北纈草有效部位的提取與生物活性研究

臧炳盛 王尚

纈草為敗醬草科纈草屬植物纈草(Valeriana alternifolia Bunge)的干燥根及根莖，生于海拔2500米的山坡草地、林下，分布于我國(guó)東北至西南各地。性味辛、甘、溫，歸心、肝經(jīng)。有鎮(zhèn)靜安神，解痙，鎮(zhèn)痛，調(diào)節(jié)血脂，改善微循環(huán)，抗心肌缺血，抗菌，抗病毒，抗抑郁，抗腫瘤等功效［1］。因產(chǎn)地不同，纈草從形態(tài)到有效成分的組成與含量亦存在差異，本課題所選研究對(duì)象為吉林省長(zhǎng)白山地區(qū)所產(chǎn)的北纈草(Valeriana faurier Briq.)，對(duì)北纈草的有效部位和生物活性進(jìn)行系統(tǒng)研究，為進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)利用長(zhǎng)白山野生藥材北纈草奠定科學(xué)的物質(zhì)依據(jù)。

1 儀器與試藥

超凈工作臺(tái)(CJ-1，南京萊步科技實(shí)業(yè)有限公司)，皮尺，游標(biāo)卡尺，BP211D電子天平(德國(guó)賽多司)。北纈草(采于吉林長(zhǎng)白縣，經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)鄧明魯教授鑒定為敗醬草科纈草屬植物北纈草);Wistar雄性大鼠，購(gòu)自長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心，體重200～240 g。

2 方法

2.1 北纈草有效部位的提取

2.1.1 北纈草總黃酮的提取 稱取北纈草粗粉500 g，加70%乙醇5000 ml，回流提取三次，1.5 h/次，合并提取液，減壓(60℃)回收乙醇，水浴鍋(60℃)上濃縮干燥，干品加蒸餾水1000 ml溶解，加三氯甲烷500 ml，萃取3次，合并三次萃取液，減壓回收三氯甲烷，蒸干。干品加無(wú)水乙醇溶解，

將無(wú)水乙醇溶液加于處理好的聚酰胺(200目)中，蒸干乙醇，干品加樣于聚酰胺柱(100目)上，乙醇梯度洗脫，收集70%乙醇洗脫液，60℃水浴蒸干，干品即為北纈草總黃酮。

2.1.2 北纈草總皂苷的提取 稱取北纈草粗粉500 g，置5000 ml圓底燒瓶中，加石油醚3000 ml浸泡4 h，過(guò)濾，殘?jiān)鼡]盡石油醚后加95%乙醇3000 ml，回流提取3次，2 h/次，合并3次提取液，減壓回收95%乙醇，殘?jiān)诱麴s水1000 ml超聲溶解，溶液用水飽和正丁醇萃取3次，800 ml/次，充分萃取，棄去水層，合并正丁醇層，將正丁醇溶液60℃減壓干燥即得北纈草總皂苷干品。

2.1.3 北纈草總有機(jī)酸的提取 取北纈草粗粉200 g加入蒸餾水2000 ml浸泡3 h，超聲提取2 h，過(guò)濾，濾液加入飽和鹽酸乙醚溶液萃取，乙醚層用1﹪碳酸氫鈉溶液萃取，碳酸氫鈉層用濃鹽酸調(diào)PH值到2，加入乙酸乙酯1000 ml，萃取2次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓回收乙酸乙酯，濃縮液置水浴鍋(60℃)上濃縮干燥，干品即為北纈草總有機(jī)酸提取物。

2.2 北纈草有效部位消炎作用實(shí)驗(yàn)［2］取大鼠110只，隨機(jī)分為11組:對(duì)照組，0.2 g/kg陽(yáng)性藥阿司匹林組，0.40、0.60、0.80 g/kg三個(gè)劑量給藥組，共11組。連續(xù)給藥5天，于末次給藥1 h后于大鼠右后足腱膜下注入0.05%角叉菜膠 0.20 ml/只，然后于注射后1、2、3、4、5、6 h 測(cè)其足腫脹(先于注射前測(cè)正常大鼠足周長(zhǎng))，以于正常足值之差作為腫脹度。

3 結(jié)果

北纈草總黃酮(BXC-Fl)、總皂苷(BXC-Sa)、總有機(jī)酸(BXC-OA)對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎作用結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 北纈草各有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響

從上表可知，與對(duì)照組相比北纈草總黃酮、總皂苷、總有機(jī)酸三有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹均有差異。且以總有機(jī)酸提取物效果最為明顯，有顯著性差異。

4 討論

纈草全國(guó)各地廣為分布，北纈草作為纈草中的代表品種在我國(guó)北方應(yīng)用廣泛，但對(duì)于其系統(tǒng)研究卻相對(duì)較少，本課題以北纈草為原料，對(duì)其有效部位進(jìn)行科學(xué)系統(tǒng)的研究，考察了總黃酮、總皂苷、總有機(jī)酸等有效部位，為北纈草的進(jìn)一步研究奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。

首次定量測(cè)定了北纈草各有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎的活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)北纈草總有機(jī)酸對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎作用較為明顯。因此下一步試驗(yàn)應(yīng)對(duì)總有機(jī)酸進(jìn)行詳盡的研究。此次試驗(yàn)結(jié)果為北纈草的開(kāi)發(fā)、利用提供了科學(xué)依據(jù)。

［1］朱有昌.東北纈草屬藥用植物資源.自然資源研究，1984，1:34.

［2］王文娟，孫耀光，雒向?qū)?，侯建平，?當(dāng)歸拈痛丸對(duì)尿酸鈉致大鼠急性足腫脹的影響研究.現(xiàn)代中醫(yī)藥，2008，28(6):59-60.