調(diào)經(jīng)祛斑片治療黃褐斑的實(shí)驗(yàn)研究

文建軍 陳興元

黃褐斑，是一種獲得性色素沉著皮膚病，多發(fā)于青年女性，表現(xiàn)為色素對(duì)稱性沉著，輕者淡黃色或淺褐色，點(diǎn)片狀散布于面頰兩側(cè)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組方法

昆明種小鼠72只，均為雌性，體重（20±2）g。隨機(jī)分成6組：正常對(duì)照組（A）、模型組（B）、低劑量調(diào)經(jīng)祛斑片組（C）、中劑量調(diào)經(jīng)祛斑片組（D）、高劑量調(diào)經(jīng)祛斑片組（E）、陽(yáng)性對(duì)照組（F），每組12只，分籠喂養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 動(dòng)物模型制作

①脫毛：先用剪刀剪去鼠背上的粗毛，再用電動(dòng)剃須刀將剩余的絨毛剔除干凈，使背部皮膚充分暴露，剃毛面積2cm×2cm。每周脫毛1次，脫毛后用溫清水洗凈。②紫外線照射：將裝有實(shí)驗(yàn)小鼠的籠子放在SS—03P型光療儀燈具正下方的2cm處，紫外線劑量設(shè)定為120μw/cm2照射時(shí)間為20min/d，連續(xù)照射8周，達(dá)到文獻(xiàn)所敘述的劑量。每周使用紫外線輻照度監(jiān)視計(jì)檢測(cè)紫外線光療儀輻照強(qiáng)度1次。

1.3 實(shí)驗(yàn)藥物

調(diào)經(jīng)祛斑片（河南靈佑藥業(yè)有限公司提供，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20080446.20090103-2）。成份為：黃芪、菟絲子、墨旱蓮、女貞子、枸杞子、當(dāng)歸、白芍、何首烏等。將原藥片粉碎，加熱提取。制成煎劑，分為低、中、高劑量制劑。①空白組：蒸餾水0.2mL／10g體重灌服；②模型組：同正常組；③調(diào)經(jīng)祛斑片低劑量組：以16%調(diào)經(jīng)祛斑片水溶液0.2mL／10g體重（相當(dāng)于人臨床用量的5倍）體重灌服；④調(diào)經(jīng)祛斑片高劑量組：1倍于調(diào)經(jīng)祛斑片低劑量組的劑量；⑤調(diào)經(jīng)祛斑片高劑量組：2倍于調(diào)經(jīng)祛斑片低劑量的劑量；⑥陽(yáng)性對(duì)照組：以20.6%百消丹水溶液0.2mL／10g體重（相當(dāng)于人臨床用量的2倍）灌服。

1.4 取材方法

1.4.1 取材

實(shí)驗(yàn)第16周末，小鼠背部器械脫毛，面積為2cm×1cm.斷頸處死全部小鼠后，立即取下背部脫毛處全層皮膚，冷凍于-70℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。

1.4.2 應(yīng)膚組織勻漿的鉗備

每組小鼠皮膚組織標(biāo)本取0.5g，在冰生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，用眼科小剪剪碎組織塊，倒入勻漿器中進(jìn)行勻漿管中，用量筒量取4.5mL，冷生理鹽水，倒入勻漿器中進(jìn)行勻漿；以400r／min的速度離心10min，取上清液進(jìn)行指標(biāo)涮定。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

皮膚及血液中SOD括性的測(cè)定采用黃嘌呤氧化醇法，皮膚組織的丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法。SOD、MDA（批號(hào)：20091222）測(cè)定試劑盒，均購(gòu)于河南醫(yī)學(xué)生物工程研究所。

2 結(jié)果

2.1 調(diào)經(jīng)祛斑片對(duì)紫外線照射致黑色素沉著模型小鼠皮膚中SOD活性的影響

紫外線照射后，照射皮膚組織SOD活性下降，模型組皮膚組織及血液中SOD含量下降與各用藥組之間存在非常顯著性差異與模型組相比。在皮膚及血液中，中藥中劑量組SOD含量明顯升高（P＜0.01），各給藥組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚及血清中SOD活性的影響（x-土s)

2.2 各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚及血液中MDA含量酌影響

模型組小鼠經(jīng)紫外線照射后，血液及皮膚中MDA含量明顯升高，模型組MDA含量的升高與各用藥組之間存在顯著性差異，與模型組相比。中藥中劑量組SOD含量明顯下降（P＜0.01），各給藥組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）見(jiàn)表2。

表2 各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚及血清中MDA含量的影響（±s）

表2 各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚及血清中MDA含量的影響（±s）

注：與摸型組相比.*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 皮膚中MDA（nmol/mgprol） 血清中MDA（nmol/mL）空白組 12 41.01±5.40** 5.80±0.81**模型組 10 61.30±5.00 6.70±0.86中藥低劑量組 9 52.29±4.42* 6.40±0.73*中藥中劑量組 10 43.62±6.80** 5.90±0.90**中藥高劑量組 10 52.91±4.50* 6.10±0.90*陽(yáng)性對(duì)照組 12 42.94±6.40** 5.80±0.90**

3 討論

祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，黃褐斑是全身性疾病的一種局部反應(yīng)，多與氣血、臟腑功能失調(diào)有關(guān)。本組實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期臨床觀察發(fā)現(xiàn)，該病以肝氣郁結(jié)和氣滯血瘀型的為多，故認(rèn)為“無(wú)瘀不成斑”。所以調(diào)經(jīng)祛斑片具有疏肝解郁、活血化瘀、祛斑養(yǎng)顏之功。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，彌漫性過(guò)度色素沉著，常伴內(nèi)分泌失調(diào)，在垂體分泌促腎上腺皮質(zhì)激素時(shí)，也分泌過(guò)量的黑色素細(xì)胞刺激素，因而皮膚黑色加深。色素過(guò)多的原因之一是由于皮膚黑色素產(chǎn)生過(guò)多，而酪氨酸酶在黑色素生物合成過(guò)程中起著極為重要的作用。酪氨酸酶是黑色素代謝中的關(guān)鍵酶，對(duì)酪氨酸酶活性調(diào)節(jié)可直接影響黑色素的合成。研究表明，調(diào)經(jīng)祛斑片對(duì)酪氨酸酶活性有顯著抑制作用，能降低“黃褐斑”大鼠皮膚、肝臟中酪氨酸含量，這可能是調(diào)經(jīng)祛斑片治療黃褐斑的藥理學(xué)基礎(chǔ)之一。

模型組小鼠皮膚組織及血液中SOD活性明顯降低。MDA含量明顯增加， 調(diào)經(jīng)祛斑片低、中、高劑量組的皮膚及血液中SOD和MDA含量與正常組動(dòng)物比較無(wú)顯著性差異，與模型組比較，調(diào)經(jīng)祛斑片低、中、高組的皮膚及血液中SOD活性明顯增高且有顯著差異，調(diào)經(jīng)祛斑片低、中、高劑量組的皮膚組織中MDA含量則明顯降低。調(diào)經(jīng)祛斑片提取液對(duì)紫外線照射引起的小鼠黃褐斑病理模型具有明顯的保護(hù)和治療作用。

以上研究還表明，調(diào)經(jīng)祛斑片毒性小，安全可靠，臨床療效肯定，值得進(jìn)一步研究、開(kāi)發(fā)利用、臨床分析。

［1］ 揚(yáng)智榮，張麗宏，黃昕紅.加堿滋水清肝飲對(duì)皮膚SOD及脂褐質(zhì)的調(diào)節(jié)作用[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2005，14（4）：485-487

［2］ 陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000.305