CD82/KAI1和HIF-1α在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其與血管生成擬態(tài)的關(guān)系

武世伍 承澤農(nóng) 俞嵐 宋文慶 陶儀聲

CD82/KAI1基因是一個(gè)新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，該基因位于染色體11p11.2，編碼產(chǎn)物為細(xì)胞膜糖蛋白，屬于4次跨膜蛋白超家族（transmembrane 4 superfamily,TM4SF）家族成員，廣泛表達(dá)于多種組織。其表達(dá)與多種腫瘤的演進(jìn)和預(yù)后及胚胎的植入密切相關(guān)[1,2]。缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α）是缺氧條件下廣泛存在于哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子，是應(yīng)答缺氧應(yīng)激的關(guān)鍵基因，它的活性對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)移及血管生成等生物學(xué)行為起著重要作用。血管生成擬態(tài)（vasculogenic mimicry, VM）是Yue[3]發(fā)現(xiàn)的一種獨(dú)特的腫瘤血液供應(yīng)方式，即是一種由腫瘤細(xì)胞變形并形成可輸送血液的管道結(jié)構(gòu)，對(duì)緩解腫瘤缺氧起重要作用。VM的存在與疾病進(jìn)展和預(yù)后不良相關(guān)。本研究通過(guò)檢測(cè)160例非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）病例標(biāo)本CD82/KAI1、HIF-1α的表達(dá)和VM，旨在尋找能預(yù)測(cè)NSCLC患者局部浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及術(shù)后生存率的指標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科2003年1月-2005年4月存檔石蠟包埋NSCLC組織標(biāo)本160例（術(shù)前未行放、化療）和正常肺組織標(biāo)本20例，所有病例均有完整的臨床、病理及隨訪資料，入選病例隨訪至患者死亡或截至2010年4月，隨訪時(shí)間為3個(gè)月-84個(gè)月。其中男性130例，女性30例；從大體類型看，中央型120例，周圍型40例；鱗癌116例（高分化17例，中分化71例，低分化28例），腺癌44例（高分化4例，中分化32例，低分化8例）。年齡26歲-82歲，中位年齡59.6歲，≥60歲者86例，＜60歲者74例；腫瘤長(zhǎng)徑D≥3.0 cm者145例，D＜3.0 cm者15例；按淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移，有轉(zhuǎn)移76例，無(wú)轉(zhuǎn)移84例。根據(jù)UICC2002版pTNM病理分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期，其中I期患者31例，II期患者43例，III期患者34例，IV期患者52例。對(duì)照組正常肺組織20例取自肺癌腫塊＞5.0 cm的肺組織，病理HE染色證實(shí)為正常肺組織。

1.2 試劑 鼠抗人CD82/KAI1單克隆抗體（克隆號(hào)：G-2）、鼠抗人HIF-1α單克隆抗體（產(chǎn)品編號(hào)：SC-53546）購(gòu)自Santa Cruz公司；鼠抗人CD34單克隆抗體（產(chǎn)品編號(hào)：MAB-0034，克隆號(hào)QBEnd/10）、ElivisionTMplus試劑盒以及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。PAS染色液為蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科配制。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 采用免疫組織化學(xué)ElivisionTMplus法 將石蠟標(biāo)本以4 μm厚連續(xù)切片、烤干，于二甲苯溶液及不同濃度的乙醇中脫蠟至水洗。免疫組化染色操作步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。采用已知陽(yáng)性片作對(duì)照，以PBS液代替一抗作空白對(duì)照。

1.3.2 CD34和PAS套染 CD34染色，DAB顯色后，流水沖洗1 min終止顯色反應(yīng)，PAS染色按照《臨床技術(shù)操作規(guī)范——病理學(xué)分冊(cè)》說(shuō)明進(jìn)行。

1.3.3 微血管密度（microvessel density, MVD）計(jì)數(shù) CD34主要表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞漿和胞膜，從而可以通過(guò)CD34的陽(yáng)性表達(dá)來(lái)進(jìn)行MVD計(jì)數(shù)，參照修改過(guò)的Weidner[4]法來(lái)計(jì)數(shù)。

1.4 結(jié)果判定 CD34和CD82/KAI1均以細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性；HIF-1α蛋白以細(xì)胞核內(nèi)和胞漿有棕黃色細(xì)顆粒為陽(yáng)性。采取二次計(jì)分法：每例標(biāo)本隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野（×400），計(jì)數(shù)每個(gè)高倍視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比并計(jì)分。首先將染色強(qiáng)度計(jì)分：0分為無(wú)色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色。再將陽(yáng)性細(xì)胞百分比計(jì)分，0分為陰性，1分為陽(yáng)性細(xì)胞為＜10%，2分為11%-50%，3分為51%-75%，4分為＞75%。用染色強(qiáng)度得分和細(xì)胞數(shù)得分的乘積作為判斷表達(dá)結(jié)果，若積分≤1為陰性，＞1為陽(yáng)性。免疫組化結(jié)果由高年資病理醫(yī)師讀片評(píng)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。CD82/KAI1、HIF-1α和VM表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組生存分析用Kaplan-Meier法，組間比較用Log-rank檢驗(yàn)，多因素分析采用Cox回歸多因素模型，在NSCLC組織中，CD82/KAI1、HIF-1α的表達(dá)和VM與正常肺組織、各臨床及病理因素的相關(guān)性采用χ2和Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC中存在VM HE染色光鏡下可見(jiàn)由腫瘤細(xì)胞圍成的管道樣結(jié)構(gòu)，無(wú)內(nèi)皮細(xì)胞襯覆，管腔內(nèi)不見(jiàn)壞死的腫瘤細(xì)胞及炎癥細(xì)胞。經(jīng)CD34與PAS雙重染色，管腔呈現(xiàn)CD34陰性但PAS陽(yáng)性的結(jié)構(gòu)，即VM（圖1A，圖1B）；此外，還能見(jiàn)到網(wǎng)絡(luò)狀的VM。160例NSCLC標(biāo)本中，36.9%（59/160）可見(jiàn)由CD34陰性的腫瘤細(xì)胞圍成的管道樣或網(wǎng)絡(luò)狀的結(jié)構(gòu)，而PAS陽(yáng)性，一層PAS陽(yáng)性物質(zhì)將腫瘤細(xì)胞和管腔分開(kāi)。正常肺組織中未見(jiàn)有VM現(xiàn)象。

2.2 NSCLC中的VM與臨床病理的關(guān)系 VM陽(yáng)性在患者的性別、年齡、組織學(xué)類型等之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。隨著NSCLC的分化越差，VM的陽(yáng)性越強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），pTNM分期I期-II期VM陽(yáng)性率為4.1%（3/74），III期-IV期VM陽(yáng)性率為65.1%（56/86），VM組的pTNM分期與無(wú)VM組的pTNM分期相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），且VM組的患者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P＜0.01）（表1）。

2.3 NSCLC中CD82/KAI1的表達(dá)及其與臨床病理的關(guān)系CD82/KAI1主要定位于NSCLC癌細(xì)胞膜，胞漿也有一定表達(dá)，呈棕黃色。正常肺組織中CD82/KAI1陽(yáng)性顆粒主要位于細(xì)胞漿和膜（圖1F）。在NSCLC中，CD82/KAI1的陽(yáng)性率為37.5%（圖1C，圖1D，圖1E），較正常肺組織的表達(dá)率（19/20）明顯減少（P＜0.01）。CD82/KAI1的表達(dá)與患者性別、年齡及組織學(xué)類型無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。隨著NSCLC的分化越差，CD82/KAI1的表達(dá)越低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；CD82/KAI1的陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.01）；I期-II期腫瘤中CD82/KAI1的陽(yáng)性率為66.2%（49/74），III期-IV期腫瘤中CD82/KAI1的陽(yáng)性率為12.8%（11/86），兩者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）（表1）。

2.4 NSCLC中HIF-1α的表達(dá)及其與臨床病理的關(guān)系 HIF-1α主要表達(dá)于NSCLC癌細(xì)胞核，棕黃色，在胞漿中也有少量表達(dá)。對(duì)照組未見(jiàn)有HIF-1α表達(dá)（圖1J），在NSCLC中HIF-1α蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為48.8%（圖1G，圖1H，圖1I），其表達(dá)與NSCLC的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)，即隨著HIF-1α表達(dá)越高，腫瘤的分化越差、臨床分期越晚、更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（表1）。

2.5 NSCLC中CD82/KAI1、HIF-1α的表達(dá)和VM情況以及它們的關(guān)系 在VM陽(yáng)性組的病例中，CD82/KAI1陽(yáng)性率為3.4%（2/59）；在CD82/KAI1陽(yáng)性表達(dá)的病例中，VM的陰性率為96.7%（58/60），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Spearman相關(guān)分析顯示， CD82/KAI1在NSCLC中的表達(dá)與VM呈負(fù)相關(guān)（r=-0.539, P＜0.01）。從表2可以看出，CD82/KAI1與HIF-1α的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.704, P＜0.01），HIF-1α的表達(dá)與VM 呈正相關(guān)（r=0.654, P＜0.01）。

2.6 MVD與CD82/KAI1、HIF-1α、VM的關(guān)系 Spearman相關(guān)分析顯示，CD82/KAI1的表達(dá)與MVD呈負(fù)相關(guān)（r=-0.596, P＜0.01）；VM的陽(yáng)性與MVD呈正相關(guān)（r=0.747, P＜0.01）；HIF-1α的表達(dá)與MVD呈正相關(guān)（r=0.716, P＜0.01）（表2）。

2.7 多因素分析 將病理組織分化（分為高分化組、中分化組與低分化組），年齡（分為≥60歲組與＜60歲組）、pTNM分期（分為I期+II期組與III期+IV期組）、腫瘤直徑（分為≥3.0 cm組與＜3.0 cm組）、腫瘤位置（分為中央型組與周圍型組）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（分為有轉(zhuǎn)移組與無(wú)轉(zhuǎn)移組）、性別（男性組與女性組）、VM（分為陽(yáng)性組與陰性組）、MVD（因?yàn)镸VD的均值為22.42±12.8，故以MVD＜22為陰性，MVD≥22為陽(yáng)性）；CD82/KAI1（分為表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組）和HIF-1α（分為表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組）等因素引入Cox模型進(jìn)行多因素分析，結(jié)果顯示：CD82/KAI1與HIF-1α的表達(dá)和VM及pTNM分期是影響NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立因素（表3）。

2.8 生存分析 本組病例總的5年生存率為26.9%。Kaplan-Meier生存分析顯示VM陽(yáng)性組與陰性組5年生存率分別為1.7%（1/59）和41.6%（42/101），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，圖2A）；CD82/KAI1陽(yáng)性組與陰性組5年生存率分別為68.3%（41/60）和2.0%（2/100），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，圖2B）；HIF-1α陽(yáng)性組與陰性組5年生存率分別為3.8%（3/78）和48.8%（40/82），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，圖2C）；MVD≥22和MVD＜22的5年生存率分別為2.9%（2/69）和45.1%（41/91），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，圖2D）。

3 討論

部分高侵襲性腫瘤存在一種不依賴血管內(nèi)皮細(xì)胞，而是由腫瘤細(xì)胞通過(guò)自身變形和細(xì)胞外基質(zhì)重塑直接圍成的管道樣結(jié)構(gòu)，并可與宿主靜脈相通，以獲取血供，即血管生成擬態(tài)-VM[5]。VM的提出不僅對(duì)傳統(tǒng)的血管生成理論提出了挑戰(zhàn)，同時(shí)也是對(duì)腫瘤血管形成理論的重要補(bǔ)充。Folberg等[6]在葡萄膜黑色素瘤中定義了幾種形態(tài)的VM，即有的呈直的或平行排列的或十字交叉的直線型、有或無(wú)分支的弧形、封閉的環(huán)形、網(wǎng)絡(luò)狀等結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)都呈現(xiàn)PAS陽(yáng)性而CD34陰性。后來(lái)在肝癌[7]、卵巢癌[8]、前列腺癌[9]及雙分化腫瘤[10]等高度惡性腫瘤中都報(bào)道有VM的存在。

圖 1 VM、CD82/KAI1和HIF-1α在NSCLC中的陽(yáng)性染色以及對(duì)照組中的染色。A、B：NSCLC中VM陽(yáng)性染色（黑箭頭所示為VM結(jié)構(gòu)，紅箭頭所示為血管，A和B為低分化鱗癌，ElivisionTM×400）；C、D、E：NSCLC中CD82/KAI1表達(dá)陽(yáng)性，主要表達(dá)于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿（C為中分化鱗癌，D為低分化鱗癌，E為高分化鱗癌，ElivisionTM×400）；F：對(duì)照組中CD82/KAI1表達(dá)陽(yáng)性，主要表達(dá)于細(xì)胞漿和細(xì)胞膜（為正常支氣管腺，ElivisionTM×400）；G、H、I：NSCLC中HIF-1α表達(dá)陽(yáng)性，主要表達(dá)于細(xì)胞核和細(xì)胞漿（G為低分化腺癌，H為中分化鱗癌，I為中分化腺癌，ElivisionTM×400）；J：對(duì)照組中HIF-1α表達(dá)陰性（正常肺組織，ElivisionTM×100）。Fig 1 Positive staining of VM, CD82/KAI1 and HIF-1α in NSCLC and staining in the control group. A,B: positive staining of VM in NSCLC (black arrow is VM, red arrow is vessel, A and B are poor differentiation squamous carcinoma, ElivisionTM×400)； C,D, E: positive staining of CD82/KAI1 in membrane and plasma of NSCLC (C is mediate differentiation squamous carcinoma, D is poor differentiation squamous carcinoma, E is well differentiation squamous carcinoma, ElivisionTM×400)； F: positive staining of CD82/KAI1 in plasma and membrane of the control group (normal bronchial glands, ElivisionTM×400)； G, H, I: positive staining of HIF-1αin nuclei and plasma of NSCLC (G is poor differentiation adenocarcinoma, H is mediate differentiation squamous carcinoma, I is mediate differentiation adenocarcinoma, ElivisionTM×400)； J：negative staining of HIF-1α in the control group (J is normal lung tissue, ElivisionTM×100). VM：vasculogenic mimicry；HIF-1α：hypoxia inducible factor-1α；NSCLC：non-small cell lung cancer.

圖 2 VM、CD82/KAI1、HIF-1α和MVD陽(yáng)性組與陰性組NSCLC患者生存曲線。A：VM陽(yáng)性組與陰性組NSCLC患者生存曲線；B：CD82/KAI1表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組NSCLC患者生存曲線；C：HIF-1α表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組NSCLC患者生存曲線；D：MVD≥22組與＜22組NSCLC患者生存曲線。MVD：microvessel density。Fig 2 Survival curves of NSCLC patients with positive or negative group VM,CD82/KAI1, HIF-1α and MVD. A: survival curves of NSCLC patients with positive or negative VM group； B: survival curves of NSCLC patients with positive or negative CD82/KAI1 expression； C: survival curves of NSCLC patients with positive or negative HIF-1αexpression； D: survival curves of NSCLC patients with MVD≥22 group or＜22 group.

本研究在59例NSCLC中發(fā)現(xiàn)了符合具有VM標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)，證實(shí)NSCLC中有VM的存在。VM結(jié)構(gòu)由腫瘤細(xì)胞圍成，腫瘤細(xì)胞與血流之間僅有一層PAS陽(yáng)性物質(zhì)相隔，無(wú)血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障，導(dǎo)致了腫瘤患者具有轉(zhuǎn)移早、轉(zhuǎn)移率高、患者臨床預(yù)后差，死亡率高等特點(diǎn)。本研究也顯示VM與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及臨床分期等密切相關(guān)。即有VM的腫瘤具有更差的分化、更低的臨床分期以及更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

HIF-1α基因位于14號(hào)染色體，編碼826個(gè)氨基酸。當(dāng)細(xì)胞缺氧時(shí)，HIF-1α在細(xì)胞核內(nèi)高表達(dá)。HIF-1α可通過(guò)調(diào)控多種靶基因表達(dá)以逃避或適應(yīng)相對(duì)缺氧環(huán)境，參與腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[11]。本研究結(jié)果顯示，HIF-1α表達(dá)高的腫瘤，具有分化差、臨床分期晚和易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)。且HIF-1α和MVD的表達(dá)及VM相互之間具有正相關(guān)性，這說(shuō)明缺氧可能會(huì)參與腫瘤的血管與VM的形成。缺血和缺氧是惡性腫瘤發(fā)展過(guò)程中的普遍現(xiàn)象，當(dāng)腫瘤細(xì)胞缺氧時(shí)，HIF-1α?xí)险{(diào)VEGF表達(dá)[12]，誘導(dǎo)新生血管形成，可以暫時(shí)緩解腫瘤細(xì)胞的缺血、缺氧狀態(tài)。當(dāng)新生血管的血供還不能夠滿足腫瘤細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)需求時(shí)，這時(shí)某些具有可塑性的腫瘤細(xì)胞就會(huì)變形，形成具有VM形態(tài)的結(jié)構(gòu)以獲得足夠供氧，所以具有VM結(jié)構(gòu)的腫瘤細(xì)胞周圍沒(méi)有壞死。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)[13-16]報(bào)道一致。同時(shí)文獻(xiàn)[15]還報(bào)道，抑制HIF-1α的表達(dá)可以阻斷VM的形成，這說(shuō)明缺氧很可能是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞形成VM的一個(gè)重要始動(dòng)因素。

CD82/KAI1基因首先發(fā)現(xiàn)于前列腺癌細(xì)胞，曾被認(rèn)為是前列腺癌特異性的轉(zhuǎn)移抑制基因，命名為KAI1基因[17]，后來(lái)對(duì)該基因的定位及DNA全長(zhǎng)序列測(cè)序證明，其與CD82基因完全相同，故又將其命名為CD82/KAI1基因，屬于TM4SF家族。在腫瘤中CD82/KAI1基因的異常形式表現(xiàn)為基因突變、等位基因缺失和表達(dá)水平的改變等，其中表達(dá)水平與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。本研究發(fā)現(xiàn)CD82/KAI1蛋白在腫瘤組織中的表達(dá)水平比在正常組織中明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；并且隨著腫瘤分化越低、臨床分期越晚，其表達(dá)水平也越低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤中其表達(dá)水平也較沒(méi)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤明顯降低，與文獻(xiàn)[18,19]報(bào)道一致。提示CD82/KAI1基因表達(dá)異常與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展及侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。CD82/KAI1表達(dá)異常使CD82/KAI1正常功能減弱或喪失，從而失去抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的功能。

表 1 NSCLC中VM、CD82/KAI1、HIF-1α和MVD的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系Tab 1 Correlation of VM and CD82/KAI1 and HIF-1αand MVD expression to clinicopathologic characteristics in NSCLC

表 2 NSCLC中VM、CD82/KAI1、HIF-1α和MVD各因素之間的相互關(guān)系Tab 2 The expression of VM and CD82/KAI1 and HIF-1α and MVD, and their relationship in NSCLC

表 3 160例NSCLC患者多因素分析Tab 3 Multivariate survival analysis of 160 patients with NSCLC

本研究多因素分析顯示HIF-1α和CD82/KAI1的表達(dá)情況、VM和pTNM分期是影響NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素，而MVD并非NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素。pTNM分期作為術(shù)后治療的標(biāo)準(zhǔn)已為人們所重視，因此尋找新的可以反映腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為并對(duì)pTNM分期起到一定補(bǔ)充作用的分子標(biāo)記物顯得更為重要。進(jìn)一步的生存分析顯示VM、HIF-1α和MVD陽(yáng)性組的5年生存率明顯低于陰性組，提示VM、HIF-1α和MVD陽(yáng)性組的NSCLC患者的生存時(shí)間比較短，比其陰性組預(yù)后差，這與文獻(xiàn)[21,22]報(bào)道一致。CD82/KAI1陽(yáng)性組與陰性組的5年生存率分別為66.7%和3.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即CD82/KAI1陽(yáng)性表達(dá)組的生存時(shí)間高于陰性表達(dá)組，這與其他學(xué)者研究結(jié)果相同[19-20]。

本研究中，VM和HIF-1α在對(duì)照組20例正常肺組織中均不存在，而在NSCLC中表達(dá)于部分肺癌細(xì)胞，差異明顯；并且隨著腫瘤的進(jìn)展，VM、HIF-1α和MVD的陽(yáng)性率增多。對(duì)CD82/KAI1蛋白與VM、HIF-1α、MVD的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中隨著CD82/KAI1表達(dá)率的降低，VM、HIF-1α和MVD的陽(yáng)性率明顯增多，呈負(fù)相關(guān)。提示CD82/KAI1蛋白的表達(dá)與VM、HIF-1α、MVD的陽(yáng)性率可能存在一定聯(lián)系。隨著腫瘤的快速進(jìn)展，腫瘤組織會(huì)發(fā)生缺血缺氧，缺氧會(huì)誘導(dǎo)新生血管及VM形成；而此時(shí)CD82/KAI1表達(dá)降低導(dǎo)致癌細(xì)胞間的粘附力減弱，移動(dòng)性增強(qiáng)、細(xì)胞分化低[20]；而具有VM結(jié)構(gòu)的腫瘤細(xì)胞與管腔僅間隔一層PAS陽(yáng)性物質(zhì)，此時(shí)粘附力降低的腫瘤細(xì)胞在血流的沖擊下，很容易脫離原發(fā)灶而發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移甚至遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[20]。

綜上所述，CD82/KAI1基因表達(dá)降低可能是NSCLC發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移的分子基礎(chǔ)，血管生成和血管生成擬態(tài)可能是NSCLC發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵事件。因此，CD82/KAI1、VM、HIF-1α和MVD可作為評(píng)估NSCLC轉(zhuǎn)移和預(yù)后的指標(biāo)。