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    維吾爾藥材龍蒿、黃花蒿、野艾蒿的鑒別研究

    2011-09-12 11:43:22楊偉俊羅玉琴滿爾哈巴海如拉
    中國民族醫(yī)藥雜志 2011年9期
    關(guān)鍵詞:極軸花粉粒艾蒿

    楊偉俊 何 江 羅玉琴 滿爾哈巴·海如拉 譚 為 徐 芳

    (1.新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所/新疆維吾爾藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆烏魯木齊830004;2.中國科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所,新疆烏魯木齊830011)

    菊科蒿屬Artemisia L.在新疆分布50余種,藥用7種。其中龍蒿 A.dracunculus L.、黃花蒿 A.annua L.、野艾蒿A.lavandulaefolia DC.等作為維吾爾醫(yī)和哈薩克醫(yī)習(xí)用藥材廣泛應(yīng)用于民間和臨床。黃花蒿維語名“夏木牙格其”,性溫(二級干熱),用于心慌氣短、結(jié)核病、食欲不振、感冒發(fā)燒、尿路澀閉等;野艾蒿維語名“阿里云”,性溫(三級干熱),用于風(fēng)寒感冒、腸道寄生蟲、小便不利、尿路結(jié)石、月經(jīng)不調(diào)、腹脹寒痛及氣管炎和咳嗽、關(guān)節(jié)炎等疾患;龍蒿又稱椒蒿,維語名“庫力蘭艾曼”,性溫,用于受寒感冒、腸胃寒痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[1,2]。由于三者形態(tài)及粉末顯微特征近似,影響鑒定的準(zhǔn)確性。近年來,通過光學(xué)顯微鏡對蒿屬的花粉粒等進(jìn)行鑒定研究的方法已有報(bào)道[3-6]。有鑒于此,本研究通過對龍蒿、黃花蒿、野艾蒿3種蒿屬植物的花粉形態(tài),如大小、形狀、溝的特征等進(jìn)行系統(tǒng)研究,結(jié)合薄層色譜分析,以期獲得鑒別3種蒿屬藥材簡單、有效的鑒別方法。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料:供試材料取自新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所標(biāo)本室的臘葉標(biāo)本,標(biāo)本由新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所研究員鑒定,分別為龍蒿Artemisia dracunculus L.、黃花蒿 Artemisia annua L.、野艾蒿 Artemisia lavandulaefolia DC.。

    1.2 儀器:OLYMPUSCX31型照相顯微鏡(日本奧林巴斯公司),LY-WN-HPCCD型動態(tài)顯微成像系統(tǒng)(成都勵(lì)揚(yáng)精密機(jī)電有限公司);BS110S型電子天平(Sartorius);KQ-5200B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);WHF-203B暗箱式三用紫外分析儀(上海精科實(shí)業(yè)有限公司);SZ-93型雙重純水蒸餾器(鞏義市英峪予華儀器廠);DZKW-S-4電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 花粉粒顯微特征及測量:樣品的處理 采用硫酸-醋酸酐分解法制備花粉[7]。

    觀察照相并測量 在顯微鏡下觀察花粉粒的形狀,外部紋飾;測量花粉粒的極軸長、赤道軸長、三孔溝的溝深、溝寬,每個(gè)指標(biāo)隨機(jī)測量20個(gè)。用極軸長×赤道軸長表示花粉粒的大小;用極軸長/赤道軸長表示花粉粒的形狀(長圓、圓、扁圓);用溝深/溝寬表示花粉粒溝的角度張開大小。

    1.3.2 薄層色譜鑒別:分別取龍蒿、黃花蒿、野艾蒿3種藥材粗粉3 g,加甲醇100 mL,置水浴上加熱回流1 h,濾過,濾液蒸干后,加水50 mL溶解,加同比例石油醚萃取3遍,合并水層,蒸干后殘?jiān)蛹状既芙庵? mL,作為樣品溶液。分別吸取上述溶液各3μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-乙酸乙酯(2:1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 顯微照片(目鏡15×,物鏡40×)及測量結(jié)果

    3種植物花粉呈球形、近長球形或長球形,極面觀均為三裂圓形,赤道面觀為圓形或橢圓形;花粉具有三孔溝,溝中間較寬,兩頭狹窄;孔明顯,橫長;外壁為兩層結(jié)構(gòu),外壁較厚,內(nèi)由覆蓋層和柱狀層組成,內(nèi)層薄;外壁文飾為表面顆粒狀。劃分形態(tài)見圖1,測量結(jié)果見表1。

    圖1 顯微照片(目鏡15×,物鏡40×)及測量結(jié)果

    表1 龍蒿、黃花蒿、野艾蒿花粉粒的形態(tài)測量數(shù)據(jù)比較

    從表1可見,3種蒿屬花粉粒的大小關(guān)系:龍蒿最大,其次是野艾蒿,黃花蒿最小。同時(shí),根據(jù)極軸長/赤道軸長的值可以看出3種蒿屬花粉粒的形狀,龍蒿花粉粒是由長圓到圓的變化(1.38 ~1.03),而黃花蒿(1.53 ~0.741)、野艾蒿(1.32~0.771)的形狀較相似,都是由長圓到圓再到扁圓變化。根據(jù)花粉粒溝深/溝寬值可以看出3種蒿屬花粉粒溝所張開的角度大小不同,其中龍蒿花粉粒溝張開角度最大;其次是野艾;黃花蒿最小。

    通過方差齊性檢驗(yàn)、非參數(shù)檢驗(yàn)中 Kruskal-Wallis法、Nemenyi、Newman-Keuls法檢驗(yàn)得出:3種蒿屬植物的花粉粒的大小兩兩比較都成顯著性差異,從而可以用來區(qū)分三者;花粉粒形狀野艾蒿與其他二者無顯著性差異,而龍蒿與黃花蒿差異顯著,從而可以區(qū)分龍蒿與黃花蒿;溝張開角度的大小龍蒿與野艾蒿幾乎沒有顯著差別,黃花蒿與二者差別顯著,從而可以用來區(qū)分出黃花蒿。

    2.2 薄層色譜鑒別:黃花蒿與野艾蒿在位置A處(Rf=0.43),均出現(xiàn)相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn),而龍蒿在A處未出現(xiàn)藍(lán)色熒光斑點(diǎn);黃花蒿在位置B處(Rf=0.26)出現(xiàn)亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn),龍蒿和野艾蒿在相應(yīng)位置B處未出現(xiàn)此斑點(diǎn),結(jié)果見圖2。

    圖2 薄層色譜鑒別圖

    3 討論

    3.1 蒿屬植物花粉既有科的共同特征,也有屬種的特異性,本研究也證明了這一點(diǎn),其外部形態(tài)都呈近球形或近長球形,表面紋飾都呈顆粒狀,它們都有沿極軸走行的三條孔溝。

    3.2 根據(jù)花粉粒極軸長×赤道軸長可以看出3種蒿屬花粉粒的大小關(guān)系為:龍蒿最大,其次是野艾蒿,黃花蒿最小。形狀特點(diǎn)是龍蒿花粉粒是由長圓到圓的變化,而黃花蒿、野艾蒿的形狀較相似,都是由長圓到圓再到扁圓變化。根據(jù)花粉粒溝深/溝寬值可以看出龍蒿花粉粒溝張開角度最大,其次野艾蒿和黃花蒿,且二者相差不大。

    3.3 曾有學(xué)者[6]報(bào)道了三種花粉粒大小(極軸長×赤道軸長),與本次研究所測得的數(shù)據(jù)對比如下:

    表2 花粉粒大小比較(單位m2)

    從表2知,本研究的3種花粉粒大小與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)基本一致,說明上述3種蒿屬植物的花粉粒大小地域性差別小,種內(nèi)具有高度的保守性。同時(shí)利用花粉粒的大小、形狀、孔溝的形態(tài)可區(qū)分這3種蒿屬植物,并可作為鑒別它們的可靠依據(jù)。

    3.4 本文還采用紫外光譜法對龍蒿、黃花蒿、野艾蒿3種藥材進(jìn)行掃描研究,紫外圖譜顯示這3種藥材均在328±2 nm處有最大吸收峰,且峰形相似,無法區(qū)分3者,而采用薄層色譜法可以很好地區(qū)分這3種藥材。

    [1]新疆植物志編輯委員會.新疆植物志[M].第五卷.烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社,1999:167,172,175.

    [2]劉勇民.維吾爾藥志[M].下冊.烏魯木齊:新疆科技出版社,1999:728,746,820.

    [3]宛濤,蔡萍,伊衛(wèi)東,等.內(nèi)蒙古森林草原五種裸子植物的花粉形態(tài)觀察[J].中國草地學(xué)報(bào),2010,32(6):105~109

    [4]孟德玉,周頌東,何興金.四川前胡屬的花粉形態(tài)及系統(tǒng)學(xué)意義[J].西北植物學(xué)報(bào),2004,24(12):234l~2345.

    [5]LIU Zhen,GAO Shan lin.Research on Pollen Grains of Tetraploid Lines and Diploid Control Line of Chrysanthemum cinerariifolium(Trev.)Vis.[J].Agricultural Science & Technology,2010,11(5):151 ~154

    [6]王伏雄,錢南芬,張玉龍.中國植物花粉形態(tài)[M].第二版.北京:科學(xué)出版社,1997:3 ~5.

    [7]ERDTMANG.Suggestions for the classification of fossil and recent pollen grains and spores[J].Svensk Bot Tidskr,1947,41:104~114

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