神經(jīng)型鈣黏附蛋白在大腸腺癌組織中的表達(dá)及意義

韓黎麗，劉 宇 ，鄧文英，陳小兵，李 寧，羅素霞

(1鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，鄭州 450000;2鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院)

cadherin家族是由一系列結(jié)構(gòu)和功能相似的單鏈跨膜糖蛋白組成，按其最初來(lái)源分為上皮型、神經(jīng)型和胎盤型3種，主要參與介導(dǎo)鈣離子依賴的同型細(xì)胞間的黏附。研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)型鈣黏附蛋白(N-cadherin)可促使癌細(xì)胞從癌組織塊上脫離及癌細(xì)胞與內(nèi)皮或基質(zhì)成分黏附，在腫瘤形成的過(guò)程中有助于血管形成及上皮細(xì)胞—間質(zhì)細(xì)胞的遷移，從而使腫瘤細(xì)胞更加富于侵襲性，易于轉(zhuǎn)移［1～3］。2001～2005年，我們采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)了98例大腸腺癌組織以及10份癌旁組織中N-cadherin表達(dá)情況，并分析其表達(dá)與臨床病理的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 98份大腸癌組織標(biāo)本(觀察組)，患者男63例，女35例;年齡32～76歲，平均56.3歲。均經(jīng)手術(shù)病理檢查證實(shí)診斷。組織學(xué)分級(jí):Ⅰ級(jí)(高分化)34例，Ⅱ級(jí)(中等分化)38例，Ⅲ級(jí)(低分化)26例。根據(jù)2003版美國(guó)腫瘤聯(lián)合會(huì)(AJCC)和國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)大腸癌TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期15例，Ⅱ期49例，Ⅲ期34例。術(shù)前均未接受放、化療或其它特殊治療。對(duì)照組為10例正常大腸上皮組織(取自手術(shù)切除標(biāo)本的兩殘端，距癌組織3 cm以上)，經(jīng)病理證實(shí)為分化良好的腺上皮及少量固有層成分。

1.2 N-cadherin檢測(cè) N-cadherin鼠抗人單克隆抗體均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司，工作濃度均為1∶110;PV-9000二步法免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒、DAB顯色增強(qiáng)劑購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)有限公司。兩組標(biāo)本甲醛固定，石蠟包埋，行HE染色。用已知表達(dá)N-cadherin的精原細(xì)胞瘤組織切片作陽(yáng)性對(duì)照;以未經(jīng)免疫的鼠IgG代替一抗作為陰性對(duì)照;以PBS代替一抗作為空白對(duì)照。染色結(jié)果由3名醫(yī)師雙盲評(píng)價(jià)，每例至少評(píng)價(jià)5個(gè)高倍鏡視野，每個(gè)視野觀察細(xì)胞數(shù)不少于200個(gè)。將胞質(zhì)著色判為陽(yáng)性，按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比及著色深淺判定結(jié)果。細(xì)胞染色:細(xì)胞無(wú)著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比評(píng)分:0分，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞;1分，陽(yáng)性細(xì)胞＜10%;2分，陽(yáng)性細(xì)胞為10% ～50%;3分，陽(yáng)性細(xì)胞＞50%。取兩項(xiàng)評(píng)分的乘積作為終評(píng)分:0分為陰性或弱陽(yáng)性，1分為中度陽(yáng)性，2分為強(qiáng)陽(yáng)性，≥1分為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。兩個(gè)有序變量之間的聯(lián)系用Spearman相關(guān)分析;分類變量之間的比較用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 N-cadherin表達(dá) 觀察組N-cadherin陽(yáng)性率為71.4%，對(duì)照組未見(jiàn)N-cadherin表達(dá)(P＜0.01)。

2.2 N-cadherin的表達(dá)與大腸腺癌臨床病理特征的關(guān)系 見(jiàn)表1。

表1 N-cadherin表達(dá)與大腸腺癌臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

N-Cadherin 基因定位于 18q11.2［4］，表達(dá)相對(duì)分子質(zhì)量約120 kD的單鏈跨膜糖蛋白。研究發(fā)現(xiàn)，N-cadherin蛋白在胚胎的發(fā)育以及多種生物學(xué)過(guò)程(消化道形成、神經(jīng)突觸的形成以及調(diào)節(jié)垂體后葉的活動(dòng))中起重要作用［5～7］，被認(rèn)為是一種潛在的促癌基因。

本研究發(fā)現(xiàn)，N-cadherin在大腸腺癌細(xì)胞的胞質(zhì)均有不同程度表達(dá)。其表達(dá)水平與大腸腺癌患者年齡、性別、腫瘤位置、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)關(guān)，但與腫瘤的TNM分期以及組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)，即腫瘤的臨床分期越高，腫瘤細(xì)胞的分化程度越低，N-cadherin的表達(dá)越高。其促進(jìn)腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制:①使表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)的作用持續(xù)增強(qiáng)［8］。EGFR是一種具有酪氨酸激酶特性的生長(zhǎng)因子受體，當(dāng)表皮生長(zhǎng)因子與之結(jié)合后可刺激細(xì)胞的分裂和增殖，從而促進(jìn)腫瘤形成。②直接作用于成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移［9］。③增加惡性T細(xì)胞瘤對(duì)上皮細(xì)胞的黏附力，使其更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移［10］。④激活MAPKERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，誘導(dǎo)MMP-9表達(dá)，促進(jìn)腫瘤血管的形成，使腫瘤易于生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。

綜上所述，N-cadherin參與了大腸腺癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，有望成為大腸癌治療的新靶點(diǎn)。

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