肝素鋰抗凝管在臨床化學(xué)分析中的合理應(yīng)用

任碧瓊，鄒國英，徐 飛

（湖南省第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 長沙 410007）

衛(wèi)生部醫(yī)院管理年以及質(zhì)量萬里行活動(dòng)對檢驗(yàn)科發(fā)報(bào)告時(shí)間作了具體要求，急診檢驗(yàn)必須在30～60 min發(fā)出報(bào)告。為了給臨床提供快速準(zhǔn)確的診斷依據(jù)，檢驗(yàn)人員努力想辦法改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法、改善實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)。由于血清的析出需較長時(shí)間，影響出報(bào)告速度，許多檢驗(yàn)科嘗試用血漿標(biāo)本代替血清，事實(shí)上，血漿應(yīng)該是比血清更理想的生化檢測標(biāo)本類型。關(guān)于兩種不同標(biāo)本類型的檢測結(jié)果是否有可比性，一些實(shí)驗(yàn)室對檢測結(jié)果進(jìn)行了比較，但遺憾的是得出的結(jié)論各異，這可能與檢測系統(tǒng)、試劑、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)方法的選擇不一致有關(guān)。而這兩種標(biāo)本類型一直在許多醫(yī)院的臨床實(shí)驗(yàn)室混用，如今甚至有多種血清、血漿分離管供實(shí)驗(yàn)室選擇，那么，由此帶來的檢驗(yàn)結(jié)果的差異是否得到了重視呢？本實(shí)驗(yàn)室在選用采血管時(shí)進(jìn)行了比較，本文報(bào)道的肝素鋰管和無凝劑管的32個(gè)生化項(xiàng)目檢測結(jié)果的對比分析，結(jié)論與文獻(xiàn)報(bào)道有所不同。本研究發(fā)現(xiàn)鐵離子完全不可以采用肝素鋰抗凝血漿檢測，乳酸脫氫酶、鉀、總蛋白、磷四項(xiàng)結(jié)果有顯著性差異，后三項(xiàng)可以通過重新建立參考值來解決，而血漿乳酸脫氫酶檢測受血小板的影響[1]，無法建立參考范圍，但可以通過延長離心時(shí)間消除影響。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源與收集方法

1.11 標(biāo)本來源

54例比對標(biāo)本來源于湖南省第二人民醫(yī)院門診及健康體檢中心。487例標(biāo)本用于建立參考值，來自健康體檢人群，其中男256例，女231例，年齡在19～54歲之間，排除心血管、肝臟及其他器質(zhì)性疾病。

1.1.2 標(biāo)本采集及處理方法

空腹抽取血標(biāo)本置于肝素鋰抗凝管和無抗凝劑管中，每管3～5 mL,肝素鋰抗凝管立即離心，無抗凝劑管放置10～20 min后再離心，3000 r/min離心5 min分離血清和血漿。

1.2 儀器與試劑

美國拜爾ADVIA1650全自動(dòng)生化分析儀，試劑由寧波美康及上?？迫A公司提供。

質(zhì)控物均來自英國朗道公司，水平Ⅰ批號為HE1532-331UE，水平Ⅱ批號為HN1530-498UN。校準(zhǔn)品為Cal2530-484UN。

1.3 檢測方法

檢測高低值質(zhì)控并確認(rèn)在控，檢測標(biāo)本的鉀(K+)、鈉(Na+)、氯(Cl-)、鈣(Ca2+)、總二氧化碳(TCO2)、鎂(Mg2+)、磷(PHOS)、鐵(IRN)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、腺苷酸脫氨酶(ADA)、堿性磷酸酶 (ALP)、r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶 (r-GT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、β2 微球蛋白(β2-MG)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)、葡萄糖(GLU)、膽固醇(CHOL)、甘油三脂 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL)、載脂蛋白A1(APOA1)、載脂蛋白 B1(APOB1)、淀粉酶(AMY)、膽汁酸 (TBA)等項(xiàng)目。所有檢測兩小時(shí)內(nèi)在ADVIA1650全自動(dòng)生化分析儀上完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 兩種不同類型標(biāo)本生化指標(biāo)檢測結(jié)果比較

54份日常血清標(biāo)本和血漿標(biāo)本32項(xiàng)生化指標(biāo)除 IRN、LDH、TP、K+、PHOS 等 5 項(xiàng)結(jié)果有顯著性差異外(表1)，其他27項(xiàng)均無差異。

表1 54份兩種不同類型的標(biāo)本生化指標(biāo)檢測結(jié)果

2.2 兩種標(biāo)本類型IRN、LDH檢測結(jié)果的相關(guān)性

兩種標(biāo)本類型IRN和LDH檢測結(jié)果偏差較大，相關(guān)關(guān)系分析結(jié)果均顯示R2＜0.8，見圖1及圖2。通過對血漿中殘留的血小板計(jì)數(shù)，然后再次離心消除血小板的影響，血清與血漿之間的差異也消除，但導(dǎo)致IRN結(jié)果差異的原因尚不明確，未找到解決辦法。

圖1 兩種標(biāo)本類型IRN檢測結(jié)果的相關(guān)分析

圖2 兩種標(biāo)本類型LDH檢測結(jié)果的相關(guān)分析

2.3 TP、K+、PHOS、LDH 參考范圍的建立

對于 TP、K+、PHOS、LDH 分別建立自己的參考范圍，血清LDH和PHOS與推薦的參考范圍一致，血清TP下限高于推薦參考范圍的下限，血清K+的上限低于推薦參考范圍的上限。血漿TP參考范圍高于血清參考范圍，血漿K+和PHOS低于血清參考范圍，見表2。

表2 健康人群的參考范圍

3 討論

常見的肝素鹽抗凝劑有肝素鈉和肝素鋰，但肝素鈉不適合鈉離子檢測而很少用于臨床化學(xué)分析。由于肝素鋰抗凝管能快速分離血漿且理論上對各種檢測成分無影響，所以廣泛被用于急診生化檢測，有人認(rèn)為肝素鋰抗凝管是電解質(zhì)檢測的最佳選擇。但用于臨床后也有人發(fā)現(xiàn)肝素鋰抗凝血漿與血清的一些生化項(xiàng)目結(jié)果有差異，某些項(xiàng)目出現(xiàn)嚴(yán)重偏差[2-4]。在我院，臨床醫(yī)生反應(yīng)有低鉀報(bào)告與患者的軀體狀況不符，有的LDH波動(dòng)較大無法解釋等現(xiàn)象，其實(shí)，都可能與標(biāo)本類型不一致有關(guān)。

經(jīng)過對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)就本檢測系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)方法而言，32項(xiàng)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中有27項(xiàng)血漿與血清無顯著性差異(P＞0.05),且存在高度相關(guān)性 (R2＞0.95)， 而 K+、TP、PHOS、LDH、IRN五項(xiàng)結(jié)果有顯著性差異 P＜0.05，R2＜0.8， 血漿 K+、TP、PHOS可以通過建立自己的參考范圍來保證不同標(biāo)本類型的檢驗(yàn)結(jié)果有相同的臨床意義。我國實(shí)驗(yàn)室使用的參考范圍多采用書本上推薦的，基本上是源于國外，人種的差異、地域的區(qū)別沒有被考慮進(jìn)去，所以有必要建立自己的參考范圍。在實(shí)驗(yàn)室參考范圍建立的初步摸索中，我們發(fā)現(xiàn)血清總蛋白的參考范圍要適當(dāng)上調(diào)，這可能是因?yàn)槿藗兊纳钏教岣吡说木壒?。而血漿總蛋白由于未消耗纖維蛋白原及其他參與血液凝固的蛋白質(zhì)參考值更高一些[5]。我們還發(fā)現(xiàn)健康人血清鉀很少有超過5.00mmol/L的，實(shí)際上臨床醫(yī)生對超過5.00mmol/L的血清鉀結(jié)果也十分敏感，筆者認(rèn)為將血清鉀的參考值上限由5.5mmol/L下調(diào)到5.00mmol/L左右更為實(shí)用。血漿鉀則明顯低于血清鉀，有人認(rèn)為血清鉀之所以高于血漿鉀是因?yàn)檠耗虝r(shí)血小板釋放鉀入血清，也有人認(rèn)為肝素抗凝劑會形成肝素鉀而引起血漿鉀降低，更多的人則認(rèn)為血漿鉀更能反映體內(nèi)的真實(shí)情況，是首選的標(biāo)本類型[6]。我們的研究顯示，急診生化使用血漿標(biāo)本檢測，一定得建立自己的參考范圍。而IRN測定不適宜采用肝素鋰抗凝血漿標(biāo)本。血漿LDH受血小板的影響較大，由于常規(guī)檢查離心時(shí)間多為3000 r/min 5 min左右，沒能將血小板全部沉降，在檢測過程中，血小板裂解釋放LDH而使其升高。但可以通過延長離心時(shí)間獲取不含血小板的血漿來消除血小板對LDH測定的影響。

[1]Bakker AJ,Mirchi B,Dijkstra JT,et al.IFCC method for lactate dehydrogenase measurement in heparin plasma is unreliable[J].Clin Chem,2003,49(4):662-664

[2]王龍武,葛亞娟,王妹芳,等.肝素鋰抗凝血用于門急診臨床化學(xué)檢驗(yàn)的可行性評價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007,22(1):75-76.

[3]傳良敏,鄧君,王文建,等.肝素鋰抗凝血漿與血清樣本中34項(xiàng)生化檢測結(jié)果的偏倚評估[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,24(10):727-730.

[4]Meng QH,Krahn J.Lithium heparinised blood-collection tubes give falsely low albumin results with an automated bromcresol green method in haemodialysis patients[J].Clin Chem Lab Med,2008,46(3):396-400.

[5]Mohri M,Allahyari L,Sardari L.Effects of Common Anticoagulants on Routine Plasma Biochemistry of Horse and Comparison with Serum[J].J Equine Veter Sci,2007,27(7):313-316.

[6]Miles RR,Roberts RF,Putnam AR,et a1.Comparison of serum and heparinized plasma samples for measurement of chemistry analytes[J].Clin Chem,2004,50(9):1704-1706.