黃楊寧對(duì)大鼠肝臟NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影響

梁 濤 瞿凌晨 許 立 呂高虹

南京中醫(yī)藥大學(xué)（江蘇南京 210046）

黃楊寧對(duì)大鼠肝臟NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影響

梁 濤 瞿凌晨 許 立△呂高虹

南京中醫(yī)藥大學(xué)（江蘇南京 210046）

目的 觀察黃楊寧大鼠長期給藥對(duì)肝臟NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影響。方法SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、黃楊寧小（0.375mg/kg）、大（1.5mg/kg）劑量組，灌胃給藥8周，采用酶標(biāo)儀檢測(cè)組織中NO和Na+-K+-ATP酶（Na+-K+-ATPase）含量。結(jié)果黃楊寧各劑量組肝組織NO含量和Na+-K+-ATPase活性與對(duì)照組比較，顯著降低。結(jié)論黃楊寧對(duì)肝臟毒性可能與NO和Na+-K+-ATPase有關(guān)。

黃楊寧 一氧化氮 Na+-K+-ATP酶

△通信作者

黃楊寧具有祛風(fēng)濕、行氣活血的功效，臨床主要用于氣滯血瘀所致的胸痹心痛、脈結(jié)代、冠心病等。臨床研究顯示，黃楊寧對(duì)多種心律失常、心絞痛、冠心病、心功能不全等心血管疾病具有良好的療效[1]。本實(shí)驗(yàn)通過黃楊寧長期給藥，檢測(cè)肝臟組織一氧化氮（NO）含量及 Na+-K+-ATP 酶（Na+-K+-ATPase）活性，探討黃楊寧對(duì)大鼠肝臟的毒性與藥效之間是否具有相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 試藥與儀器 黃楊寧（南京小營制藥廠，批號(hào)：20101107）。NO、Na+-K+-ATPase檢測(cè)試劑盒由南京建成生物有限公司提供。XHF-D型勻漿機(jī)：寧波新芝生物科技股份有限公司；TD6001型電子天平：天津市天馬儀器廠；LDZ5-2型離心機(jī)：北京醫(yī)用離心機(jī)廠；DNM-9602A型酶標(biāo)儀：北京艾普生物設(shè)備有限公司AMS（美森）-300型全自動(dòng)生化分析儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠30只，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，動(dòng)物證號(hào)SCXK（滬）：2007-0005。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.3 染毒方法 以蒸餾水作為溶劑，配制成不同質(zhì)量濃度的黃楊寧溶液。將大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只：對(duì)照組灌胃蒸餾水、黃楊寧低劑量組灌胃黃楊寧溶液0.375mg/kg、黃楊寧高劑量組灌胃黃楊寧溶液1.5mg/kg。每周染毒，共8周，末次染毒48h后，乙醚麻醉，股靜脈放血，脫椎處死，取肝臟備用。

1.4 標(biāo)本采集與檢測(cè) 取肝組織用生理鹽水制成10%勻漿，取上清，分別按照NO試劑盒、Na+-K+-ATPase試劑盒的步驟測(cè)定組織中NO的含量及Na+-K+-ATPase活性。

2 結(jié) 果

黃楊高、低劑量灌胃給藥8周后，肝組織NO含量及Na+-K+-ATPase活性與對(duì)照組比較，顯著降低（P＜0.05或0.01）。

3 討 論

黃楊寧主要有效成分系生物堿類的環(huán)維黃楊星D（Cyclovi-robuxine D）。研究報(bào)道顯示黃楊寧具有加強(qiáng)心肌收縮力，強(qiáng)心的作用，但強(qiáng)心作用并不是通過細(xì)胞膜上的β2受體而發(fā)揮的，可能與抑制心肌細(xì)胞膜Na+-K+-ATPase活力有關(guān)[2]。并且有研究認(rèn)為強(qiáng)心與抑制心肌細(xì)胞膜Na+-K+-ATPase的活力，促進(jìn)心肌細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流和心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放有關(guān)。同時(shí)已有研究發(fā)現(xiàn)黃楊寧長期給藥會(huì)產(chǎn)生肝毒性，對(duì)肝功能有一定影響[3]。Na+-K+-ATPase的抑制會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈉離子含量增加，通過鈉鈣交換，鈣離子超載增加影響肝細(xì)胞的損傷[4]。本實(shí)驗(yàn)研究考察黃楊寧對(duì)肝臟的毒性是否通過抑制Na+-K+-ATPase，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃楊寧0.375、1.5mg/kg灌胃給藥8周，對(duì)肝組織Na+-K+-ATPase的活力有抑制作用，推測(cè)黃楊寧的肝毒性可能與Na+-K+-ATPase，抑制能量代謝有相關(guān)性。同時(shí)黃楊寧已有藥效學(xué)研究報(bào)道，其具有擴(kuò)張血管，促進(jìn)血液循環(huán)，與血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO有關(guān)[5]，本實(shí)驗(yàn)研究探究黃楊寧長期給藥對(duì)肝臟的NO含量是否影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃楊寧0.375g、1.5mg/kg給藥8周，與對(duì)照組比較肝組織中NO的含量有顯著下降，與藥效結(jié)果相反，并且藥物如果導(dǎo)致體內(nèi)NO含量下降，會(huì)引起肝臟血管收縮，造成肝臟組織缺血缺氧性損傷，繼而發(fā)生能量代謝紊亂及脂質(zhì)過氧化損傷[6]。因此黃楊寧產(chǎn)生肝臟毒性可能與NO有關(guān)，具體原因有待進(jìn)一步研究。

表1 各組肝組織中NO含量和Na+-K+-ATPase活性比較（±s）

表1 各組肝組織中NO含量和Na+-K+-ATPase活性比較（±s）

與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

對(duì)照組 10 0.56±0.11黃楊寧小劑量組 10 0.24±0.12**黃楊寧大劑量組 10 0.25±0.12**Na+-K+-ATPase（μmol/mg）4.37±1.91 1.94±0.74*1.17±0.81*組 別 n NO（μmol/g）

通過本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)黃楊寧藥效與毒性之間具有一定相關(guān)性，但是否是黃楊寧產(chǎn)生肝毒性的決定和唯一因素，是否還有其他因素共同的參與，需要今后加大劑量繼續(xù)深入研究。（本課題來源于江蘇省中藥藥效與安全性評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，編號(hào)：T09011）

[1]張開山，吳義元.黃楊寧片臨床應(yīng)用概述基層中藥雜志[J].2000，14（4）：52.

[2]溫業(yè)紹，周念輝，胡式冷，等.環(huán)維黃楊星D對(duì)心肌的正性肌力效應(yīng)和細(xì)胞膜Na+-K+-ATPase活力的抑制作用 [J].生理學(xué)報(bào)，1982，34（3）：295.

[3]梁秉文，張朝位.黃楊寧與心腦血管疾病[M].北京：藍(lán)天出版社，2000：202.

[4]寧宗，李貽奎，張榮利.甲基原薯蕷皂苷對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)鈣及ATP酶功能的影響及其機(jī)制酶功能的影響及其機(jī)制[J].中國中藥雜志，2010，35（1）：80.

[5]Vacca G，Battaglia A，Brunelleschi S，et al.Hemodynamic effects of the intravenous administration of cyclorirobuxine D in anesthetized pigs[J].Life Sciences，1997，61（17）：255.

[6]候文艷，劉曉萍，葉芳.一氧化氮對(duì)肝臟的保護(hù)作用研究[J].臨床醫(yī)藥實(shí)踐雜志，2004，13（4）：261.

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1004-745X（2011）09-1442-02

2011-04-27）