UF-1000i尿沉渣分析儀和尿干化學(xué)分析儀與顯微鏡檢查在尿路感染中應(yīng)用評(píng)價(jià)

張廣波，周麗杰，曹 笠※

(1.大連市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧大連 116022;2.遼河油田第二職工醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧盤錦 124010)

迄今，尿細(xì)菌培養(yǎng)仍然是確診尿路感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是從患者留取尿液標(biāo)本到獲取檢驗(yàn)報(bào)告需3～5 d的時(shí)間，將會(huì)延緩對(duì)尿路感染的診斷和治療［1］。UF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣分析儀(簡(jiǎn)稱UF-1000i)，尿化學(xué)分析儀測(cè)定亞硝酸鹽、白細(xì)胞酯酶和尿沉渣鏡檢診斷也是檢測(cè)尿路感染的有意義的指標(biāo)。UF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣分析儀采用了流式細(xì)胞技術(shù)和熒光染色的方法對(duì)尿液中的有形成分進(jìn)行定量分析，較鏡檢法敏感。干化學(xué)干擾因素較多影響結(jié)果的可靠性。顯微鏡檢查作為傳統(tǒng)方法既費(fèi)時(shí)又難以標(biāo)準(zhǔn)化，人為影響因素多。為了探討聯(lián)合應(yīng)用UF-1000i、干化學(xué)法、顯微鏡鏡檢在診斷尿路感染上的臨床應(yīng)用價(jià)值，本研究對(duì)220份潔凈中段尿標(biāo)本分別進(jìn)行UF-1000i和尿干化學(xué)分析儀及顯微鏡檢測(cè)，將結(jié)果與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果作了比較。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來(lái)源 隨機(jī)抽取2010年本院門診及住院患者中疑似尿路感染的患者尿液標(biāo)本220份，患者年齡患者年齡18～70歲，男性標(biāo)本102份，女性標(biāo)本118份。

1.1.2 采集方法 用潔凈一次性尿杯留取中段尿，分裝3個(gè)試管，每管10 mL。前兩管按儀器操作規(guī)程在UF-1000i和尿化學(xué)分析儀進(jìn)行分析測(cè)定，另一管離心后進(jìn)行尿沉渣顯微鏡檢查及細(xì)菌培養(yǎng)。

1.1.3 儀器和試劑 UF-1000i(日本 Sysmex公司產(chǎn)品);尿十項(xiàng)干化學(xué)分析儀(德國(guó)寶靈曼公司生產(chǎn)的Miditron JuniorlI型，試條為Combur10 TestM試帶條);血平板購(gòu)于上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司;OLYUSCMPX-31顯微鏡。

1.1.4 質(zhì)控 質(zhì)控品為廠家提供的原裝配套產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 UF-1000i檢測(cè)標(biāo)本 UF-1000i進(jìn)行每日質(zhì)控，數(shù)據(jù)正常時(shí)開始檢測(cè)，按儀器說(shuō)明嚴(yán)格正規(guī)操作，分裝后的第一管尿液標(biāo)本在UF-1000i檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。將進(jìn)樣針插入含充分混勻樣品的試管，按進(jìn)樣開關(guān)，儀器自動(dòng)吸取800 μL樣品，分析各種參數(shù)，打印分析數(shù)據(jù)。記錄細(xì)菌(≥2750/μL為陽(yáng)性檢出)和白細(xì)胞(≥20/μL為陽(yáng)性檢出)。

1.2.2 尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)標(biāo)本 第二管尿液標(biāo)本在尿化學(xué)分析儀檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，整個(gè)過(guò)程在2 h內(nèi)完成，并按照儀器的操作規(guī)程要求進(jìn)行操作。亞硝酸鹽陽(yáng)性(f+1)或白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性(≥1+)作為尿路感染的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 顯微鏡檢測(cè) 取另一管尿液標(biāo)本，以相對(duì)離心力400×g離心5 min，然后手持離心管45°～90°吸棄上清液，保留0.2 mL沉渣量，輕輕搖勻，用一次性滴管取1滴(20 μL)置于清潔載玻片上，加蓋玻片，于高倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野中白細(xì)胞數(shù)，分別取其平均值，所有操作在2 h內(nèi)完成。

1.2.4 定量尿細(xì)菌培養(yǎng) 用5 μL定量接種環(huán)取充分混勻的尿液分別接種血平板和沙氏培養(yǎng)基，放37℃溫箱內(nèi)孵育18～24 h，取出作菌落計(jì)數(shù)，凡革蘭陰性菌≥105cfu/mL，革蘭陽(yáng)性菌≥104cfu/mL為定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性，若有2種以上雜菌生長(zhǎng)則被視為污染，重新送檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)評(píng)價(jià)聯(lián)合應(yīng)用UF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣分析儀和尿干化學(xué)分析、顯微鏡鏡檢和尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，將所得資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種方法的檢測(cè)結(jié)果 220例尿液標(biāo)本中，尿沉渣細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性92例，陽(yáng)性率42%，陰性128例，陰性率58%;UF-1000i陽(yáng)性114例，陽(yáng)性率52%，陰性106例，陰性率48%;干化學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性76例，陽(yáng)性率35%，陰性144例，陰性率65%。

2.2 UF-1000i與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較UF-1000i檢測(cè)白細(xì)胞、細(xì)菌與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果兩者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.21，P＜0.05)(表1)。UF-1000i有較高的靈敏度(82.6%)，但是，假陽(yáng)性率非常高(29.7%)。

表1 UF-1000i與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

2.3 干化學(xué)檢測(cè)與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較干化學(xué)檢測(cè)在診斷尿路感染中(與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果比較)有較高的假陰性率(28.2%)，但有較高的特異度(92.2%)。兩者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.23，P ＞0.05)(表2)。

表2 干化學(xué)檢測(cè)與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

2.4 鏡檢與定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的比較 鏡檢靈敏度較低(56.5%)，兩者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.69，P ＞0.05)(表3)。

表3 鏡檢與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

3 討論

目前應(yīng)用于臨床尿液分析的方式主要有全自動(dòng)尿沉渣分析儀法、干化學(xué)法及尿顯微鏡鏡檢法，由于各實(shí)驗(yàn)室之間的差異，尿液分析模式多種多樣。為此，不合理的分析模式影響了尿液分析的質(zhì)量，這樣將影響臨床醫(yī)師對(duì)尿液檢測(cè)報(bào)告的分析和判斷。事實(shí)上，目前所采用的三種檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)。UF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣分析儀將尿液標(biāo)本進(jìn)行稀釋和染色后，運(yùn)用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)和電阻抗技術(shù)，獲得尿有形成分的前向散射光信號(hào)和前向熒光信號(hào)，前向散射光信號(hào)反映細(xì)胞體積大小，前向熒光信號(hào)反映細(xì)胞染色質(zhì)的大小，從而得到尿有形成分的大小、橫斷面、染色成分、染色部分的長(zhǎng)度和體積的信息，分類尿有形成分。細(xì)菌由于體積小并含有DNA和RNA，所以前向散射光強(qiáng)度要比紅、白細(xì)胞弱，但熒光強(qiáng)度要比紅細(xì)胞強(qiáng)，又比白細(xì)胞弱，因此可以從紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型等尿有形成分中將細(xì)菌區(qū)分開來(lái)，并且可定量顯示。但其結(jié)果受到細(xì)菌種類、菌體大小、標(biāo)本放置時(shí)間等因素的影響。尿液中的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞、個(gè)體較大的精子等情況的出現(xiàn)都會(huì)影響UF-1000i白細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。這導(dǎo)致UF-1000i檢測(cè)白細(xì)胞和細(xì)菌是高敏感性和低特異性的。

本實(shí)驗(yàn)中干化學(xué)法檢測(cè)的靈敏度僅為28.3%，假陰性率高達(dá)71.7%，特異度為92.2%，提示尿干化學(xué)分析儀對(duì)亞硝酸鹽的測(cè)定是特異的，但是如果飲食中缺乏亞硝酸鹽，或者有些細(xì)菌不含能引起硝酸鹽還原為亞硝酸鹽的還原酶［2］，或者尿液沒有在膀胱中存留足夠長(zhǎng)時(shí)間(4 h以上)以完成硝酸鹽向亞硝酸鹽的轉(zhuǎn)變等，都會(huì)引起假陰性。干化學(xué)法亞硝酸鹽試驗(yàn)靈敏度約為0.05 g/L［3］，其靈敏度較低，以致假陰性較高。

本研究把UF-1000i和干化學(xué)法均陽(yáng)性的標(biāo)本，經(jīng)尿培養(yǎng)全都發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌。證明UF-1000i和干化學(xué)法都陽(yáng)性的標(biāo)本涂片染色鏡檢敏感性低的原因可能是由于標(biāo)本混勻不充分，涂片量不足或染色過(guò)程中沒有充分固定而導(dǎo)致細(xì)菌丟失，也可能由于沉渣中有大量雜物掩蔽難以辨認(rèn)細(xì)菌而造成。

從本實(shí)驗(yàn)可見，多數(shù)標(biāo)本UF-1000i和干化學(xué)法、鏡檢3種方法檢測(cè)結(jié)果較一致，在不相符的標(biāo)本中，UF-1000i陽(yáng)性率較高，UF-1000i易將小圓上皮細(xì)胞、滴蟲等誤認(rèn)為白細(xì)胞。而干化學(xué)法不能檢出淋巴細(xì)胞，且干擾因素多，某些臨床用藥可引起干化學(xué)法假陰性，而污染甲醛和高濃度膽紅素等可以引起干化學(xué)法假陽(yáng)性［4］，差異較大，不能反映治療前后細(xì)菌的改變，因而在診斷尿路感染及治療效果時(shí)，UF-1000i更靈敏、有效。

UF-1000i法、干化學(xué)法兩法結(jié)合更適合于健康普查篩選。中華醫(yī)學(xué)會(huì)經(jīng)過(guò)研究初步篩選標(biāo)準(zhǔn)［5］，即在干化學(xué)試紙質(zhì)量合格，尿液分析儀運(yùn)轉(zhuǎn)正常的情況下，測(cè)定結(jié)果中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)及亞硝酸鹽全部為陰性時(shí)可免去顯微鏡檢查，但在腎臟疾病，不論干化學(xué)結(jié)果如何都應(yīng)作沉渣鏡檢。而尿沉渣檢查對(duì)各種疾病(如腎臟、泌尿系統(tǒng)疾病等)有重要臨床意義，而如每個(gè)尿標(biāo)本都鏡檢又極大地浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，降低實(shí)驗(yàn)室工作效率，所以對(duì)那些干化學(xué)法、UF-1000i法都正常的尿液標(biāo)本，可采用抽樣鏡檢或其他方法來(lái)檢查。如此通過(guò)干化學(xué)法、UF-1000i法、鏡檢法建立陽(yáng)性標(biāo)本報(bào)警系統(tǒng)，檢驗(yàn)人員可多化時(shí)間在陽(yáng)性標(biāo)本上。

［1］ 婁崢，胡曉波，蔣燕群，等.UF-100尿液分析儀篩查尿路感染臨床意義的探討［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，19(1):54.

［2］ 王春燕，張森發(fā).sysmexVF100尿沉渣分析儀對(duì)尿路感染療效的監(jiān)測(cè)［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000，15(2):80.

［3］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:290.

［4］ 叢玉隆，馬俊龍.尿液干化學(xué)分析與顯微鏡檢查［J］.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1997，20(3):135-137.

［5］ 冠麗筠，陳宏礎(chǔ).臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1989:136.