單體賴氨酸對草魚生長和血漿游離氨基酸影響的比較分析

鄭宗林 宋宏斌

魚類不但對氨基酸總量有一定的需求，而且要求氨基酸平衡。如果飼料中缺乏某種氨基酸，則會(huì)導(dǎo)致生長不良，飼料轉(zhuǎn)化效率下降甚至造成一些病理上的癥狀。如飼料中缺乏賴氨酸會(huì)導(dǎo)致鯉鰭條腐爛，缺乏蛋氨酸會(huì)導(dǎo)致白內(nèi)障，缺乏色氨酸會(huì)導(dǎo)致脊椎前凸或側(cè)凸。在水產(chǎn)飼料生產(chǎn)實(shí)踐中，要求飼料氨基酸水平盡可能達(dá)到平衡。要滿足這個(gè)要求，通常是通過飼料原料之間的合理搭配或補(bǔ)充結(jié)晶氨基酸來達(dá)到。但是，前者往往要添加大量的動(dòng)物蛋白源而導(dǎo)致成本大大增加，而后者往往又達(dá)不到理想的使用效果，所以研究者們試圖使用緩釋單體氨基酸達(dá)到同樣的目的，并為此進(jìn)行了大量的研究工作。本文正是對草魚飼料補(bǔ)充結(jié)晶和微囊Lys的生物效應(yīng)做了初步研究，對草魚飼料中Lys與其它結(jié)合氨基酸同步吸收等問題進(jìn)行了探討。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用草魚（Ctenopharyngodon idellus）魚種為當(dāng)年人工繁殖的同一批苗種，取自榮昌縣梅石壩漁場，試驗(yàn)在西南大學(xué)榮昌校區(qū)水產(chǎn)試驗(yàn)漁場室內(nèi)循環(huán)試驗(yàn)室進(jìn)行。試驗(yàn)采用的養(yǎng)殖設(shè)施為正方形水泥池(總體積1.0 m3，水體體積0.5 m3)，設(shè)計(jì)成循環(huán)流水系統(tǒng)，每池進(jìn)水速率為1.5 L/min。整個(gè)養(yǎng)殖試驗(yàn)期間均采用24 h連續(xù)充氧（除投餌期間外）。

試驗(yàn)開始前停飼24 h。選擇體重相近(52.0±1.5)g、體格健壯的魚種，隨機(jī)分配于15個(gè)養(yǎng)殖池(5個(gè)試驗(yàn)處理組，每組3個(gè)重復(fù))，每池20尾。每天早、中、晚投喂3次，達(dá)飽食水平，投喂結(jié)束后30 min，吸出池內(nèi)殘餌及糞便。試驗(yàn)共進(jìn)行56 d，試驗(yàn)期間水溫(22.0±1.0)℃，pH值7.8±0.5，溶氧≥5 mg/l，氨氮＜0.2 mg/l，余氯＜0.1 mg/l。

1.2 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)飼料由西南大學(xué)水產(chǎn)系水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)教研室制作。除單體Lys外，飼料原料均經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，全部過60目篩，制成直徑為1.5 mm左右的顆粒，在35℃鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥24 h，置0℃冰箱保存。晶體Lys（標(biāo)識(shí)含量99.0%）為市售某公司產(chǎn)品；微囊Lys（含量為40%左右）由廣東海納川集團(tuán)協(xié)力同創(chuàng)飼料有限公司提供。具體配方組成和營養(yǎng)成分分析見表1。

1.3 試驗(yàn)分組

試驗(yàn)分為5組，C0為對照組，通過飼料蛋白原料調(diào)整氨基酸的組成，C1組和C2組分別補(bǔ)充0.3%和0.6%的晶體Lys，C3和C4組分別補(bǔ)充0.15%和0.3%的微囊Lys，試驗(yàn)魚為50 g左右的草魚魚種，飼養(yǎng)時(shí)間為56 d。

表1 飼料配方組成及營養(yǎng)水平

1.4 生產(chǎn)性能

1.4.1 生長速度

以鮮重的魚質(zhì)量變化、增重率和特定生長率等表示生長速度。增重率(%)＝(Wt-W0)／W0×100；特定生長率(%/d)＝[(Lnwt-Lnwo)/d]×100，W0和 Wt分別表示養(yǎng)殖開始和結(jié)束時(shí)的魚體質(zhì)量（g）。

1.4.2 飼料利用效率

以餌料系數(shù)和蛋白效率表示，餌料系數(shù)=投喂飼料量 /魚體增重；蛋白效率=(Wt-W0)／F×P%，F(xiàn)指飼料消耗量，P%指飼料蛋白質(zhì)含量。

1.5 血漿游離氨基酸測定

試驗(yàn)結(jié)束后的 0.5、1、2、3、5、7 h 分別從 C0 組，C1組和C4組取樣，從草魚尾靜脈取血，用1%肝素鈉溶液作抗凝劑，每缸每次取3尾魚抗凝血。血漿用8%的磺基水楊酸去蛋白后，血漿游離氨基酸（FAA）含量采用日立L8800型氨基酸自動(dòng)分析儀分析。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)，處理間若有顯著差異，再作Duncan's多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 對生產(chǎn)性能的影響

經(jīng)過56 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，各組草魚魚種生長情況見表2。從增重率指標(biāo)中可以看出，單體Lys補(bǔ)充組（C1組～C4組）間無顯著差異（P＞0.05），C1和 C2組與對照組也無顯著差異（P＞0.05），但C3和C4組的增重則顯著高于對照組（P＜0.05）。微囊氨基酸添加組效果優(yōu)于晶體氨基酸添加組；而特定生長率指標(biāo)中，C2～C4組均顯著高于 C0組（P＜0.05），C1組與C0組無顯著差異（P＞0.05）。各試驗(yàn)組的餌料系數(shù)相對對照組顯著降低達(dá)8.33%～13.23%（P＜0.05），且 C1組至 C4組的飼料利用效率逐漸提高。各試驗(yàn)組蛋白質(zhì)效率顯著高于對照組（P＜0.05），而C1組與C3組之間，及C2組與C4組之間均無顯著差異（P＞0.05）。

表2 補(bǔ)充Lys對草魚生產(chǎn)性能的影響(n=3)

2.2 草魚血漿中游離氨基酸濃度變化

草魚攝食飼料后血漿游離氨基酸濃度的變化見圖1～圖11。從圖1可以看出，攝食各組飼料后，0.5～1 h是比較明顯的快速吸收過程，至1～2 h是比較平穩(wěn)吸收維持階段，2 h時(shí)血漿總氨基酸（T-AA）基本達(dá)峰值。但2 h之后，對照組（C0）血漿T-AA出現(xiàn)明顯下降，5 h之后又趨于平穩(wěn)；C1和C3組的血漿T-AA在第2 h后也明顯下降，但幅度要略小，晶體AA組TAA達(dá)峰濃度比微囊氨基酸組高10%，但C3組（微囊）Lys的實(shí)際添加量僅為C1組（晶體）Lys的不到25%。

圖2表明，C1組在停飼后0.5 h其血漿中Lys即達(dá)峰，而C3組與C0組達(dá)峰時(shí)間一致，均為停飼后2 h左右，且C3組峰值高出C0組9.5%。

圖2～圖11表明，草魚在攝食飼料1～3 h后血漿中各種氨基酸都先后達(dá)峰，3 h之后，各氨基酸濃度逐步下降?？傮w而言，無論飼料中補(bǔ)充晶體還是微囊Lys，飼料中其它氨基酸的達(dá)峰時(shí)間和濃度接近。

3 討論

3.1 補(bǔ)充單體Lys的促生長效果

水產(chǎn)飼料中補(bǔ)充單體Lys的作用效果，常因動(dòng)物種類的不同而異。Murai(1987)報(bào)道，對幼齡鯉魚，每日投喂一次添加晶體氨基酸的飼料。其中約有40%的晶體氨基酸通過腎臟、鰓排泄掉；如果投喂次數(shù)增加至4次/日以上，雖然利用率有所提高了，但是魚類對晶體氨基酸的吸收仍然早于對蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生的氨基酸的吸收。從而不能起到補(bǔ)充外源性氨基酸的應(yīng)有作用。本試驗(yàn)表明：在對照組飼料中補(bǔ)充晶體Lys未顯著提高草魚生長性能，但補(bǔ)充微囊Lys都顯著提高了草魚的生產(chǎn)性能，且微囊Lys在添加量為相應(yīng)晶體Lys組的1/2～1/4條件下，仍略優(yōu)于晶體Lys添加組。

3.2 對血漿游離氨基酸的影響

添加外源性氨基酸，在魚的腸道中無需經(jīng)過消化而被直接吸收，而飼料蛋白質(zhì)則需要被分解為小肽或氨基酸后才能被吸收。兩者在吸收時(shí)間上的不同步是客觀存在的。在本試驗(yàn)中，添加晶體和微囊化Lys后，魚血漿游離Lys的達(dá)峰時(shí)間完全不一致，補(bǔ)充晶體Lys后很快就在血漿中達(dá)到峰濃度，而補(bǔ)充微囊Lys后，其達(dá)峰時(shí)間要延后1 h以上，與其它血漿中的各必需氨基酸的達(dá)峰時(shí)間接近一致。由此可見對晶體氨基酸進(jìn)行微囊，或包膜緩釋處理是提高氨基酸利用率的一條有效途徑。劉永堅(jiān)等（2002）、冷向軍等（2007）的試驗(yàn)證明了晶體氨基酸經(jīng)包被處理后，其在血液的吸收峰值出現(xiàn)了不同程度的延遲。這表明：晶體氨基酸經(jīng)包被或微囊處理后，延緩了在腸道內(nèi)釋放速度，從而有效地解決了外源性氨基酸與蛋白態(tài)氨基酸吸收不同步的矛盾，提高了外源性氨基酸的利用率。

可見，晶體氨基酸經(jīng)微囊處理后，可能減少了水中溶失率，減緩和延長了晶體氨基酸在消化道內(nèi)的釋放。促進(jìn)了外源性氨基酸與飼料中蛋白態(tài)氨基酸的同步吸收，顯著提高了外源性氨基酸的利用效率，能夠?qū)Σ蒴~魚種的生長起到促進(jìn)作用。同時(shí)，在實(shí)際應(yīng)用中還應(yīng)根據(jù)不同的飼料配方基礎(chǔ)，做出合理的調(diào)整，以達(dá)到生長性能和養(yǎng)殖收益的合理雙贏。

[1]周賢君,解綬啟,謝從新,等.異育銀鯽幼魚對飼料中賴氨酸的利用及需要量研究[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2006,30(3):248-256.

[2]冷向軍,王冠,李小勤.飼料中添加晶體或包膜氨基酸對異育銀鯽生長和血清游離氨基酸水平的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2007,31(6):744-749.

[3]劉永堅(jiān),田麗霞,劉棟輝.實(shí)用補(bǔ)充晶體或包膜Lys對草魚生長、血清游離氨基酸和肌肉蛋白質(zhì)合成率的影響 [J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2002,26(3):252-258.