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    北纈草有效部位的提取與生物活性研究

    2011-08-28 03:23:02臧炳盛王尚
    關(guān)鍵詞:角叉菜膠干品總皂苷

    臧炳盛 王尚

    纈草為敗醬草科纈草屬植物纈草(Valeriana alternifolia Bunge)的干燥根及根莖,生于海拔2500米的山坡草地、林下,分布于我國(guó)東北至西南各地。性味辛、甘、溫,歸心、肝經(jīng)。有鎮(zhèn)靜安神,解痙,鎮(zhèn)痛,調(diào)節(jié)血脂,改善微循環(huán),抗心肌缺血,抗菌,抗病毒,抗抑郁,抗腫瘤等功效[1]。因產(chǎn)地不同,纈草從形態(tài)到有效成分的組成與含量亦存在差異,本課題所選研究對(duì)象為吉林省長(zhǎng)白山地區(qū)所產(chǎn)的北纈草(Valeriana faurier Briq.),對(duì)北纈草的有效部位和生物活性進(jìn)行系統(tǒng)研究,為進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)利用長(zhǎng)白山野生藥材北纈草奠定科學(xué)的物質(zhì)依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    超凈工作臺(tái)(CJ-1,南京萊步科技實(shí)業(yè)有限公司),皮尺,游標(biāo)卡尺,BP211D電子天平(德國(guó)賽多司)。北纈草(采于吉林長(zhǎng)白縣,經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)鄧明魯教授鑒定為敗醬草科纈草屬植物北纈草);Wistar雄性大鼠,購(gòu)自長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心,體重200~240 g。

    2 方法

    2.1 北纈草有效部位的提取

    2.1.1 北纈草總黃酮的提取 稱取北纈草粗粉500 g,加70%乙醇5000 ml,回流提取三次,1.5 h/次,合并提取液,減壓(60℃)回收乙醇,水浴鍋(60℃)上濃縮干燥,干品加蒸餾水1000 ml溶解,加三氯甲烷500 ml,萃取3次,合并三次萃取液,減壓回收三氯甲烷,蒸干。干品加無(wú)水乙醇溶解,

    將無(wú)水乙醇溶液加于處理好的聚酰胺(200目)中,蒸干乙醇,干品加樣于聚酰胺柱(100目)上,乙醇梯度洗脫,收集70%乙醇洗脫液,60℃水浴蒸干,干品即為北纈草總黃酮。

    2.1.2 北纈草總皂苷的提取 稱取北纈草粗粉500 g,置5000 ml圓底燒瓶中,加石油醚3000 ml浸泡4 h,過(guò)濾,殘?jiān)鼡]盡石油醚后加95%乙醇3000 ml,回流提取3次,2 h/次,合并3次提取液,減壓回收95%乙醇,殘?jiān)诱麴s水1000 ml超聲溶解,溶液用水飽和正丁醇萃取3次,800 ml/次,充分萃取,棄去水層,合并正丁醇層,將正丁醇溶液60℃減壓干燥即得北纈草總皂苷干品。

    2.1.3 北纈草總有機(jī)酸的提取 取北纈草粗粉200 g加入蒸餾水2000 ml浸泡3 h,超聲提取2 h,過(guò)濾,濾液加入飽和鹽酸乙醚溶液萃取,乙醚層用1﹪碳酸氫鈉溶液萃取,碳酸氫鈉層用濃鹽酸調(diào)PH值到2,加入乙酸乙酯1000 ml,萃取2次,合并乙酸乙酯萃取液,減壓回收乙酸乙酯,濃縮液置水浴鍋(60℃)上濃縮干燥,干品即為北纈草總有機(jī)酸提取物。

    2.2 北纈草有效部位消炎作用實(shí)驗(yàn)[2]取大鼠110只,隨機(jī)分為11組:對(duì)照組,0.2 g/kg陽(yáng)性藥阿司匹林組,0.40、0.60、0.80 g/kg三個(gè)劑量給藥組,共11組。連續(xù)給藥5天,于末次給藥1 h后于大鼠右后足腱膜下注入0.05%角叉菜膠 0.20 ml/只,然后于注射后1、2、3、4、5、6 h 測(cè)其足腫脹(先于注射前測(cè)正常大鼠足周長(zhǎng)),以于正常足值之差作為腫脹度。

    3 結(jié)果

    北纈草總黃酮(BXC-Fl)、總皂苷(BXC-Sa)、總有機(jī)酸(BXC-OA)對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎作用結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 北纈草各有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響

    從上表可知,與對(duì)照組相比北纈草總黃酮、總皂苷、總有機(jī)酸三有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹均有差異。且以總有機(jī)酸提取物效果最為明顯,有顯著性差異。

    4 討論

    纈草全國(guó)各地廣為分布,北纈草作為纈草中的代表品種在我國(guó)北方應(yīng)用廣泛,但對(duì)于其系統(tǒng)研究卻相對(duì)較少,本課題以北纈草為原料,對(duì)其有效部位進(jìn)行科學(xué)系統(tǒng)的研究,考察了總黃酮、總皂苷、總有機(jī)酸等有效部位,為北纈草的進(jìn)一步研究奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。

    首次定量測(cè)定了北纈草各有效部位對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎的活性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)北纈草總有機(jī)酸對(duì)大鼠角叉菜膠性足腫脹消炎作用較為明顯。因此下一步試驗(yàn)應(yīng)對(duì)總有機(jī)酸進(jìn)行詳盡的研究。此次試驗(yàn)結(jié)果為北纈草的開(kāi)發(fā)、利用提供了科學(xué)依據(jù)。

    [1]朱有昌.東北纈草屬藥用植物資源.自然資源研究,1984,1:34.

    [2]王文娟,孫耀光,雒向?qū)?,侯建平,?當(dāng)歸拈痛丸對(duì)尿酸鈉致大鼠急性足腫脹的影響研究.現(xiàn)代中醫(yī)藥,2008,28(6):59-60.

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