復(fù)方乳酶生膠囊活菌質(zhì)量的標(biāo)定

馬楚強 謝春華

我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊(注冊文號:粵藥制字H20050486)為含乳酶生(桂林南藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H45020220)0.15 g，干酵母 0.12 g，葡萄糖酸鈣 0.20 g，維生素B10.06 g，維生素B20.015 g，輔料等的復(fù)方制劑，因其制備過程簡單，易于機械化生產(chǎn)，在治療消化不良、腹瀉、腹脹、小兒厭食等療效確切、不良反應(yīng)少，故深受患者好評。但因其中主藥成為乳酶生生物活菌，一直以來都未有較好的含量測定方法，此次主要是采用活菌培養(yǎng)計數(shù)法對之進行乳酶生含量測定，為藥品質(zhì)量的標(biāo)定提供實驗數(shù)據(jù)，以便更好地為醫(yī)療服務(wù)。

1 儀器與試劑

我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊(注冊文號:粵藥制字H20050486)，生產(chǎn)日期:2011年 3月 25日，生產(chǎn)批號:11032501儀器分析天平(上海天平儀器廠，TG328A型);水平流凈化工作臺(吳山市生化凈化設(shè)備廠，SW-CJ-1A);生化恒溫培養(yǎng)箱(上海博迅，SPX-150B);旋渦混合器(上海，XW-80A)。玫瑰紅鈉營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

2 質(zhì)量標(biāo)定

2.1 干燥失重 按干燥失重測定法(2010年版中國藥典附錄2.1ⅧL)測定，減失重量不得超過5.0%。

2.2 裝量差異 取膠囊劑10粒，除去包裝，分別精密稱定每粒內(nèi)容物的重量，求出內(nèi)容物的裝量與平均裝量。每粒的裝量差異應(yīng)小于標(biāo)示裝量的±10%，超出裝量差異限度的膠劑不得多于2粒，不得有超出裝量差異限度1倍者。

2.3 其他 應(yīng)符合膠囊劑項下有關(guān)各項規(guī)定(《中國藥典》2010 年版二部附錄 IP)［1］。

2.4 稀釋濃度選取 取復(fù)方乳酶生膠囊內(nèi)容物用注射用水分別稀釋2千、5千、1萬、2萬、4萬倍(方法:取復(fù)方乳酶生膠囊三粒，精密稱重。在水平流凈化工作臺上將3粒復(fù)方乳酶生膠囊內(nèi)容物完全地倒入試管中，用移液管各自精密加入注射用水9 ml，在旋渦混合器上混勻，精密量取3 ml置100 ml容量瓶中，精密加入注射用水至刻度混勻，分別精密量取5 ml、2 ml、1 ml、0.5 ml、0.25 ml各加入50 ml容量瓶中，精密加入注射用水至刻度混勻，分別取精密量0.5 ml加入90 mm培養(yǎng)皿中。加玫瑰紅鈉營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15 ml，混勻，冷卻凝固后倒置于培養(yǎng)箱按《中國藥典》2010年版二部“微生物限度榆查”項下培養(yǎng))。48 h 后計數(shù)(表1)［1，3］。對五個培養(yǎng)基分別進行記數(shù)。篩選出符合計數(shù)要求(菌落數(shù)在100～300間)的稀釋液濃度(1萬倍，見表1)作為實驗稀釋濃度［2，4］。

2.5 含量測定 選定稀釋濃度后，按上述方法進行活菌培養(yǎng)，共做五份，分別標(biāo)記為 A、B、C、D、E。48 h后計數(shù):應(yīng)在玫瑰紅鈉營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基形成暗紅色至粉紅色菌落，邊緣整齊，瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀。對五個培養(yǎng)基分別進行記數(shù)(表2)。將五個數(shù)據(jù)用方差統(tǒng)計后，選取符合要求的數(shù)據(jù)求出平均值。將所得數(shù)據(jù)換算為每1粒復(fù)方乳酶生膠囊所含的菌落數(shù)，單位為萬個/粒復(fù)方乳酶生膠囊［4，5］。

3 結(jié)果

見表1。

表1 稀釋倍數(shù)篩選

表2 活菌培養(yǎng)結(jié)果計數(shù)

4 討論

4.1 根據(jù)表1數(shù)據(jù)，選取稀釋1萬倍的濃度(菌落數(shù)在100～300間)作為本次實驗的稀釋濃度。

4.2 根據(jù)表2數(shù)據(jù)，采用方差計算的方法驗證，剔除數(shù)值“D”，取其他四個數(shù)的平均值作為實驗結(jié)果:194.25個菌落。再換算為194.25萬個活菌/粒膠囊。

5 結(jié)論

按《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(二部)第六冊(人民衛(wèi)生出版社)要求，乳酶生每克所含活菌數(shù)不少于1000萬個［2］。我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊(注冊文號:粵藥制字H20050486)每粒中含乳酶生0.15 g，其所含活菌數(shù)應(yīng)不少于150萬個;而實驗所得結(jié)果為194.25萬個活菌/粒膠囊。故該膠囊劑(生產(chǎn)批號:11032501)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》的要求，是合格產(chǎn)品。

［1］ 《中國藥典》(二部)，北京化學(xué)工業(yè)出版社，2010，附錄IL、IP.

［2］ 《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(二部)第六冊，人民衛(wèi)生出版社，E6-64.

［3］歐定宏，李育大，容秀枝，等.消化散的穩(wěn)定性研究.廣東藥學(xué)，2004，14:23.

［4］張懷琴，趙德運，孔祥武，等.雙酶消化散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.河北醫(yī)藥，2009，31(9):1135.

［5］趙郁冰，陳春雁，苗仲山，等.活性乳酸菌制劑(新表飛鳴)的制造與研究.石河子醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1989，11(1):16.