)對(duì)其產(chǎn)生傷害.本實(shí)驗(yàn)通過(guò)苦草在不同濃度銨態(tài)氮中暴露14d后,分析其生物量、葉片中游離氨基酸態(tài)氮、葉綠素和可溶性蛋白含量,以及O2-?信號(hào)強(qiáng)度、抗氧化酶活性和MDA含量,以期尋找適合苦草生長(zhǎng)的銨態(tài)氮濃度.

    一般來(lái)說(shuō),當(dāng)水環(huán)境中 NH4+濃度較高時(shí),沉水植物被動(dòng)吸收大量NH4+之后,主要通過(guò)兩條途徑減少NH4+在植物細(xì)胞內(nèi)的積累,一是通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸并消耗能量將NH4+運(yùn)出植物細(xì)胞,二是合成游離氨基酸[19].本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從銨態(tài)氮濃度為0.30mg/L開(kāi)始,苦草葉片中游離氨基酸態(tài)氮含量顯著升高,表明葉片中積累了大量的游離氨基酸從而減少NH4+的積累、減輕其毒害作用.CaO等[4]的研究得到類(lèi)似結(jié)果,暴露苦草于 1.0mg/L銨態(tài)氮培養(yǎng)液中 2個(gè)月,發(fā)現(xiàn)苦草葉片中積累了大量的游離氨基酸.綜合分析各生理生化指標(biāo)表明,苦草對(duì)銨態(tài)氮最敏感的指標(biāo)是葉片中游離氨基酸態(tài)氮的含量.植物葉片的葉綠素和可溶性蛋白含量是與其光合能力相關(guān)的重要生理指標(biāo).葉綠素a和b是吸收和傳遞光能的主要色素.本實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)銨態(tài)氮濃度為3.00mg/L時(shí),葉綠素a和b的含量顯著下降,并且肉眼可觀(guān)察到輕微的缺綠病癥狀.盡管植物可以通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸、氨基酸代謝等途徑減輕 NH4+的壓力,但是過(guò)量的 NH4+已經(jīng)抑制了植物的光合作用、破壞了植物的光合作用系統(tǒng).Britto等[20]的研究認(rèn)為,由于過(guò)量的NH4+抑制了Mg2+的吸收和運(yùn)輸,所以造成了植物光合作用受到抑制,其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究驗(yàn)證.植物葉片中的可溶性蛋白大多是參與各種代謝的酶類(lèi),其中約 50%是參與光合作用的關(guān)鍵酶.因此可溶性蛋白的含量,被廣泛用作衡量葉片光合能力高低和衰亡的指標(biāo)[21].本實(shí)驗(yàn)得到結(jié)果,從銨態(tài)氮濃度為1.00mg/L開(kāi)始,苦草葉片的可溶性蛋白的含量顯著下降,表明植物機(jī)體光合能力降低、代謝受到干擾,并且肉眼可觀(guān)察到生物量明顯減少、植物受損.

    已有研究表明[3-5],高濃度的銨態(tài)氮會(huì)誘導(dǎo)沉水植物產(chǎn)生氧化應(yīng)激,誘導(dǎo)植物體內(nèi)抗氧化酶SOD、POD、CAT等活性發(fā)生變化.在高濃度銨態(tài)氮的脅迫下,植物體內(nèi)活性氧水平升高,誘導(dǎo)抗氧化酶類(lèi)的活性發(fā)生變化,從而清除活性氧并抵御脅迫.活性氧的水平超過(guò)抗氧化酶類(lèi)的清除能力,植物體即受到了氧化損傷.SOD作為防御活性氧的第一道防線(xiàn),主要作用是催化 O2-?轉(zhuǎn)化為H2O2.CAT和 POD的作用是催化 H2O2分解成H2O和O2,CAT主要位于微粒體中,POD主要位于細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞壁、液泡和細(xì)胞外空間[3-5].本實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)銨態(tài)氮濃度為 0.60mg/L時(shí),苦草葉片中O2-?信號(hào)強(qiáng)度顯著下降,濃度為1.00mg/L時(shí)無(wú)顯著性變化,主要原因是 SOD 活性顯著升高,清除了一部分O-?.銨態(tài)氮濃度為 3.00mg/L時(shí)O-?

    22信號(hào)強(qiáng)度顯著升高,雖然此時(shí)SOD的活性仍然顯著升高,但是 O2-?大量蓄積,可能因?yàn)樽杂苫a(chǎn)生的速率超過(guò)了SOD的清除速率.銨態(tài)氮濃度達(dá)到1.00mg/L時(shí),POD活性顯著升高,主要是因?yàn)镾OD催化O2-?轉(zhuǎn)化產(chǎn)生大量的H2O2,POD活性受到誘導(dǎo)從而催化轉(zhuǎn)化 H2O2.從銨態(tài)氮濃度為0.05~0.60mg/L,CAT活性受到抑制,可能由于積累的H2O2抑制了CAT的活性,但植物體并未受到氧化損傷.同時(shí),結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)銨態(tài)氮濃度為0.02mg/L時(shí),O2-?信號(hào)強(qiáng)度顯著升高,但并未誘導(dǎo)抗氧化酶類(lèi)活性產(chǎn)生顯著變化,主要因?yàn)楫a(chǎn)生的自由基被及時(shí)清除并未誘導(dǎo)植物產(chǎn)生氧化應(yīng)激.低銨態(tài)氮條件下 O2-?含量顯著升高,可能因?yàn)橹参锾幱跔I(yíng)養(yǎng)缺乏狀態(tài),誘導(dǎo)了自由基的產(chǎn)生.Shin等[22]對(duì)擬南芥的研究得到類(lèi)似結(jié)果,他測(cè)定了擬南芥在缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氮素的情況下其根部活性氧的水平,結(jié)果表明由于氮素的缺乏,擬南芥根部特定區(qū)域活性氧濃度升高.Shin等[23]研究了當(dāng)擬南芥缺乏營(yíng)養(yǎng)元素鉀時(shí),其根部的活性氧濃度也會(huì)升高;并且發(fā)現(xiàn)活性氧主要積累在根部鉀離子吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)較活躍的區(qū)域.本實(shí)驗(yàn)的研究證明了上述觀(guān)點(diǎn).MDA是多不飽和脂肪酸氧化的二級(jí)終產(chǎn)物,并已用于表征脂質(zhì)過(guò)氧化的程度.在本實(shí)驗(yàn)研究的銨態(tài)氮濃度范圍內(nèi),苦草葉片中 MDA含量顯著降低.Wang等[3]的研究得到類(lèi)似結(jié)果,他推測(cè)植物抗氧化能力提高可以減輕或者防止脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng).Nimptsch等[5]研究結(jié)果相似,他在研究銨態(tài)氮對(duì)沉水植物紅狐尾藻的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)暴露7d后,脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA、4-HNE含量減少.他也認(rèn)為由于活性氧的增加,植物體抗氧化能力提高,從而提高了分解脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的能力,所以脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物含量減少.MDA的降低,究竟是由于植物體抗氧化能力提高、還是由于多不飽和脂肪酸含量減少或是沉水植物對(duì)銨態(tài)氮壓力有不同的適應(yīng)或防御機(jī)制,還需要進(jìn)一步研究.

    綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,各銨態(tài)氮濃度組生物量沒(méi)有出現(xiàn)顯著性變化.但是生理生化指標(biāo)出現(xiàn)一系列早期響應(yīng),其結(jié)果表明銨態(tài)氮濃度≥1.00mg/L,苦草光合能力受到抑制、代謝受到干擾.

    4 結(jié)論

    4.1 銨態(tài)氮濃度低于 0.60mg/時(shí)苦草生長(zhǎng)良好,濃度大于或等于1.00mg/L時(shí)苦草的光合能力受到抑制、代謝受到干擾.

    4.2 苦草對(duì)銨態(tài)氮最敏感的生理生化指標(biāo)是葉片中游離氨基酸態(tài)氮含量.

    4.3 銨態(tài)氮作為沉水植物的一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),當(dāng)其含量較低時(shí),植物由于營(yíng)養(yǎng)缺乏誘導(dǎo)產(chǎn)生自由基.

    [1] 吳慶龍,謝 平,楊柳燕,等.湖泊藍(lán)藻水華生態(tài)災(zāi)害形成機(jī)理及防治的基礎(chǔ)研究 [J]. 地球科學(xué)進(jìn)展, 2008,23(11):1050-1055.

    [2] Brun F G, Hernandez I, Vergara J J, et al. Assessing the toxicity of ammonium pulses to the survival andgrowth of Zostera noltii [J].MEPS, 2002,225:177-187.

    [3] Wang C, Zhang S H, Wang P F, et al. Metabolic adaptations to ammonia-induced oxidative stress in leaves of the submerged macrophyte Vallisneria natans [J]. Aquatic Toxicology, 2008,87:88-98.

    [4] Cao T, Xie P, Li Z Q, et al. Physiological stress of high NH4+concentration in water column on the submersed macrophyte Vallisneria Natans [J]. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology, 2009,82:296-299.

    [5] Nimptsch J, Pflugmacher S. Ammonia triggers the promotion of oxidative stress in the aquatic macrophyte Myriophyllum mattogrossense [J]. Chemosphere, 2007,66:708-714.

    [6] Ni L Y. Effects of water column nutrient enrichment on the growth of Potamogeton maackianus A. Been [J]. Journal of Aquatic Plant Management, 2001,39:83-87.

    [7] 尹 穎,孫媛媛,郭紅巖,等.芘對(duì)苦草的生物毒性效應(yīng) [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào), 2007,18(7):1528-1533.

    [8] Lynch D V, Thompson J E. Lipoxygenase-mediated production of superoxide anion in senescing plant tissue [J]. FEBS Letters,1984,173:251-254.

    [9] García-Limones C, Hervás A, Navas-Cortés J A, et al. Induction of an antioxidant enzyme system and other oxidative stress markers associated with compatible and incompatible interactions between chickpea (Cicer arietinum L.) and Fusarium oxysporumf.sp. Ciceris [J]. Physiological and Molecular Plant Pathology,2002,61:325-337.

    [10] Bradford M M. Arapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding [J]. Analytical Biochemistry, 1976,72:248-254.

    [11] Dhindsa R S, Dhinsa P P, Thorpe T A. Leaf senescence correlated with increased levels of membrane permeability and lipid-peroxidati?n and decreased levels of superoxide dismutase and catalase [J]. Journal of Experimental Botany, 1980,32:127-132.

    [12] Kochhar S, Kochhar V K, Khanduja S D. Changes in the pattern of isoperoxidases during maturation of grape berries cv. Gulabi as affected by ethephon [J]. American Journal of Enology and Viticulture, 1979,30:275-277.

    [13] 陳建勛,王曉峰.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M]. 廣州:華南理工大學(xué)出版社, 2002:120-121.

    [14] Xu J B, Yuan X F, Lang P Z. Determination of catalase activity and catalase inhibition by ultraviolet spectrophotometry [J].China Environmental Chemistry, 1997,16:73-76.

    [15] 羅 義,施華宏,王曉蓉,等.2,4-二氯苯酚誘導(dǎo)鯽魚(yú)肝臟自由基的產(chǎn)生和脂質(zhì)過(guò)氧化 [J]. 環(huán)境科學(xué), 2005,26(3):29-32.

    [16] 中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所,上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南 [M]. 北京:科學(xué)出版社, 2004:95-96.

    [17] 中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所,上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南 [M]. 北京:科學(xué)出版社, 2004:138-139.

    [18] 焦雯珺,閔慶文,林 焜,等.植物氮素營(yíng)養(yǎng)診斷的進(jìn)展與展望[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào), 2006,22(12):351-355.

    [19] Rabe E. Stress physiology-the function significance of the accumulation of nitrogen-containing compounds [J]. Journal of Horticultural Science, 1990,65:231-243.

    [20] Britto D T, Kronzucker H J. NH4+toxicity in higher plants: a critical review [J]. Plant Physiology, 2002,159:567-584.

    [21] 李雁鳴,梁振興,梅 楠.冬小麥葉片衰亡及其形態(tài)生理變化 [J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào), 1988,3(2):58-66.

    [22] Shin R, Schachtman D P. Hydrogen peroxide mediates plant root cell response to nutrient deprivation [J]. PNAS, 2004,23:8827-8832.

    [23] Shin R, Berg R H, Schachtman D P. Reactive oxygen species and root Hairs in arabidopsis root response to nitrogen, phosphorus and potassium deficiency [J]. Plant and Cell Physiology, 2005,46:1350-1357.

    Physiological effect of Vallisneria natans L. under different concentrations of ammonia.

    SONG Rui, JIANG Jin-lin, GENG Jin-ju, GAO Shi-xiang*, WANG Xiao-rong**(State Key Laboratory of Pollution Control and Resources Reuse,School of Environment, Nanjing University, Nanjing 210046, China). China Environmental Science, 2011,31(3):448~453

    The effects of biomass, nitrogen in free amino acids, chlorophyll, soluble proteins and malondialdehyde(MDA),intensities of O2-? and antioxidant enzyme activities in the leaves of Vallisneria natans L. exposed to different concentrations of NH4+-N (0.02,0.05,0.10,0.30,0.60,1.00,3.00mg/L) after 14 days were investigated. No significant changes were observed for the biomass of leaves in the studied exposing level, while the physiological signals showed different trends. Intensities of O2-? increased at the lowest concentration of ammonia(0.02mg/L). The nitrogen contents in the free amino acids started to increase significantly from 0.30mg/L NH4+-N. When the NH4+-N reached 0.60mg/L, SOD activities were significantly induced, indicating oxidative stress to the plant without oxidative damage. When the ammonia concentrations were higher than 1.00mg/L, the signal intensities of free radicals and activities of SOD and POD significantly increased, while the contents of chlorophyll and soluble protein decreased, indicating oxidative damage might happen. Generally, the plants grew well when the NH4+-N concentration was below 0.60mg/L and stress and growth disturbance happened when it was above 1.00mg/L. Among all those physiological parameters measured, the nitrogen content in the free amino acids in the plant leaves was the most sensitive indicator. Results also suggested that deficiency of nutrient at a low level of ammonia may cause the induction of free radicals in submerged plant leaves.

    ammonia;Vallisneria natans L.;amino acid-nitrogen;chlorophyll;soluble protein;free radical;antioxidant enzymes

    X503.23

    A

    1000-6923(2011)03-0448-06

    2010-07-16

    國(guó)家“973”項(xiàng)目(2008CB418102);水體污染控制與治理科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2009zx07316-004)

    * 責(zé)任作者, 教授, ecsxg@nju.edu.cn

    ** 責(zé)任作者, 教授, ekxr@nju.edu.cn

    宋 睿(1986-),女,江蘇淮安人,碩士研究生,主要從事環(huán)境毒理學(xué)研究.發(fā)表論文1篇.

    亚洲国产色片| 亚洲人成伊人成综合网2020| 午夜福利成人在线免费观看| 色综合婷婷激情| 免费观看在线日韩| 亚洲精品色激情综合| 超碰av人人做人人爽久久| 精品欧美国产一区二区三| 女人被狂操c到高潮| 窝窝影院91人妻| 国产视频一区二区在线看| 在线观看一区二区三区| 免费观看人在逋| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久久精品大字幕| 又紧又爽又黄一区二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 在线观看美女被高潮喷水网站| 三级毛片av免费| 久久人妻av系列| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲综合色惰| 日韩欧美精品免费久久| 天堂影院成人在线观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲熟妇熟女久久| 热99re8久久精品国产| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲经典国产精华液单| 我的女老师完整版在线观看| 国产亚洲精品久久久com| av黄色大香蕉| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 精品一区二区三区人妻视频| 床上黄色一级片| 日韩av在线大香蕉| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲av不卡在线观看| 国产成人一区二区在线| 国产一区二区在线观看日韩| 一区二区三区免费毛片| 又爽又黄a免费视频| 一个人看的www免费观看视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲av第一区精品v没综合| 国内精品久久久久久久电影| 色综合婷婷激情| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久人人爽人人爽人人片va| 乱系列少妇在线播放| 中文字幕久久专区| ponron亚洲| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产亚洲av嫩草精品影院| 级片在线观看| 身体一侧抽搐| 淫秽高清视频在线观看| 久久久久性生活片| 尾随美女入室| 久久精品国产自在天天线| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 日韩欧美在线乱码| 欧美日本亚洲视频在线播放| 天美传媒精品一区二区| 欧美中文日本在线观看视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产三级在线视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美3d第一页| 国产精品乱码一区二三区的特点| 最新中文字幕久久久久| 一本久久中文字幕| 天堂网av新在线| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| av视频在线观看入口| 欧美中文日本在线观看视频| 成年版毛片免费区| 欧美黑人欧美精品刺激| 一级黄片播放器| 国产精品不卡视频一区二区| 少妇丰满av| 久久6这里有精品| 久久久久久久久中文| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚州av有码| 精品一区二区三区视频在线| 搡老熟女国产l中国老女人| 人人妻人人澡欧美一区二区| 一夜夜www| 如何舔出高潮| 国产精品久久久久久久电影| 九九热线精品视视频播放| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品亚洲美女久久久| 悠悠久久av| 色哟哟·www| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 联通29元200g的流量卡| 亚洲真实伦在线观看| 18禁在线播放成人免费| 校园春色视频在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲成人久久爱视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日本成人三级电影网站| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 欧美一区二区国产精品久久精品| 18禁在线播放成人免费| 一边摸一边抽搐一进一小说| 三级毛片av免费| 真人做人爱边吃奶动态| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚州av有码| 亚洲av熟女| aaaaa片日本免费| 亚洲在线观看片| 人人妻人人看人人澡| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 伦精品一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 黄片wwwwww| www.色视频.com| 十八禁网站免费在线| 极品教师在线免费播放| 久久久久国内视频| 夜夜夜夜夜久久久久| av黄色大香蕉| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩中文字幕欧美一区二区| 午夜福利欧美成人| 乱人视频在线观看| 国产69精品久久久久777片| 日日夜夜操网爽| 在线观看av片永久免费下载| 国产伦人伦偷精品视频| 天堂网av新在线| 波多野结衣高清无吗| 香蕉av资源在线| 嫩草影院入口| 人人妻人人看人人澡| av天堂在线播放| 欧美一区二区亚洲| 乱码一卡2卡4卡精品| 一区二区三区高清视频在线| 成年女人永久免费观看视频| 久99久视频精品免费| 天堂网av新在线| 国产男靠女视频免费网站| 夜夜爽天天搞| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 黄片wwwwww| 给我免费播放毛片高清在线观看| 午夜视频国产福利| 高清日韩中文字幕在线| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av二区三区四区| АⅤ资源中文在线天堂| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久久久久久久中文| 亚洲精品日韩av片在线观看| www.www免费av| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产三级中文精品| 日韩欧美免费精品| 亚洲人成网站高清观看| 免费看a级黄色片| 精品久久久久久久久av| 国产精品一区www在线观看 | 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 欧美激情国产日韩精品一区| 在线观看免费视频日本深夜| av国产免费在线观看| 成人国产麻豆网| 欧美性猛交黑人性爽| 欧美成人a在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲av二区三区四区| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚州av有码| 最后的刺客免费高清国语| 别揉我奶头 嗯啊视频| 婷婷精品国产亚洲av| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲精华国产精华精| 在线看三级毛片| 欧美精品啪啪一区二区三区| 综合色av麻豆| 日本一本二区三区精品| www日本黄色视频网| 成人无遮挡网站| 国产在线男女| 国产91精品成人一区二区三区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产欧美日韩一区二区精品| 在线a可以看的网站| 哪里可以看免费的av片| 午夜福利成人在线免费观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲欧美清纯卡通| 国产毛片a区久久久久| 麻豆国产97在线/欧美| 超碰av人人做人人爽久久| 内地一区二区视频在线| 午夜福利在线在线| 乱人视频在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲精品在线观看二区| 桃红色精品国产亚洲av| 国语自产精品视频在线第100页| 国产高清视频在线观看网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 美女高潮的动态| 亚洲中文字幕日韩| 嫩草影院入口| 特级一级黄色大片| 色哟哟·www| 亚洲不卡免费看| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产乱人视频| 俺也久久电影网| 国产在线男女| 变态另类丝袜制服| 天堂影院成人在线观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 麻豆国产av国片精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 嫁个100分男人电影在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久久久久久午夜电影| 十八禁国产超污无遮挡网站| 丰满的人妻完整版| 精品日产1卡2卡| 日本成人三级电影网站| 高清日韩中文字幕在线| 欧美日韩黄片免| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 丝袜美腿在线中文| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国内精品一区二区在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲欧美激情综合另类| 91在线观看av| 国产精品av视频在线免费观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 午夜久久久久精精品| 全区人妻精品视频| 亚洲无线在线观看| 91麻豆av在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 嫩草影视91久久| 亚洲av一区综合| 最近最新中文字幕大全电影3| 免费无遮挡裸体视频| av在线观看视频网站免费| 欧美性感艳星| 婷婷丁香在线五月| 亚洲最大成人中文| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲内射少妇av| 午夜爱爱视频在线播放| 日日夜夜操网爽| 国产高清视频在线播放一区| 麻豆国产97在线/欧美| 一级黄片播放器| 国产伦在线观看视频一区| 在线观看av片永久免费下载| 天堂√8在线中文| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 99精品在免费线老司机午夜| 中文亚洲av片在线观看爽| 我的女老师完整版在线观看| 成年人黄色毛片网站| 午夜日韩欧美国产| 久久久午夜欧美精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜爱爱视频在线播放| 中文字幕高清在线视频| 日韩一本色道免费dvd| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲欧美日韩高清专用| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 麻豆成人av在线观看| 国产私拍福利视频在线观看| 岛国在线免费视频观看| 国产单亲对白刺激| 色5月婷婷丁香| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲av成人av| 国内精品宾馆在线| 麻豆一二三区av精品| 神马国产精品三级电影在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 中出人妻视频一区二区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 免费一级毛片在线播放高清视频| av.在线天堂| 国产精品日韩av在线免费观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 一级毛片久久久久久久久女| 成年免费大片在线观看| 18+在线观看网站| 少妇人妻一区二区三区视频| 深爱激情五月婷婷| 久久久国产成人精品二区| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 啦啦啦啦在线视频资源| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| www日本黄色视频网| 校园人妻丝袜中文字幕| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲av二区三区四区| 色吧在线观看| 1024手机看黄色片| 亚洲在线观看片| 久久久久久九九精品二区国产| 天美传媒精品一区二区| 成熟少妇高潮喷水视频| 女同久久另类99精品国产91| 国产精品人妻久久久影院| 一进一出抽搐动态| a级一级毛片免费在线观看| 深夜a级毛片| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲欧美精品综合久久99| 不卡视频在线观看欧美| 国产一区二区在线观看日韩| 久久午夜福利片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 此物有八面人人有两片| 国产美女午夜福利| 免费av观看视频| 亚洲av.av天堂| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产在线男女| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 久久精品国产亚洲av天美| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚州av有码| 国产日本99.免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 五月伊人婷婷丁香| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲人成网站高清观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 淫秽高清视频在线观看| 美女高潮的动态| 看十八女毛片水多多多| 日日撸夜夜添| 麻豆成人午夜福利视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 不卡一级毛片| 欧美性猛交黑人性爽| 国内精品久久久久久久电影| av在线亚洲专区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲真实伦在线观看| 九九热线精品视视频播放| 久99久视频精品免费| 中文字幕av在线有码专区| 免费看a级黄色片| 免费观看人在逋| 亚洲av电影不卡..在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| avwww免费| 日韩欧美精品免费久久| a级一级毛片免费在线观看| 国产av在哪里看| 亚洲最大成人av| 亚洲一区高清亚洲精品| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 少妇丰满av| 禁无遮挡网站| 亚洲人成网站高清观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 日本色播在线视频| 很黄的视频免费| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久久久久久精品吃奶| 国产激情偷乱视频一区二区| 深夜a级毛片| www.www免费av| 国产欧美日韩精品一区二区| 搡老岳熟女国产| 午夜激情欧美在线| 国产老妇女一区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 久久久久久久久久成人| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲七黄色美女视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 51国产日韩欧美| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品永久免费网站| av天堂在线播放| 国内精品宾馆在线| 伊人久久精品亚洲午夜| 91久久精品国产一区二区三区| av在线老鸭窝| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 1024手机看黄色片| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 久久久久精品国产欧美久久久| 无遮挡黄片免费观看| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲国产精品合色在线| 精品久久国产蜜桃| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲四区av| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲最大成人av| 九色国产91popny在线| 国产一区二区三区av在线 | 91久久精品电影网| 色精品久久人妻99蜜桃| 搞女人的毛片| 国产成年人精品一区二区| 国产v大片淫在线免费观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 男女之事视频高清在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 老司机福利观看| 久久人人精品亚洲av| 精品欧美国产一区二区三| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 免费观看的影片在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 少妇的逼好多水| 99久久成人亚洲精品观看| 精品人妻视频免费看| 成年人黄色毛片网站| 婷婷亚洲欧美| 亚洲av成人av| 色尼玛亚洲综合影院| 精品久久久久久,| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产精品一区二区免费欧美| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日韩强制内射视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产三级中文精品| 夜夜爽天天搞| 欧美精品啪啪一区二区三区| a级毛片a级免费在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 成人av一区二区三区在线看| 欧美在线一区亚洲| 尾随美女入室| 色哟哟·www| 又黄又爽又刺激的免费视频.| xxxwww97欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 十八禁国产超污无遮挡网站| 亚洲美女视频黄频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | av福利片在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲三级黄色毛片| 国内揄拍国产精品人妻在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产高清不卡午夜福利| 欧美zozozo另类| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲真实伦在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 看免费成人av毛片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 91狼人影院| 精品久久国产蜜桃| 免费在线观看日本一区| 久久久久久伊人网av| 直男gayav资源| 国产 一区精品| 成人二区视频| 午夜影院日韩av| 免费看av在线观看网站| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲性久久影院| 亚洲无线在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产日本99.免费观看| 999久久久精品免费观看国产| 性插视频无遮挡在线免费观看| 日本熟妇午夜| 综合色av麻豆| 精品久久久噜噜| 亚州av有码| 国产成人a区在线观看| 日韩欧美三级三区| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 黄片wwwwww| 亚洲欧美精品综合久久99| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 亚洲午夜理论影院| 亚洲国产欧美人成| 国产成人a区在线观看| 国产男人的电影天堂91| 国产av一区在线观看免费| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 在线免费观看不下载黄p国产 | 免费观看的影片在线观看| 色哟哟哟哟哟哟| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 一区二区三区四区激情视频 | 深爱激情五月婷婷| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲人与动物交配视频| av.在线天堂| 性色avwww在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 日本a在线网址| 国内精品一区二区在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产黄a三级三级三级人| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲自拍偷在线| 精品人妻熟女av久视频| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美成人a在线观看| av福利片在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产亚洲91精品色在线| 淫妇啪啪啪对白视频| 波多野结衣高清作品| 亚洲国产精品久久男人天堂| 一级a爱片免费观看的视频| 老司机福利观看| 美女免费视频网站| 人妻少妇偷人精品九色| 久久久久久九九精品二区国产| 少妇人妻精品综合一区二区 | 我要看日韩黄色一级片| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 日本熟妇午夜| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 在线播放无遮挡| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 不卡视频在线观看欧美| 69av精品久久久久久| 国内精品一区二区在线观看| 观看美女的网站| 成年版毛片免费区| 亚洲精品影视一区二区三区av| 在线天堂最新版资源| 最近在线观看免费完整版| 永久网站在线| 无人区码免费观看不卡| 2021天堂中文幕一二区在线观| 两人在一起打扑克的视频| 村上凉子中文字幕在线| 国产精品久久久久久久久免| 一区二区三区高清视频在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 熟女电影av网| 桃红色精品国产亚洲av| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲欧美清纯卡通| 国产高潮美女av| 国产麻豆成人av免费视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲成a人片在线一区二区| 在线观看一区二区三区| 成熟少妇高潮喷水视频| 丰满的人妻完整版| 中文字幕久久专区| 国产伦精品一区二区三区视频9| av在线老鸭窝| 欧美一区二区国产精品久久精品|