光葉巴豆根的化學(xué)成分研究

李昌松， 趙俊凌， 張麗霞， 高微微

(1．中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，云南分所，云南 景洪666100;2．中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，北京100193)

光葉巴豆Croton laevigatus Vahl．為大戟科巴豆屬喬木，主要分布于云南，廣東，海南等省。傣語(yǔ)稱(chēng)抱尤，其根、葉在云南西雙版納民間作藥用，味辛，性溫，有毒。具有活血散瘀、退燒熱、止痛、通經(jīng)、消腫之功效。主治跌打損傷、骨折、瘧疾、胃痛［1］。對(duì)巴豆屬植物化學(xué)成分研究表明二萜及其內(nèi)脂、多酚類(lèi)(鞣質(zhì))是該屬植物的主要化學(xué)成分，其它成分還包括三萜、黃酮及生物堿［2］。光葉巴豆根的化學(xué)成分迄今尚未見(jiàn)報(bào)道，本試驗(yàn)對(duì)該種植物根部化學(xué)成分進(jìn)行了研究，分離得到7個(gè)化合物，分別鑒定為levatin(Ⅰ)，croverin(Ⅱ)，crovatin(Ⅲ)，sonderianial(Ⅳ)，棕櫚酸(Ⅴ)，反式肉桂酸(Ⅵ)，苯甲酸(Ⅶ)。以上成分均是從該植物中首次分離得到。

1 儀器和材料

X4型數(shù)字纖維熔點(diǎn)儀，溫度計(jì)未校正(北京福凱科技發(fā)展有限公司);Bruker Avance-Ⅲ600型核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo);Bruker Daltonics-Bio-TOF-Q液質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定;R-210V旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Buchi公司);反相硅膠LichropropRP-18(德國(guó)MERK公司);柱色譜硅膠(200-300目)(青島海洋化工廠);大孔樹(shù)脂HP20(日本三菱化學(xué)公司);化學(xué)試劑均為工業(yè)純產(chǎn)品。

光葉巴豆藥材于2009年9月采自云南省西雙版納傣族自治州，采收部位為根部。于陰涼處晾干20 d，粉碎成粗粉備用。經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所彭朝忠教授鑒定為大戟科巴豆屬植物光葉巴豆Croton laevigatus Vahl．的根，標(biāo)本保存于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所標(biāo)本室。

2 提取與分離

光葉巴豆根粉末(35 kg)用100 L 95%乙醇浸泡3次，每次7 d。提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至無(wú)醇味，用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液濃縮蒸干，分別得石油醚萃取物(200 g)，乙酸乙酯萃取物(500 g)，正丁醇萃取物(100 g)。將乙酸乙酯部分經(jīng)大孔樹(shù)脂柱色譜(先用甲醇-水體系，60%，75%，85%梯度洗脫，最后純丙酮洗脫)，得到21個(gè)流份。3～6流份濃縮后溶解于丙酮中，從中結(jié)晶出化合物Ⅰ(10．100 g)。7～13流份經(jīng)硅膠柱色譜分離(石油醚-丙酮，5∶1)得到富含化合物Ⅱ和Ⅲ的流份，兩者濃縮后分別在丙酮結(jié)晶，得到化合物Ⅱ(7．505 g)和化合物Ⅲ(3．200 g)。14～19流份分別濃縮后溶解于丙酮中，從中共結(jié)晶出化合物Ⅲ(40．000 g)，合并母液，濃縮后經(jīng)硅膠柱色譜分離石油醚-丙酮(25∶1和5∶1)洗脫，得到富含化合物Ⅳ和化合物Ⅲ的部分，前者在乙酸乙酯中結(jié)晶得到化合物Ⅳ(10 mg)，后者在丙酮中結(jié)晶得化合物Ⅲ(8．492 g)。石油醚部分進(jìn)行硅膠柱色譜梯度洗脫(石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)，10 ∶0，20 ∶1，10 ∶1，5 ∶1，2 ∶1，1 ∶1)，梯度洗脫，重結(jié)晶等手段反復(fù)分離純化，得到化合物Ⅴ(30 mg)，化合物Ⅵ(12 mg)，化合物Ⅶ(13 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ:無(wú)色米粒狀結(jié)晶(丙酮)，mp 198℃，［a］20D+59°(CHCl3;c 1．12)。ESI-MS m/z:351［M+Na］+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ:2．12(1H，m，H-1)，1．76(1H，m，H-1)，1．70(1H，m，H-2)，2．17(1H，m，H-2)，4．65(1H，t，J=5．4 Hz，H-3)，2．31(1H，ddd，J=11．7，6．0，2．2 Hz，H-4)，1．67(1H，m，H-4)，2．03(1H，dt，J=13．5，3．6 Hz，H-6)，1．46(1H，td，J=13．2，3．6 Hz，H-6)，2．26(1H，dt，J=13．7，3．6 Hz，H-7)，3．67(1H，m，H-7)，1．79(1H，m，H-10)，2．84(1H，dd，J=14．3，7．2 Hz，H-11)，2．46(1H，dd，J=14．3，9．0 Hz，H-11)，5．45(1H，dd，J=8．6，7．2 Hz，H-12)，6．35(1H，t，J=1．2 Hz，H-14)，7．41(1H，d，J=1．8 Hz，H-15)，7．42(1H，d，J=1．8，H-16)，4．81(1H，brs，H-17)，5．02(1H，d，J=1．2，H-17)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ:22．6(C-1)，28．8(C-2)，74．0(C-3)，47．1(C-4)，44．7(C-5)，32．7(C-6)，29．4(C-7)，147．1(C-8)，52．9(C-9)，51．7(C-10)，40．8(C-11)，71．2(C-12)，125．8(C-13)，108．1(C-14)，139．7(C-15)，144．3(C-16)，111．1(C-17)，173．9(C-19)，176．7(C-20)。與文獻(xiàn)［3］報(bào)道基本一致，故確定其為levatin。

化合物Ⅲ:無(wú)色片狀結(jié)晶(丙酮)，mp 162℃，［a］20D－50°(CHCl3;c 1．56)。ESI-MS m/z:397［M+Na］+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ:1．96(1H，m，H-1)，2．32(1H，m，H-1)，1．85(1H，m，H-2)，1．57(1H，m，H-2)，4．49(1H，m，H-3)，2．84(1H，dd，J=4．8，0．6 Hz，H-4)，1．35(1H，m，H-6)，1．71(2H，m，H-6，H-8)，2．02(1H，m，H-7)，1．44(1H，m，H-7)，2．39(1H，m，H-10)，2．24(1H，dd，J=13．8，7．2 Hz，H-11)，2．14(1H，dd，J=13．8，9．0Hz，H-11)，5．32(1H，dd，J=9．0，7．2 Hz，H-12)，6．37(1H，d，J=0．6 Hz，H-14)，7．36(1H，d，J=1．8 Hz;H-15)，7．38(1H，d，J=1．8 Hz，H-16)，0．94(3H，d，J=0．6 Hz，H-17)，5．12(1H，s，H-19)，5．27(1H，s，H-20)，3．69(3H，s，H-21)。13CNMR(150 MHz，CDCl3)δ:20．3(C-1)，26．7(C-2)，75．9(C-3)，54．2(C-4)，44．4(C-5)，30．6(C-6)，31．7(C-7)，37．6(C-8)，50．5(C-9)，39．0(C-10)，38．7(C-11)，75．1(C-12)，127．3(C-13)，108．8(C-14)，143．6(C-15)，139．4(C-16)，17．1(C-17)，170．4(C-18)，104．5(C-19)，100．8(C-20)，51．8(C-21)。與文獻(xiàn)［5］報(bào)道的一致，故確定其為crovatin。

化合物Ⅳ:無(wú)色針狀晶體(乙酸乙酯)，易溶于三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮。mp 130～133℃，［a］20D-84°(CHCl3;c 1．22)。ESI-MS m/z:383 ［M+Na］+，399［M+K］+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ:1．97(1H，m，H-1)，2．10(1H，m，H-1)，2．28(1H，m，H-2)，2．1(1H，m，H-2)，6．71(1H，dd，J=3．6，1．5 Hz，H-3)，1．75(1H，m，H-6)，2．35(1H，m，H-6)，1．51(1H，m，H-7)，1．31(1H，m，H-7)，1．53(1H，m，H-10)，1．19(1H，dd，J=13．8，7．2 Hz，H-11)，2．33(1H，dd，J=13．8，9．0 Hz，H-11)，5．19(1H，dd，J=9．0，7．2 Hz，H-12)，6．42(1H，d，J=0．6 Hz，H-14)，7．39(1H，d，J=1．8 Hz，H-15)，7．41(1H，d，J=1．8 Hz，H-16)，0．94(3H，d，J=0．6 Hz，H-17)，1．34(3H，s，H-19)，5．33(1H，s，H-20)，3．65(3H，s，H-21)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ:21．6(C-1)，29．3(C-2)，139．4(C-3)，141．5(C-4)，38．9(C-5)，44．8(C-6)，29．3(C-7)，44．6(C-8)，53．9(C-9)，52．7(C-10)，36．7(C-11)，70．4(C-12)，125．7(C-13)，109．2(C-14)，143．5(C-15)，139．4(C-16)，18．2(C-17)，168．1(C-18)，20．9(C-19)，100．5(C-20)，51．4(C-21)。與文獻(xiàn)［6］報(bào)道的一致，故確定其為 sonderianial，并結(jié)合HMBC，HSQC，NOESY完成了全部數(shù)據(jù)的指認(rèn)。

化合物Ⅴ:白色固體，易溶于三氯甲烷，mp 57～59℃。EI-MS m/z(%):256(M+，55)，227(8)，213(27)，199(10)，185(20)，171(16)，157(14)，143(8)，129(50)，115(18)，97(30)，83(35)，73(100)。與標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖［7］及對(duì)照品薄層對(duì)照鑒定該化合物為棕櫚酸(palmic acid)。

化合物Ⅵ:白色粉末，mp 99～105℃，ESI-MS m/z:147 ［M-H］－。1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ:7．80(1H，d，J=16．00 Hz，H-7)，6．46(1H，d，J=16．00 Hz，H-8)，7．56(2H，dd，J=7．25，2．12 Hz，H-2，6)，7．42(3H，m，H-3，4，5)。與文獻(xiàn)［8］報(bào)道的數(shù)據(jù)基本一致，故確定其為反式肉桂酸 (transcinnamic acid)。

化合物Ⅶ:白色針晶(乙酸乙酯)，mp 121～123℃，ESI-MS m/z:122［M］+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ:7．41(2H，dd，J=7．8，6．3 Hz，H-3，5)，7．55(1H，dd，J=7．8，1．2 Hz，H-4)，8．05(2H，dd，J=6．3，1．2 Hz，H-2，6)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ:130．1(C-1)，131．3(C-2，6)，129．4(C-3，5)，133．8(C-4)，167．8(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道的一致，故確定其為苯甲酸(benzoic acid)。

化合物Ⅰ～Ⅳ的結(jié)構(gòu)圖見(jiàn)圖1。

圖1 化合物Ⅰ～Ⅳ的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig．1 Chem ical structure of compound Ⅰ － Ⅳ

4 討論

以上化合物均是從該植物中首次報(bào)道，其中克羅烷型的二萜仍是該植物中最主要的化學(xué)成分，這與絕大部分巴豆屬植物的化學(xué)成分基本一致。其中l(wèi)evatin(10．100 g)，croverin(7．505 g)，crovatin(51．692 g)三種成分的量較高，可能是該植物的活性成分。光葉巴豆在傣族民間用藥歷史悠久，但目前尚未見(jiàn)其藥理藥效研究。鑒于此下一步有必要開(kāi)展上述化學(xué)成分的活性研究。

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